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公开(公告)号：CN119432846A
公开(公告)日：2025-02-14
申请号：CN202411369969.6
申请日：2024-09-29
Applicant: 南京师范大学
IPC: C12N15/113 , A61K45/00 , A61K31/7088 , A61P31/04 , A61P37/04
Abstract: 本发明公开了一种鱼类circRNA及其应用，所述鱼类为黄颡鱼，所述circRNA命名为circArid4b，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供的鱼类circRNA能够在低氧与细菌感染条件下调控其来源基因的Arid4b表达，并影响凋亡通路和炎症反应，最终调控抗菌反应。本发明还提供了所述circRNA的干扰物，该circRNA干扰物可作为一种鱼类免疫调节剂，显著抑制低氧条件下维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)对黄颡鱼的感染，为低氧环境下高效提高鱼类抗菌免疫能力提供了新方式。
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公开(公告)号：CN114774349B
公开(公告)日：2024-06-25
申请号：CN202210360986.8
申请日：2022-04-07
Applicant: 南京师范大学
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明公开了一种暗纹东方鲀原代肾细胞贴壁培养方法，包括以下步骤：（1）选取体型适中且健康的暗纹东方鲀稚鱼，对鱼体进行消毒后，无菌操作解剖取得肾脏组织；（2）在含青霉素‑链霉素双抗溶液的培养液中清洗，剪碎，在含EDTA的胰蛋白酶中37℃消化，消化后收集到灭菌离心管中，离心后得到肾细胞沉淀；（3）向细胞沉淀中加入适量预温的含暗纹东方鲀血清的完全培养液，得到重悬浮的细胞悬液，转入多聚赖氨酸预处理的细胞培养瓶中培养；本发明首次成功培养出暗纹东方鲀原代肾细胞，所构建的肾细胞原代培养方法简单，培养所需材料易获取，细胞贴壁时间短，生长形态良好，为暗纹东方鲀新品种选育、病害防控、免疫基因功能等研究提供细胞水平材料。
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公开(公告)号：CN115109745A
公开(公告)日：2022-09-27
申请号：CN202210856289.1
申请日：2022-07-21
Applicant: 南京师范大学
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明公开了一种黄颡鱼肝细胞高效分离和原代培养方法；包括以下步骤：无菌解剖并分离黄颡鱼肝脏组织，立即置于组织清洗液中冲洗；将清洗后的肝脏剪碎，加入胶原酶Ⅳ，恒温震荡消化组织块；离心组织消化液，重悬沉淀，过筛，并进一步经分离液离心提纯后，使用含有黄颡鱼血清、胎牛血清、双抗青霉素‑链霉素的DMEM完全培养基重悬沉淀，即获得黄颡鱼原代肝细胞，调整细胞密度后铺瓶培养；本发明黄颡鱼肝细胞高效分离和原代培养方法，操作步骤简单，使用的酶试剂少，分离后肝细胞得率高，经原代培养后，肝细胞生长状态好，生理状态稳定，为后续黄颡鱼肝细胞系的建立和细胞层面科学研究的开展提供了理论和技术支持。
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公开(公告)号：CN114774349A
公开(公告)日：2022-07-22
申请号：CN202210360986.8
申请日：2022-04-07
Applicant: 南京师范大学
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明公开了一种暗纹东方鲀原代肾细胞贴壁培养方法，包括以下步骤：（1）选取体型适中且健康的暗纹东方鲀稚鱼，对鱼体进行消毒后，无菌操作解剖取得肾脏组织；（2）在含青霉素‑链霉素双抗溶液的培养液中清洗，剪碎，在含EDTA的胰蛋白酶中37℃消化，消化后收集到灭菌离心管中，离心后得到肾细胞沉淀；（3）向细胞沉淀中加入适量预温的含暗纹东方鲀血清的完全培养液，得到重悬浮的细胞悬液，转入多聚赖氨酸预处理的细胞培养瓶中培养；本发明首次成功培养出暗纹东方鲀原代肾细胞，所构建的肾细胞原代培养方法简单，培养所需材料易获取，细胞贴壁时间短，生长形态良好，为暗纹东方鲀新品种选育、病害防控、免疫基因功能等研究提供细胞水平材料。
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公开(公告)号：CN109971700B
公开(公告)日：2021-09-28
申请号：CN201910183907.9
申请日：2019-03-12
Applicant: 南京师范大学
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明公开了一种暗纹东方鲀原代鳃细胞培养方法，包括以下步骤：(1)取暗纹东方鲀鳃组织，利用含有双抗青霉素和链霉素的浸泡液浸泡，清洗液清洗后，切割鳃丝；(2)使用胰蛋白酶消化鳃丝，过滤，离心，取沉淀；随后使用红细胞裂解液去除红细胞，离心，得细胞沉淀；(3)细胞沉淀中加完全培养液，吹打细胞，补足完全培养液，进行培养。相对于现有技术，应用本发明方法进行暗纹东方鲀原代鳃细胞培养，能有效分离组织，且鱼鳃消化处理后细胞得率高，培养的细胞生长良好、生理状态稳定，达到实验研究标准，能够从根本上提供暗纹东方鲀养殖生产中可能出现各种病害问题的研究途径，突破暗纹东方鲀研究瓶颈。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111979336A
