公开(公告)号：CN119709575A

公开(公告)日：2025-03-28

申请号：CN202411968001.5

申请日：2024-12-30

Applicant: 台州仙琚药业有限公司

Inventor： 雷伟 ,  尹琳琳 ,  徐志杰 ,  陈思宇 ,  欧志敏

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N15/62 ,  C12N9/04 ,  C12N9/02 ,  C12P33/00 ,  C12P33/02 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种双酶偶联共表达工程菌及在制备去氢表雄酮中的应用，所述共表达工程菌同时表达短链脱氢酶和醇脱氢酶。本发明通过筛选高活力催化5AD还原生成去氢表雄酮的短链脱氢酶，并构建双重组质粒偶联表达短链脱氢酶和醇脱氢酶的基因工程菌，直接以工程菌发酵液为催化剂实现双酶协同催化，突破传统酶反应的局限性，通过短链脱氢酶催化5AD还原生成去氢表雄酮，醇脱氢酶转化NADP+生成NADPH，实现辅酶NADPH的再生，避免额外添加辅酶，节约成本。本发明通过添加β‑环糊精作为助溶剂，优化反应体系，显著提高5‑雄烯‑3,17‑二酮还原为去氢表雄酮的效率，底物转化率90％以上。