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公开(公告)号：CN117866775A
公开(公告)日：2024-04-12
申请号：CN202311344217.X
申请日：2023-10-17
申请人： 江西新瑞丰生化股份有限公司 , 南京师范大学
摘要： 本发明属于生物发酵工程技术领域，具体涉及一种藤仓赤霉菌，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏中心登记入册编号为CCTCC NO：M 20231195，拉丁学名Fusariumfujikuroi NRF‑C1，保藏日期为2023.07.05。将已活化的藤仓赤霉菌接种至种子培养基中经培养获得种子液，将种子液接种至发酵培养基中发酵培养获得发酵培养液，再将发酵培养液接种至发酵罐发酵获得发酵液，经过分离纯化获得目标纯度的赤霉素。本发明的藤仓赤霉菌能够利用木质纤维素水解液生长，具有良好的环境适应性和较强的赤霉素生产潜力，适合应用于工业化生产，具有降低生产成本的优势。
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公开(公告)号：CN115491401A
公开(公告)日：2022-12-20
申请号：CN202211304462.3
申请日：2022-10-24
申请人： 江西新瑞丰生化股份有限公司 , 南京师范大学
摘要： 本发明公开了一种赤霉素GA4的发酵工艺，其中涉及一株产赤霉素GA4的菌株，该菌株分类命名为：藤仓赤霉(Fusarium fujikuroi)NRF01，已于2022年5月19日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCCNO.M2022683)，发酵过程采取分阶段控制发酵条件，流加补糖控制发酵液总糖浓度在0.5‑1.0％，流加补氮源控制发酵液氨基氮浓度在84‑126mg/L，发酵5‑7天，赤霉素GA4发酵水平为2186mg/L，本发明提供了一种赤霉素GA4发酵工艺及其应用研究，该菌株能够在较短发酵周期内产生较高产量的赤霉素GA4。通过对该菌株的逐级培养，发酵过程采取分阶段控制发酵条件，流加补糖控制发酵液总糖浓度，流加补氮源控制发酵液氨基氮浓度。
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公开(公告)号：CN116808962A
公开(公告)日：2023-09-29
申请号：CN202310626104.2
申请日：2023-05-30
申请人： 南京师范大学 , 江西新瑞丰生化股份有限公司
摘要： 本发明涉及生物材料技术，公开了一种水凝胶分子印迹反结构光子晶体微球及其制备方法和应用。该反结构光子晶体微球的制备方法包括以下步骤：通过微流控方法制备正结构光子晶体微球；将赤霉素作为印迹分子与含有水凝胶和光引发剂的混合溶液进行混合形成预凝胶混合物，将所述正结构光子晶体微球浸泡于所述预凝胶混合物中得到预凝胶体系；在紫外辐照下将所述预凝胶体系进行固化I后，经剥离得到固化微球；将所述固化微球与蚀刻剂混合进行反应、清洗。该光子晶体微球能够特异高效地识别吸附赤霉素，通过反射峰的偏移值完成定量测定，对赤霉素的检测灵敏度高、检测条件要求低。
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公开(公告)号：CN115595352B
公开(公告)日：2023-03-28
申请号：CN202211616720.1
申请日：2022-12-16
申请人： 南京师范大学 , 江西新瑞丰生化股份有限公司
摘要： 本发明涉及微生物发酵领域，公开了一种提高赤霉菌中赤霉素GA3含量的方法。该方法包括：将赤霉菌接入到含有调节因子的培养基中进行发酵；所述调节因子选自氯贝丁酯、芳氧苯氧丙酸酯、烯草酮和环己二酮中的至少一种。该方法能够有效提高赤霉菌中赤霉素GA3的含量，进而提高赤霉素GA3的产量。
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公开(公告)号：CN117025421A
公开(公告)日：2023-11-10
申请号：CN202310933156.4
申请日：2023-07-26
申请人： 南京师范大学 , 江西新瑞丰生化股份有限公司
摘要： 本发明涉及微生物基因改造技术，公开了一种生产脱落酸的重组菌株及其构建方法和应用。该重组菌株由出发菌株经遗传改造获得，相比于出发菌株，所述重组菌株的HMG‑CoA还原酶的活性增强且表达血红蛋白VHB；其中，所述重组菌株中含有编码氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示的HMG‑CoA还原酶的基因以及编码氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的血红蛋白VHB的基因。发酵生产脱落酸的方法包括：将该重组菌株接种至产酸发酵培养基中进行发酵培养。该重组菌株能够高效、稳定地发酵生产脱落酸，产量较高且发酵成本较低。
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公开(公告)号：CN115960731A
公开(公告)日：2023-04-14
申请号：CN202211415623.6
