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公开(公告)号：CN110317778A
公开(公告)日：2019-10-11
申请号：CN201910551879.1
申请日：2019-06-25
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
IPC: C12N5/0735 , C12N5/02
Abstract: 本发明属于培养基领域，具体为一种EB66细胞株悬浮生长无血清化学成分界定培养基，添加剂A中各物质在所述培养基中浓度为：胰岛素1-10mg/L；IGF-1 5-10μg/L；腐胺0.5-2mg；谷胱甘肽0.5-5mg/L；乙醇胺1-5mg/L；β-巯基乙醇10-50μM；卵磷脂1-5mg/L；维生素C 10-50mg/L；牛磺酸50-100mg/L；胆固醇2-5mg/L；谷氨酰胺3-6mM；每1L培养基中所述氨基酸混合组分添加量为1000mg-3000mg。该培养基支持EB66细胞在无血清、全悬浮的条件下快速增殖，倍增时间短。细胞呈现较高密度，同时，本发明还提供该培养基的制备方法。
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公开(公告)号：CN108261543A
公开(公告)日：2018-07-10
申请号：CN201810128488.4
申请日：2018-02-08
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
IPC: A61K39/17 , A61K39/215 , A61K39/145 , C12N7/00 , A61P31/14 , A61P31/16 , C12R1/09
CPC classification number: A61K39/12 , A61K2039/5252 , A61K2039/70 , C12N7/00 , C12N2760/16134 , C12N2760/16152 , C12N2760/18134 , C12N2760/18152 , C12N2770/20034 , C12N2770/20052
Abstract: 本发明提供了一种传代细胞源鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感三联灭活疫苗的制备方法及其应用，包括步骤如下：取EB66细胞于生物反应器中进行生长培养，用于病毒接种；采用二阶培养法，向EB66细胞接种新城疫病毒、传染性支气管炎病毒或禽流感病毒；在接毒24h后，病毒EID50达到最高时收获病毒并保存，得到病毒液；重复上述步骤以分别获得新城疫病毒、传染性支气管炎病毒和禽流感病毒液并灭活；将灭活后的新城疫病毒、传染性支气管炎病毒和禽流感病毒液混合，制备灭活疫苗。本发明采用EB66传代细胞系进行鸡新城疫病毒、传染性支气管炎和禽流感病毒的培养，避免了使用鸡胚造成胚体异源蛋白和外源病毒污染的风险，提高病毒的生产品质，简化病毒的生产工艺。
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公开(公告)号：CN108159412A
公开(公告)日：2018-06-15
申请号：CN201810030757.3
申请日：2018-01-12
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
CPC classification number: A61K39/12 , A61K39/39 , A61K2039/5252 , A61K2039/55511 , A61K2039/70 , C12N7/00 , C12N2760/16151 , C12N2760/18151
Abstract: 本发明公开一种生产细胞源鸡新城疫、禽流感二联灭活疫苗的方法及其产品，该方法包括以下步骤：用EB66传代细胞分别接种鸡新城疫、禽流感病毒株，在病毒EID50效价达到最高时收获病毒并保存；分别灭活鸡新城疫和禽流感病毒；将灭活后的鸡新城疫和禽流感病毒在吐温‑80中完全混合，得到病毒混合液；在病毒混合液中加入已灭菌的油相佐剂，混合乳化配制成二联疫苗。本发明通过采用鸭胚胎干细胞EB66传代细胞系分别进行鸡新城疫和禽流感病毒的培养，然后制备成的二联疫苗具有生产工艺稳定、批间差异小、质量可控、产量和质量显著提高等优点。
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公开(公告)号：CN108635574A
公开(公告)日：2018-10-12
申请号：CN201810461794.X
申请日：2018-05-15
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
IPC: A61K39/145 , A61P31/16 , A61K39/12 , A61P31/14 , C12N7/00
CPC classification number: A61K39/12 , A61K2039/5252 , A61K2039/552 , A61K2039/70 , A61P31/14 , A61P31/16 , C12N7/00 , C12N2760/16134 , C12N2760/16151 , C12N2770/24034 , C12N2770/24051 , A61K2300/00
Abstract: 本发明公开一种生产鸭坦布苏、禽流感二联灭活疫苗的方法及其产品，该方法包括以下步骤：用EB66传代细胞分别接种鸭坦布苏、禽流感病毒株；在病毒ELD50或EID50效价达到最高时分别收获鸭坦布苏、禽流感病毒并保存；分别灭活鸭坦布苏、禽流感病毒；将灭活后的鸭坦布苏和禽流感病毒在吐温-80中完全混合，得到病毒混合液，在病毒混合液中加入已灭菌的油相佐剂，混合乳化，配制成鸭坦布苏、禽流感二联灭活疫苗。本发明通过采用EB66传代细胞系分别进行鸭坦布苏和禽流感病毒的培养，然后制备成的鸭坦布苏、禽流感二联疫苗具有生产工艺稳定、批间差异小、质量可控、产量和质量显著提高等优点。
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公开(公告)号：CN108300704B
公开(公告)日：2022-04-05
申请号：CN201810129825.1
申请日：2018-02-08
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
