本发明提供一种可广泛检测致病性钩端螺旋体的试剂盒及引物，3对退火温度一致，目的条带大小相同的引物组合，可放在同一反应体系，能够准确检测出15中钩体血清型。选择LigL32基因作为检测对象，应用3对特异性引物，实现广泛检测致病性钩端螺旋体的目的。本发明提供了一种省时省力，特异性和敏感性优异，可广泛检测中国钩端螺旋体的PCR引物及试剂盒。本发明提供的引物和试剂盒，可用于钩端螺旋体病的早期诊断在该实验中，建立并组装的广泛检测致病性钩端螺旋体病PCR方法特异性强，并且检测钩体浓度的灵敏度可达到1个钩体的DNA含量。