公开(公告)号：CN115109854A

公开(公告)日：2022-09-27

申请号：CN202110291503.9

申请日：2021-03-18

Applicant: 北华大学

Inventor： 王艳双 ,  李明成 ,  孙丽媛 ,  艾金霞 ,  苑广信 ,  王雪松 ,  张志杰

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及中药分子鉴定领域，是一种乳鹿分子身份证快速鉴定方法及检测试剂盒。鉴定方法包括：乳鹿基因组DNA的提取、设计乳鹿mtDNA Cyt b基因的特异性引物、建立PCR反应体系和反应条件、核酸试纸条鉴定乳鹿真伪图谱和结果判定。试剂盒包括：乳鹿基因组DNA提取试剂、乳鹿PCR鉴定试剂、阳性对照DNA克隆液、空白对照液及核酸试纸条。本发明利用乳鹿独一无二的mtDNA Cytb基因序列，设计的特异性引物，利用PCR技术的特异性、灵敏性特点，利用核酸试纸条技术的简便、快速、低成本优势，所建立的鉴定方法能够特异、准确、快速地鉴定乳鹿与其易混品种；所研制的试剂盒能够使鉴定方法更标准化、更规范化。

公开(公告)号：CN109988849A

公开(公告)日：2019-07-09

申请号：CN201910320851.7

申请日：2019-04-21

Applicant: 北华大学

Inventor： 段思琪 ,  李明成 ,  艾金霞 ,  徐岩 ,  崔琳 ,  王贺 ,  刘佳琳 ,  刘亚晗 ,  陈堃

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/686

Abstract: 本发明涉及食品检测技术领域，是一种鼠肉、山羊肉与绵羊肉多重PCR检测试剂盒，其特点是，它包含：动物组织线粒体DNA提取体系和三种多重PCR反应体系(阳性对照反应体系、阴性对照反应体系和鉴定反应体系)。PCR反应总体系为50μL，其中含有反应缓冲液5μL，dNTP 2‑5μL，MgCl23μL，Taq DNA聚合酶1‑5μL，每种引物0.5‑2μL，待检样本DNA 1‑3μL，余为双蒸馏水。鼠肉、山羊肉与绵羊肉多重PCR鉴定方法是利用细胞色素b具有的种属特异性设计三种特异寡核苷酸引物、确定反应程序和结果判定等步骤，能够同时区别鼠肉、山羊肉及绵羊肉的特异性；具有简便、快速、检测结果可靠等优点。

公开(公告)号：CN110564866A

公开(公告)日：2019-12-13

申请号：CN201910952688.6

申请日：2019-10-09

Applicant: 北华大学

Inventor： 高丽君 ,  艾金霞 ,  徐岩 ,  李明成 ,  周亭亭 ,  翟英南 ,  邵博宇

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明属于中药材鉴定技术领域，特别涉及到一种鹿茸种属鉴定的限制性内切酶及其检测方法。使用此方法可鉴别鹿茸的真伪及种属，包括DNA提取、PCR特异性扩增、用特定的限制性内切酶进行酶切三个部分。通过此方法，可完成对样品真伪的鉴别，如果为正品鹿茸，可进一步鉴定出梅花鹿茸或马鹿茸。该方法具有操作简单、特异性强、便于普及应用等优点。

公开(公告)号：CN108676895A

公开(公告)日：2018-10-19

申请号：CN201810496611.8

申请日：2018-05-22

Applicant: 北华大学

Inventor： 周亭亭 ,  苑广信 ,  艾金霞 ,  王雪松 ,  王艳双

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/683 ,  C12Q1/686

CPC classification number: C12Q1/6888 ,  C12Q1/683 ,  C12Q1/686 ,  C12Q2565/125 ,  C12Q2537/143

Abstract: 本发明公开了一种涉及中药材鹿胎的鉴定方法，具体是采用多重PCR（多重聚合酶链式反应）、RFLP（限制性片段长度多态性分析）结合CE（毛细管电泳技术）建立鹿胎DNA指纹图谱及鉴定方法。具有分辨率高、灵敏度高、高稳定性、操作简便、快速、成本低、易实现自动化分析等特点，能够应用于中药材鹿胎样品的真伪鉴定。

