公开(公告)号：CN119709575A

公开(公告)日：2025-03-28

申请号：CN202411968001.5

申请日：2024-12-30

Applicant: 台州仙琚药业有限公司

Inventor： 雷伟 ,  尹琳琳 ,  徐志杰 ,  陈思宇 ,  欧志敏

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N15/62 ,  C12N9/04 ,  C12N9/02 ,  C12P33/00 ,  C12P33/02 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种双酶偶联共表达工程菌及在制备去氢表雄酮中的应用，所述共表达工程菌同时表达短链脱氢酶和醇脱氢酶。本发明通过筛选高活力催化5AD还原生成去氢表雄酮的短链脱氢酶，并构建双重组质粒偶联表达短链脱氢酶和醇脱氢酶的基因工程菌，直接以工程菌发酵液为催化剂实现双酶协同催化，突破传统酶反应的局限性，通过短链脱氢酶催化5AD还原生成去氢表雄酮，醇脱氢酶转化NADP+生成NADPH，实现辅酶NADPH的再生，避免额外添加辅酶，节约成本。本发明通过添加β‑环糊精作为助溶剂，优化反应体系，显著提高5‑雄烯‑3,17‑二酮还原为去氢表雄酮的效率，底物转化率90％以上。

公开(公告)号：CN119614528A

公开(公告)日：2025-03-14

申请号：CN202411811203.9

申请日：2024-12-10

Applicant: 台州仙琚药业有限公司

Inventor： 陈益俊 ,  罗亮丽 ,  雷伟 ,  聂艺斌 ,  欧志敏

IPC: C12N9/04 ,  C12N15/70 ,  C12P33/02

Abstract: 本发明公开了一种羟基类固醇脱氢酶突变体及在制备甾体类药物中的应用，所述突变体是将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第89位、第185位或第190位进行饱和突变和组合突变获得的。本发明羟基类固醇脱氢酶突变体活性提高，稳定性提高。采用DMSO‑水相体系进一步提高底物转化率，可降低生产成本，提高生产效率。

公开(公告)号：CN119662763A

公开(公告)日：2025-03-21

申请号：CN202411965902.9

申请日：2024-12-30

Applicant: 台州仙琚药业有限公司

Inventor： 陈益俊 ,  刘风强 ,  邹义勇 ,  王乐晓 ,  欧志敏

IPC: C12P33/20 ,  C12N1/16 ,  C12N9/04 ,  C12R1/74

Abstract: 本发明公开了一种微生物全细胞高效制备维库溴胺还原物的方法，以产羰基还原酶的热带假丝酵母经发酵培养获得的含生长细胞的发酵液或发酵液离心得到的湿菌体静息细胞为催化剂，以维库溴胺双胺物为底物，羟乙基‑β‑环糊精为助溶剂，以pH6～10.0的缓冲液为反应介质构成转化体系，在20～40℃、100‑180r/min的摇床中反应完全，将反应液分离纯化，获得所述的维库溴胺还原物。本发明方法无需额外添加辅酶，且微生物易于在较短时间内实现大规模培养，从而获得大量的全细胞作为生物催化剂，成本低廉，有效降低了转化成本，显著提高了转化效率。

公开(公告)号：CN119639698A

公开(公告)日：2025-03-18

申请号：CN202411861272.0

申请日：2024-12-17

Applicant: 台州仙琚药业有限公司

Inventor： 雷伟 ,  罗亮丽 ,  金旦妮 ,  聂艺斌 ,  欧志敏

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P33/02 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种KstD酶突变体、工程菌及在制备甾体药物中的应用，本发明通过丙氨酸扫描、饱和突变和组合突变将KstD酶活性催化中心氨基酸突变，提高3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶酶活，其中突变体Kstd/H141T/Y326G对底物表现出更高的活性，底物终浓度小于或等于30g/L时，96h的转化率为90.5％，前48个小时的转化率较出发菌株提高5.8‑6.3倍，当转化96h时的转化率较原始菌株提高了3.4倍，更适合工业应用。