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公开(公告)号：CN114774349B
公开(公告)日：2024-06-25
申请号：CN202210360986.8
申请日：2022-04-07
Applicant: 南京师范大学
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明公开了一种暗纹东方鲀原代肾细胞贴壁培养方法，包括以下步骤：（1）选取体型适中且健康的暗纹东方鲀稚鱼，对鱼体进行消毒后，无菌操作解剖取得肾脏组织；（2）在含青霉素‑链霉素双抗溶液的培养液中清洗，剪碎，在含EDTA的胰蛋白酶中37℃消化，消化后收集到灭菌离心管中，离心后得到肾细胞沉淀；（3）向细胞沉淀中加入适量预温的含暗纹东方鲀血清的完全培养液，得到重悬浮的细胞悬液，转入多聚赖氨酸预处理的细胞培养瓶中培养；本发明首次成功培养出暗纹东方鲀原代肾细胞，所构建的肾细胞原代培养方法简单，培养所需材料易获取，细胞贴壁时间短，生长形态良好，为暗纹东方鲀新品种选育、病害防控、免疫基因功能等研究提供细胞水平材料。
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公开(公告)号：CN114774349A
公开(公告)日：2022-07-22
申请号：CN202210360986.8
申请日：2022-04-07
Applicant: 南京师范大学
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明公开了一种暗纹东方鲀原代肾细胞贴壁培养方法，包括以下步骤：（1）选取体型适中且健康的暗纹东方鲀稚鱼，对鱼体进行消毒后，无菌操作解剖取得肾脏组织；（2）在含青霉素‑链霉素双抗溶液的培养液中清洗，剪碎，在含EDTA的胰蛋白酶中37℃消化，消化后收集到灭菌离心管中，离心后得到肾细胞沉淀；（3）向细胞沉淀中加入适量预温的含暗纹东方鲀血清的完全培养液，得到重悬浮的细胞悬液，转入多聚赖氨酸预处理的细胞培养瓶中培养；本发明首次成功培养出暗纹东方鲀原代肾细胞，所构建的肾细胞原代培养方法简单，培养所需材料易获取，细胞贴壁时间短，生长形态良好，为暗纹东方鲀新品种选育、病害防控、免疫基因功能等研究提供细胞水平材料。
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公开(公告)号：CN119679822A
公开(公告)日：2025-03-25
申请号：CN202510068208.5
申请日：2025-01-16
Applicant: 南京师范大学
Abstract: 本发明公开了一种纳米铜在杀灭鱼类多子小瓜虫中的应用，所述的纳米铜为100nm左右大小的铜颗粒与蒸馏水的混合物。纳米铜对多子小瓜虫有较好的杀灭效果，对掠食体的4h半数有效杀虫浓度(4h‑EC50)为29.7μg/L，对包囊的22h‑EC50为64.5μg/L。此外，纳米铜对黄颡鱼的96h半致死浓度(96h‑LC50)为82.4mg/L，安全浓度为34.8mg/L。经计算，纳米铜对掠食体和包囊的治疗指数(TI)分别为2774和1278，治疗指数高，可以作为安全高效的渔用杀虫剂。本发明的纳米铜具有对鱼类安全、低毒的特点，可以在低浓度下对黄颡鱼安全施用，降低了铜对环境的污染。
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公开(公告)号：CN116640722A
公开(公告)日：2023-08-25
申请号：CN202310563005.4
申请日：2023-05-18
Applicant: 南京师范大学
Abstract: 本发明公开了一种黄颡鱼头肾成纤维细胞传代培养方法，该方法包括以下步骤：(1)选取健康的黄颡鱼，取样前饥饿24小时；(2)对黄颡鱼进行静脉取血，所得血液静置至析出血清，将血清离心过滤后冻存备用；(3)对静脉取血后的黄颡鱼进行解剖，将获得的头肾组织进行消化；(4)制备完全培养液；(5)细胞原代培养；(6)细胞传代培养。本发明培养方法简单，材料易获取，成功培养了黄颡鱼的头肾细胞，传代后细胞呈成纤维样；本发明利用黄颡鱼同源血清，首次在体外成功培养了连续传代的黄颡鱼头肾细胞，细胞形态好、存活时间长，可以大量提供黄颡鱼头肾细胞，可应用于黄颡鱼免疫和病害基因功能等方面的研究。
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