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公开(公告)号:CN111187843A
公开(公告)日:2020-05-22
申请号:CN202010036854.0
申请日:2020-01-14
Applicant: 南京师范大学
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种与杂交黄颡鱼“黄优1号”耐低氧性状相关的SNP分子标记及其应用,所述SNP分子标记是以von Hippel-Lindau disease tumor suppressor(Vhl基因)的cDNA序列为模板设计引物,扩增得出的基因组序列如SEQ ID NO:1所示,本发明还公开了检测该分子标记的引物对、试剂盒和检测方法。该SNP位点与低氧胁迫下杂交黄颡鱼“黄优1号”的存活率显著相关,该位点基因型为TT的个体耐低氧能力显著强于基因型为AA的个体。本发明公开的SNP位点可以不受杂交黄颡鱼“黄优1号”的年龄和性别等限制,适用于杂交黄颡鱼“黄优1号”的耐低氧苗种筛选和分类,可有效提高杂交黄颡鱼“黄优1号”养殖和运输中低氧条件下的存活率。该方法准确可靠,操作简便。
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公开(公告)号:CN114774349B
公开(公告)日:2024-06-25
申请号:CN202210360986.8
申请日:2022-04-07
Applicant: 南京师范大学
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明公开了一种暗纹东方鲀原代肾细胞贴壁培养方法,包括以下步骤:(1)选取体型适中且健康的暗纹东方鲀稚鱼,对鱼体进行消毒后,无菌操作解剖取得肾脏组织;(2)在含青霉素‑链霉素双抗溶液的培养液中清洗,剪碎,在含EDTA的胰蛋白酶中37℃消化,消化后收集到灭菌离心管中,离心后得到肾细胞沉淀;(3)向细胞沉淀中加入适量预温的含暗纹东方鲀血清的完全培养液,得到重悬浮的细胞悬液,转入多聚赖氨酸预处理的细胞培养瓶中培养;本发明首次成功培养出暗纹东方鲀原代肾细胞,所构建的肾细胞原代培养方法简单,培养所需材料易获取,细胞贴壁时间短,生长形态良好,为暗纹东方鲀新品种选育、病害防控、免疫基因功能等研究提供细胞水平材料。
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公开(公告)号:CN115109745A
公开(公告)日:2022-09-27
申请号:CN202210856289.1
申请日:2022-07-21
Applicant: 南京师范大学
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明公开了一种黄颡鱼肝细胞高效分离和原代培养方法;包括以下步骤:无菌解剖并分离黄颡鱼肝脏组织,立即置于组织清洗液中冲洗;将清洗后的肝脏剪碎,加入胶原酶Ⅳ,恒温震荡消化组织块;离心组织消化液,重悬沉淀,过筛,并进一步经分离液离心提纯后,使用含有黄颡鱼血清、胎牛血清、双抗青霉素‑链霉素的DMEM完全培养基重悬沉淀,即获得黄颡鱼原代肝细胞,调整细胞密度后铺瓶培养;本发明黄颡鱼肝细胞高效分离和原代培养方法,操作步骤简单,使用的酶试剂少,分离后肝细胞得率高,经原代培养后,肝细胞生长状态好,生理状态稳定,为后续黄颡鱼肝细胞系的建立和细胞层面科学研究的开展提供了理论和技术支持。
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公开(公告)号:CN114774349A
公开(公告)日:2022-07-22
申请号:CN202210360986.8
申请日:2022-04-07
Applicant: 南京师范大学
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明公开了一种暗纹东方鲀原代肾细胞贴壁培养方法,包括以下步骤:(1)选取体型适中且健康的暗纹东方鲀稚鱼,对鱼体进行消毒后,无菌操作解剖取得肾脏组织;(2)在含青霉素‑链霉素双抗溶液的培养液中清洗,剪碎,在含EDTA的胰蛋白酶中37℃消化,消化后收集到灭菌离心管中,离心后得到肾细胞沉淀;(3)向细胞沉淀中加入适量预温的含暗纹东方鲀血清的完全培养液,得到重悬浮的细胞悬液,转入多聚赖氨酸预处理的细胞培养瓶中培养;本发明首次成功培养出暗纹东方鲀原代肾细胞,所构建的肾细胞原代培养方法简单,培养所需材料易获取,细胞贴壁时间短,生长形态良好,为暗纹东方鲀新品种选育、病害防控、免疫基因功能等研究提供细胞水平材料。
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公开(公告)号:CN116138369A
公开(公告)日:2023-05-23
申请号:CN202211521916.2
申请日:2022-11-30
Applicant: 南京师范大学
IPC: A23K50/80 , A23K10/35 , A23K20/147 , A23K10/30 , A23K10/37 , A23K20/26 , A23K10/22 , A23K20/174 , A23K10/20 , A23K40/10