公开(公告)日：2020-11-24
申请号：CN202010781478.8
申请日：2020-08-05
Applicant: 南京师范大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种用于鉴别暗纹东方鲀、红鳍东方鲀及杂交东方鲀的特异性引物及其方法，所述特异性引物包括正向引物和反向引物，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1-2所示。其鉴别方法首先采集待鉴别的河鲀样品，提取基因组DNA；然后以三种河鲀鱼基因组DNA为模板，用引物对其进行PCR扩增；最后对扩增产物进行电泳并根据条带差异进行鉴定。利用本发明的特异性引物鉴别暗纹东方鲀、红鳍东方鲀及杂交东方鲀的方法无需微卫星上机测序等复杂步骤，仅根据条带数量和位置即可快速准确的对三种鱼进行区分，具有稳定性好、实用性强、操作简单、准确率高等优点。
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公开(公告)号：CN110684718A
公开(公告)日：2020-01-14
申请号：CN201911044137.6
申请日：2019-10-30
Applicant: 南京师范大学
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明公开了一种暗纹东方鲀原代肝细胞分离及培养方法，包括以下步骤：(1)选取暗纹东方鲀稚鱼，无菌解剖摘取肝脏，清洗，剪碎；(2)将剪碎的肝脏利用胶原酶Ⅱ消化液消化，过滤，离心，沉淀中加入裂解液处理后得细胞悬液，然后加入到分离液中，离心去除杂质；(3)向沉淀中加预温过的完全培养基，混匀，补足完全培养基，进行培养。对于现有技术，本发明暗纹东方鲀原代肝细胞分离及培养方法，能够解决肝细胞分离困难的问题，并且肝细胞分离效率高，培养得到的细胞生长良好，生理状态稳定，符合原代培养要求。
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公开(公告)号：CN109825603A
公开(公告)日：2019-05-31
申请号：CN201910261299.9
申请日：2019-04-02
Applicant: 南京师范大学
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11 , C12Q1/6858
Abstract: 本发明公开了一种与培育含肉率高体型的杂交黄颡鱼“黄优1号”生长性状相关的SNP分子标记及其应用，所述SNP分子标记的序列如SEQ ID NO:1所示，所述SNP分子标记位于所述SEQ ID NO：1所示序列的第118位，碱基为C或T。本发明还公开了检测该分子标记的引物对、试剂盒和检测方法。利用该SNP位点，可以有效筛选出体长/头长比值更大体型的杂交黄颡鱼“黄优1号”。本发明公开的SNP位点可以不受杂交黄颡鱼“黄优1号”的年龄、性别等限制，可用于杂交黄颡鱼“黄优1号”的前期苗种体型挑选和分类，从而有效提高杂交黄颡鱼“黄优1号”的含肉率，并显著增加杂交黄颡鱼“黄优1号”的养殖经济效益。该方法准确可靠，操作简便。
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公开(公告)号：CN107155959A
公开(公告)日：2017-09-15
申请号：CN201710292086.3
申请日：2017-04-28
Applicant: 南京师范大学
Abstract: 本发明主要涉及一种改良黄颡鱼生长性状的复合育种方法，主要包括以下步骤：首先，通过二代群体选育获得优质的黄颡鱼和瓦氏黄颡鱼亲本库；接着利用微卫星标记检测黄颡鱼和瓦氏黄颡鱼亲本，挑选遗传相似度在90％以上的亲本个体作为繁殖群体；然后以黄颡鱼雌鱼为母本，瓦氏黄颡鱼雄鱼为父本，进行杂交制种，最后获得比普通颡鱼生长速度快20％以上的杂交黄颡鱼，兼具了双亲的优良性状，体色诱人(偏母本)、生长快速(偏父本)。通过本复合育种方法获得改良的杂交黄颡鱼对提高单位产量、养殖效益、服务生产实践均有重要意义。
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公开(公告)号：CN104789676B
公开(公告)日：2017-05-24
申请号：CN201510187408.9
申请日：2015-04-20
Applicant: 南京师范大学
Abstract: 本发明公开了一鉴别黄颡鱼、瓦氏黄颡鱼及杂交黄颡鱼的引物、试剂盒及方法，所引物的序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示。所述试剂盒包括上述引物和PCR反应液。本发明应用PCR和STR分型等组合技术筛选和研制出一种可快速、准确地鉴别黄颡鱼、瓦氏黄颡鱼及杂交黄颡鱼的微卫星引物和试剂盒，该试剂盒可服务于研究黄颡鱼的科研及推广单位、苗种生产企业(繁育场)及养殖户，一方面可用于鉴别三种黄颡鱼(黄颡鱼、瓦氏黄颡鱼及其杂交黄颡鱼)苗种，另一方面，可用于黄颡鱼、瓦氏黄颡鱼及其杂交黄颡鱼的种质标准制定。
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