申请日：2022-11-11
申请人： 南京师范大学 , 江西新瑞丰生化股份有限公司
IPC分类号： C12N1/15 , C12N15/80 , C12N15/54 , C12N9/10 , C12N15/62 , C12N15/29 , C12N1/38 , C12P27/00 , C12R1/645
摘要： 本发明涉及基因工程领域和微生物发酵领域，公开了一种通过蛋白降解下调角鲨烯含量用于提高赤霉素GA3含量的重组菌株及其构建方法和应用。该重组菌株由出发菌株经基因工程改造获得，相比于所述出发菌株，所述重组菌株含有与角鲨烯合酶连接的编码蛋白降解子的基因以及编码辅助蛋白的基因，所述角鲨烯合酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。发酵产赤霉素GA3的方法包括：将该重组菌株接种至发酵培养基中进行发酵。该重组菌株能够在生物素的作用下有效下调角鲨烯的生物合成，提高赤霉素GA3的产量。
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公开(公告)号：CN115595352A
公开(公告)日：2023-01-13
申请号：CN202211616720.1
申请日：2022-12-16
申请人： 南京师范大学(CN) , 江西新瑞丰生化股份有限公司(CN)
摘要： 本发明涉及微生物发酵领域，公开了一种提高赤霉菌中赤霉素GA3含量的方法。该方法包括：将赤霉菌接入到含有调节因子的培养基中进行发酵；所述调节因子选自氯贝丁酯、芳氧苯氧丙酸酯、烯草酮和环己二酮中的至少一种。该方法能够有效提高赤霉菌中赤霉素GA3的含量，进而提高赤霉素GA3的产量。
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公开(公告)号：CN118755750A
公开(公告)日：2024-10-11
申请号：CN202411239470.3
申请日：2024-09-05
申请人： 南京师范大学
IPC分类号： C12N15/80 , C12N15/113 , C12N9/22 , G01N30/02 , C12Q1/6869 , C12Q1/6895 , C12P7/42 , C12N1/15 , C12R1/645
摘要： 本发明涉及微生物基因改造技术，公开了一种微生物基因改造靶点的鉴定方法及其应用。该鉴定方法包括以下步骤：将外源Cas效应蛋白表达框整合到原始菌株中得到改造工程菌，合成靶向原始菌株的基因组编码区的sgRNA文库；将所述sgRNA文库导入所述改造工程菌中获得多个突变菌株；将多个所述突变菌株进行发酵筛选得到目标产物产量高于原始菌株的突变菌株作为目标菌株；对目标菌株进行基因测序，鉴定提高原始菌株合成目标产物能力的基因组靶点。该靶点鉴定方法能够方便、快捷地鉴定出微生物的新靶点，获得高产目标产物的突变菌株，为微生物菌株的代谢工程改造提供了新的平台。
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公开(公告)号：CN117821417B
公开(公告)日：2024-09-24
申请号：CN202410058726.4
申请日：2024-01-16
IPC分类号： C12N9/14 , C12N15/55 , C12N1/21 , C12N15/70 , C12P41/00 , C12P7/22 , C12P17/02 , C12P17/14 , C12R1/19
摘要： 本发明公开了一种卤醇脱卤酶突变体、编码基因、质粒、基因工程菌及其应用，本发明制得的基因工程菌在催化合成(R)‑1‑氯‑3‑苯氧基‑2‑丙醇、(S)‑邻硝基苯基缩水甘油醚、(S)‑对硝基苯基缩水甘油醚、(S)‑4‑(苯氧基甲基)‑2‑恶唑烷酮，(S)‑4‑(2‑硝基苯氧基甲基)‑2‑恶唑烷酮，(S)‑4‑(4‑硝基苯氧基甲基)‑2‑恶唑烷酮时的立体选择性较高，相较卤醇脱卤原始酶的催化合成拆分的纯度和收率更高，反应时间更快，有利于工业生产。
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公开(公告)号：CN118294661B
公开(公告)日：2024-09-10
申请号：CN202410726479.0
申请日：2024-06-06
申请人： 南京师范大学
IPC分类号： G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58 , B01L3/00 , C12N15/115
摘要： 本发明涉及微生物筛选技术，公开了一种基于双乳液体系的高通量筛选微生物菌株的方法及其应用。该方法包括：建立微生物突变体库，构建微流控双乳液芯片；利用微流控双乳液芯片对微生物突变体库中的菌株进行包埋形成双乳液液滴，液滴的内相含有微生物突变体库菌株的培养液与具有生物相容性的溶液的混合物、中间相含有能够特异性结合目标产物的靶标结合元件、外相为含有表面活性剂的氟化油；将双乳液液滴固化成核壳微球后进行培养，利用微球中靶标结合元件与目标产物结合形成指示信号，以对微球进行微流控分选。该高通量筛选方法保证了菌株生长的环境，筛选信号稳定准确，大大提高了筛选的精确性，且适用于小分子有机物的检测。
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