Abstract: 本发明提供了一种用传代细胞系悬浮培养传染性支气管炎病毒的方法，包括：步骤1：取EB66细胞进行复苏与传代培养；步骤2：对步骤1所得EB66细胞进行鸡传染性支气管炎病毒的接种培养；步骤3：接毒后的EB66细胞每隔6‑12h进行取样，测定病毒的EID50，在病毒EID50达到最高时收获病毒并保存，得到培养后的鸡传染性支气管炎病毒。本发明采用EB66细胞作为鸡传染性支气管炎病毒的培养基质，利用提供用全悬浮传代细胞系EB66细胞进行高效的病毒生产，有效提高支气管炎病毒的培育滴度，从而为实现鸡传染性支气管炎病毒疫苗的大规模培养，降低病毒的培育成本。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107904215B
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN201711439115.0
申请日：2017-12-27
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
IPC: C12N7/00 , C12N7/02 , C12N5/0735 , C12N5/02
Abstract: 本发明公开了一种禽流感病毒的全悬浮培养方法，包括以下步骤：步骤1：取EB66细胞进行生长培养；步骤2：待EB66细胞的密度生长至适于接毒时，采用流加补液接毒工艺向EB66细胞中接种禽流感病毒，进行病毒的增殖培养；步骤3：在接毒24h后，每隔12h取样测定病毒的HA效价，在病毒HA效价达到最高时收获病毒并保存，得到培养后的禽流感病毒。本发明用EB66细胞进行禽流感病毒培养，避免了采用传统鸡胚培养工艺生产时易引入大量杂蛋白的缺点，有效降低鸡只免疫副反应的发生，同时提高培养的禽流感病毒滴度及纯度，进而提高禽流感疫苗的生产品质。
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公开(公告)号：CN109593729A
公开(公告)日：2019-04-09
申请号：CN201811638643.3
申请日：2018-12-29
Applicant: 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学 , 甘肃健顺生物科技有限公司
IPC: C12N7/00 , C12N7/02 , A61K39/235 , A61P31/20
Abstract: 一种禽减蛋综合征病毒全悬浮培养方法，包括以下步骤：(1)在EB66悬浮传代细胞系中驯化禽减蛋综合征病毒，得到种毒；(2)将EB66细胞接种至生物反应器，使其在pH＝7.20±0.1的条件下进行悬浮培养；(3)按禽减蛋综合征病毒与细胞培养基体积比2/1000的比例，将步骤(1)所得种毒接种EB66细胞，培养pH＝7.40±0.1，在病毒效价达到最高时收获病毒液并保存。采用上述方法制得病毒液具有高纯度、高滴度的特点，将其灭活后制备的禽减蛋综合征疫苗具有生产工艺稳定、批间差异小、质量可控、产量和质量显著提高等优点。
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公开(公告)号：CN108261543B
公开(公告)日：2019-03-08
申请号：CN201810128488.4
申请日：2018-02-08
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
IPC: A61K39/17 , A61K39/215 , A61K39/145 , C12N7/00 , A61P31/14 , A61P31/16 , C12R1/09
Abstract: 本发明提供了一种传代细胞源鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感三联灭活疫苗的制备方法及其应用，包括步骤如下：取EB66细胞于生物反应器中进行生长培养，用于病毒接种；采用二阶培养法，向EB66细胞接种新城疫病毒、传染性支气管炎病毒或禽流感病毒；在接毒24h后，病毒EID50达到最高时收获病毒并保存，得到病毒液；重复上述步骤以分别获得新城疫病毒、传染性支气管炎病毒和禽流感病毒液并灭活；将灭活后的新城疫病毒、传染性支气管炎病毒和禽流感病毒液混合，制备灭活疫苗。本发明采用EB66传代细胞系进行鸡新城疫病毒、传染性支气管炎和禽流感病毒的培养，避免了使用鸡胚造成胚体异源蛋白和外源病毒污染的风险，提高病毒的生产品质，简化病毒的生产工艺。
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公开(公告)号：CN107904215A
公开(公告)日：2018-04-13
申请号：CN201711439115.0
申请日：2017-12-27
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
IPC: C12N7/00 , C12N7/02 , C12N5/0735 , C12N5/02
CPC classification number: C12N7/00 , C12N5/0606 , C12N2760/16151
Abstract: 本发明公开了一种禽流感病毒的全悬浮培养方法，包括以下步骤：步骤1：取EB66细胞进行生长培养；步骤2：待EB66细胞的密度生长至适于接毒时，采用流加补液接毒工艺向EB66细胞中接种禽流感病毒，进行病毒的增殖培养；步骤3：在接毒24h后，每隔12h取样测定病毒的HA效价，在病毒HA效价达到最高时收获病毒并保存，得到培养后的禽流感病毒。本发明用EB66细胞进行禽流感病毒培养，避免了采用传统鸡胚培养工艺生产时易引入大量杂蛋白的缺点，有效降低鸡只免疫副反应的发生，同时提高培养的禽流感病毒滴度及纯度，进而提高禽流感疫苗的生产品质。
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公开(公告)号：CN108300704A
公开(公告)日：2018-07-20
申请号：CN201810129825.1
申请日：2018-02-08
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
Abstract: 本发明提供了一种用传代细胞系悬浮培养传染性支气管炎病毒的方法，包括：步骤1：取EB66细胞进行复苏与传代培养；步骤2：对步骤1所得EB66细胞进行鸡传染性支气管炎病毒的接种培养；步骤3：接毒后的EB66细胞每隔6-12h进行取样，测定病毒的EID50，在病毒EID50达到最高时收获病毒并保存，得到培养后的鸡传染性支气管炎病毒。本发明采用EB66细胞作为鸡传染性支气管炎病毒的培养基质，利用提供用全悬浮传代细胞系EB66细胞进行高效的病毒生产，有效提高支气管炎病毒的培育滴度，从而为实现鸡传染性支气管炎病毒疫苗的大规模培养，降低病毒的培育成本。
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