Abstract: 本发明涉及鱼饲料技术领域,本发明提供一种长吻鮠抗病饲料及其制备方法,其成分包括豆饼粉、谷芽粉、菜子饼粉、大麦粉、磷酸氢钙、青虾粉、复合维生素、福寿螺粉、食盐、假酸浆籽原粉、拉丝粉、轻麸、玉米颗粒和雪花粉,拉丝粉为面粉中提取的小麦蛋白粉,雪花粉为马铃薯经过干燥、膨化等步骤后提取出的白色片状体。通过加入雪花粉和拉丝粉增加整体粘合拉丝性能,可以有效增加饲料本体的粘稠度,使饲料拍打成型后内部锁水密封效果好,同时增大了拉力,提高了整体的抗溶化,通过加入玉米颗粒和轻麸提高了饲料整体的固体比例,有效延长了开始溶化时间,避免了饲料入水后开始溶化时间过快,导致饲料溶化在水中的问题。
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公开(公告)号:CN115537469A
公开(公告)日:2022-12-30
申请号:CN202211198005.0
申请日:2022-09-29
Applicant: 南京师范大学
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11 , C12Q1/6851 , G16B40/00
Abstract: 本发明公开了一种水产养殖中抗生素抗性基因的定量检测及风险评估方法,该方法包括如下步骤:S1.样品水样的采集与总DNA提取;S2.制备目标DNA标准品,并建立实时荧光定量PCR的标准曲线;S3.根据实时荧光定量PCR的标准曲线得到养殖环境水体和养殖生物中的ARGs绝对丰度,并将不同种ARGs的绝对丰度构建ARGs样本数据集;S4.对ARGs样本数据集进行数据误差缩小处理得到ARGs数据误差缩小处理值;S5.对ARGs数据误差缩小处理值进行风险赋值,得到ARGs风险评分,再根据单个ARGs风险评分,计算ARGs总风险评分。本发明在水产养殖环境检测中适用范围广,PCR扩增效率高,测量准确度高。
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公开(公告)号:CN115088667A
公开(公告)日:2022-09-23
申请号:CN202210663029.2
申请日:2022-06-13
Applicant: 南京师范大学
Abstract: 本发明公开了一种无菌环境下养殖长吻鮠装置,包括养殖箱以及位于养殖箱内的升降分隔装置,所述升降分隔装置将养殖箱分隔成上方的养殖室和下方的清理室,所述养殖箱的上下端分别连通有进水管和排水管,所述排水管上装有排水阀,还包括水泵,所述水泵的进水口设置在养殖室,出水口设置在清理室,所述升降分隔装置包括与养殖箱侧壁适配的升降框,所述升降框内平铺有多个并排的翻转板,所述升降框的边缘轴接有横向的清扫轴,所述清扫轴上固接有清扫片,本发明可以在不将长吻鮠捞出的情况下,对长吻鮠的养殖箱进行清理换水,且清理过程中不易惊扰长吻鮠,清理效果好,可以有效提升长吻鮠的养殖环境,降低长吻鮠被细菌侵入概率,提高成活率。
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公开(公告)号:CN119679822A
公开(公告)日:2025-03-25
申请号:CN202510068208.5
申请日:2025-01-16
Applicant: 南京师范大学
Abstract: 本发明公开了一种纳米铜在杀灭鱼类多子小瓜虫中的应用,所述的纳米铜为100nm左右大小的铜颗粒与蒸馏水的混合物。纳米铜对多子小瓜虫有较好的杀灭效果,对掠食体的4h半数有效杀虫浓度(4h‑EC50)为29.7μg/L,对包囊的22h‑EC50为64.5μg/L。此外,纳米铜对黄颡鱼的96h半致死浓度(96h‑LC50)为82.4mg/L,安全浓度为34.8mg/L。经计算,纳米铜对掠食体和包囊的治疗指数(TI)分别为2774和1278,治疗指数高,可以作为安全高效的渔用杀虫剂。本发明的纳米铜具有对鱼类安全、低毒的特点,可以在低浓度下对黄颡鱼安全施用,降低了铜对环境的污染。
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公开(公告)号:CN115109745B
公开(公告)日:2024-05-31
申请号:CN202210856289.1
申请日:2022-07-21
Applicant: 南京师范大学
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明公开了一种黄颡鱼肝细胞高效分离和原代培养方法;包括以下步骤:无菌解剖并分离黄颡鱼肝脏组织,立即置于组织清洗液中冲洗;将清洗后的肝脏剪碎,加入胶原酶Ⅳ,恒温震荡消化组织块;离心组织消化液,重悬沉淀,过筛,并进一步经分离液离心提纯后,使用含有黄颡鱼血清、胎牛血清、双抗青霉素‑链霉素的DMEM完全培养基重悬沉淀,即获得黄颡鱼原代肝细胞,调整细胞密度后铺瓶培养;本发明黄颡鱼肝细胞高效分离和原代培养方法,操作步骤简单,使用的酶试剂少,分离后肝细胞得率高,经原代培养后,肝细胞生长状态好,生理状态稳定,为后续黄颡鱼肝细胞系的建立和细胞层面科学研究的开展提供了理论和技术支持。
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