公开(公告)号：CN108504746A

公开(公告)日：2018-09-07

申请号：CN201810266967.2

申请日：2018-03-29

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 刘向东 ,  南九红 ,  赵书红 ,  李新云 ,  赵志超 ,  张杰 ,  朱猛进 ,  许月园 ,  胡明阳 ,  王昇

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6837 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明属于猪分子标记制备技术领域，具体涉及聚肌胞感染后猪红细胞数目性状相关的SNP分子标记。该分子标记克隆自登陆号为DIAS0002844的CTTNBP2基因，通过PorcineSNP60  技术对该基因进行分型筛选得到一种聚肌胞感染后猪红细胞数目相关SNP的分子标记，该标记的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，在该序列的第222位的碱基处存在一个A/G的等位基因突变，该突变导致PorcineSNP60 分型多态性。公开了筛选分子标记的方法及其关联分析方法的应用。本发明为猪免疫性状尤其是红细胞数目的标记辅助选择提供了一个新的SNP分子标记。

公开(公告)号：CN112553202B

公开(公告)日：2025-01-14

申请号：CN202011460628.1

申请日：2020-12-12

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 王恒 ,  彭哲伦 ,  刘瑞歌 ,  马彤彤 ,  王昇 ,  付珊珊 ,  朱桂玉

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/10 ,  C40B50/06

Abstract: 本发明属于动物基因组编辑技术领域，具体涉及三对特异性识别猪GDF11基因的sgRNA及应用。本发明利用CRISPR/Cas9系统敲除猪GDF11基因的sgRNA导向序列，该特异性sgRNA导向序列靶向猪GDF11基因TGFB区域的起始密码子ATG。通过将本发明提供的sgRNA导向序列以及CRISPR/Cas9系统的结合使用，可以实现猪中GDF11基因TGFB区域的编辑或敲除，进而实现GDF1基因的标记或低表达，为制备GDF11转基因猪奠定了基础。

公开(公告)号：CN106190962B

公开(公告)日：2019-11-29

申请号：CN201610602491.6

申请日：2016-07-27

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 曹建华 ,  王昇 ,  任瑞敏 ,  黄英 ,  赵书红

IPC: C12N5/077

Abstract: 本发明属于动物细胞培养技术领域，具体涉及一种猪骨骼肌卫星细胞的培养PM+及其应用。所述的猪骨骼肌卫星细胞培养的培养基PM+，按重量/体积计的成分如下所述：培养基PM+总体积为1L，添加胎牛血清(FBS)20％；细胞培养添加剂(GlutaMax)1％；非必需氨基酸(NEAA)1％；抗生素‑抗真菌剂(AA)1％；鸡胚培养物0.5％；庆大霉素50mg/L；碱性成纤维细胞生长因子终浓度为25μL/L，用RPMI 1640液体基础培养基补足至培养基PM+总体积的全量。本发明还公开了该培养基的应用。

公开(公告)号：CN108504746B

公开(公告)日：2021-08-03

申请号：CN201810266967.2

申请日：2018-03-29

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 刘向东 ,  南九红 ,  赵书红 ,  李新云 ,  赵志超 ,  张杰 ,  朱猛进 ,  许月园 ,  胡明阳 ,  王昇

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6837 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明属于猪分子标记制备技术领域，具体涉及聚肌胞感染后猪红细胞数目性状相关的SNP分子标记。该分子标记克隆自登陆号为DIAS0002844的CTTNBP2基因，通过PorcineSNP60技术对该基因进行分型筛选得到一种聚肌胞感染后猪红细胞数目相关SNP的分子标记，该标记的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，在该序列的第222位的碱基处存在一个A/G的等位基因突变，该突变导致PorcineSNP60分型多态性。公开了筛选分子标记的方法及其关联分析方法的应用。本发明为猪免疫性状尤其是红细胞数目的标记辅助选择提供了一个新的SNP分子标记。

公开(公告)号：CN107254512A

公开(公告)日：2017-10-17

申请号：CN201710319114.6

申请日：2017-06-21

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 曹建华 ,  任瑞敏 ,  黄英 ,  孙艳 ,  王昇 ,  赵书红

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/6806 ,  C12Q2527/125 ,  C12Q2527/127

Abstract: 本发明属于家畜免疫学技术领域，具体涉及一种猪组织染色质免疫沉淀处理方法。该方法简称为ChIP。本发明专门针对猪组织进行优化设计，采用组织裂解液与Dounce研磨器相结合，开发适合猪组织匀浆的方法、步骤和流程，使组织裂解充分，组织悬液均匀，得到的chromatin量大且质量高，后续ChIP‑Seq实验的峰图质量高。本发明简单、快速、有效的制备组织悬液，能满足ChIP‑Seq实验的核心要求，为开展猪的组织表观基因组学研究提供了有效途径。

公开(公告)号：CN106190962A

公开(公告)日：2016-12-07

申请号：CN201610602491.6

申请日：2016-07-27

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 曹建华 ,  王昇 ,  任瑞敏 ,  黄英 ,  赵书红

IPC: C12N5/077

Abstract: 本发明属于动物细胞培养技术领域，具体涉及一种猪骨骼肌卫星细胞的培养PM+及其应用。所述的猪骨骼肌卫星细胞培养的培养基PM+，按重量/体积计的成分如下所述：培养基PM+总体积为1L，添加胎牛血清(FBS)20％；细胞培养添加剂(GlutaMax)1％；非必需氨基酸(NEAA)1％；抗生素-抗真菌剂(AA)1％；鸡胚培养物0.5％；庆大霉素50mg/L；碱性成纤维细胞生长因子终浓度为25μL/L，用RPMI 1640液体基础培养基补足至培养基PM+总体积的全量。本发明还公开了该培养基的应用。

公开(公告)号：CN112553202A

公开(公告)日：2021-03-26

申请号：CN202011460628.1

申请日：2020-12-12

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 王恒 ,  彭哲伦 ,  刘瑞歌 ,  马彤彤 ,  王昇 ,  付珊珊 ,  朱桂玉

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/10 ,  C40B50/06

Abstract: 本发明属于动物基因组编辑技术领域，具体涉及三对特异性识别猪GDF11基因的sgRNA及应用。本发明利用CRISPR/Cas9系统敲除猪GDF11基因的sgRNA导向序列，该特异性sgRNA导向序列靶向猪GDF11基因TGFB区域的起始密码子ATG。通过将本发明提供的sgRNA导向序列以及CRISPR/Cas9系统的结合使用，可以实现猪中GDF11基因TGFB区域的编辑或敲除，进而实现GDF1基因的标记或低表达，为制备GDF11转基因猪奠定了基础。

公开(公告)号：CN108411003A

公开(公告)日：2018-08-17

申请号：CN201810499405.2

申请日：2018-05-22

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 刘向东 ,  王梦芬 ,  赵书红 ,  李新云 ,  赵志超 ,  张杰 ,  朱猛进 ,  许月园 ,  胡明阳 ,  王昇

IPC: C12Q1/6888 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明属于动物分子标记筛选技术领域，具体涉及WNT2基因片段作为影响猪红细胞数目性状的分子标记，本发明的分子标记克隆自WNT2基因。该分子为WNT2基因的片段，通过基因芯片技术对该基因进行分型筛选得到一种与猪红细胞数目相关的分子标记，该标记的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，在该序列的第24位的碱基处存在一个T/C的等位基因突变，且当SEQ ID NO：1上的第24位核苷酸为C时，判定具有更高的红细胞数目。本发明为猪免疫性状尤其是红细胞数目的标记辅助选择提供了一个新的SNP分子标记。