公开(公告)号：CN105039584A

公开(公告)日：2015-11-11

申请号：CN201510593457.2

申请日：2015-09-18

Applicant: 北华大学

Inventor： 王雪松 ,  李明成 ,  艾金霞 ,  夏薇 ,  张丽华 ,  高丽君

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/686 ,  C12Q2521/301 ,  C12Q2535/138

Abstract: 本发明涉及中药鉴定技术领域，具体为一种西洋参DNA检测试剂盒及鉴定方法。一种西洋参DNA检测试剂盒包括样本前处理液，基因组DNA提取体系，PCR反应体系，限制性核酸内切酶反应体系，结果观察体系五部分组成。一种西洋参DNA鉴定方法，包括检测样本前处理，基因组DNA提取，PCR引物设计与合成，建立PCR反应，限制性核酸内切酶反应，结果判定六步。判断标准为同时出现100bp和50bp条带为正品西洋参，只出现一条或不出现均为伪品西洋参。本发明建立的PCR-AFLP鉴定方法具有简便、快速、检测结果可靠等优点，能够准确同时鉴别西洋参和伪品的特异性。

公开(公告)号：CN111206103A

公开(公告)日：2020-05-29

申请号：CN201811395719.4

申请日：2018-11-21

Applicant: 北华大学

Inventor： 李明成 ,  孙丽媛 ,  艾金霞 ,  高丽君 ,  王艳双 ,  王雪松 ,  赵云东

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/686

Abstract: 本发明涉及中药检测技术领域，是一种牛鞭、驴鞭及马鞭多重PCR检测试剂盒，其特征是由鉴定反应、阳性对照反应和阴性对照反应三部分体系组成。总体积为100μL，含有缓冲液，dNTP，引物1、引物2和引物3，Taq DNA聚合酶，模板DNA提取液，双蒸馏水补齐至100μL。一种牛鞭、驴鞭及马鞭多重PCR检测鉴定方法是设计合成牛鞭、驴鞭及马鞭三对特异寡核苷酸引物、确定反应程序和结果判定等步骤。判断标准：琼脂糖凝胶出现扩增长度为254bp的是牛鞭，出现扩增长度为447bp的是驴鞭，出现扩增长度为595bp的是马鞭。牛鞭、驴鞭及马鞭多重PCR检测试剂盒及鉴定方法能够同时准确区别牛鞭、驴鞭及马鞭。

公开(公告)号：CN110358843A

公开(公告)日：2019-10-22

申请号：CN201910686384.X

申请日：2019-07-29

Applicant: 北华大学

Inventor： 孙丽媛 ,  王天添 ,  陈思秀 ,  刘玟妍 ,  关奕泽 ,  艾金霞 ,  李明成 ,  赵云冬 ,  王艳双 ,  高丽君 ,  王雪松

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/686 ,  C12Q1/6806

Abstract: 本发明涉及肉类检测技术领域，是一种狗源性DNA检测试剂盒，其特征是由样本前处理液、线粒体DNA提取体系、PCR反应体系三部分体系组成。PCR反应体系总体系为20μL，其中含有Taq Plus PCR Master Mix 10μL，10mM狗肉引物2μL，待测样品DNA1μL，无菌双蒸馏水7μL。一种狗源性DNA鉴定方法是设计狗肉特异寡核苷酸引物、确定反应程序和结果判定等步骤。判断标准：PCR扩增结果出现481bp条带为正品狗肉，出现多条或不出现均为伪品狗肉，出现393bp条带为伪品狐肉，出现289bp条带为伪品貂肉，参照图1、图2。鉴定方法能够准确鉴定狗肉真伪。

公开(公告)号：CN114959048A

公开(公告)日：2022-08-30

申请号：CN202110115139.0

申请日：2021-01-28

Applicant: 北华大学

Inventor： 刘琳 ,  艾金霞 ,  李明成 ,  李亚茹 ,  周童 ,  孟媛 ,  吴楠 ,  崔琳

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/686 ,  C12Q1/6804

Abstract: 本发明涉及动物源性中药材检测技术领域，是一种金钱白花蛇PCR检测可视化试剂盒及方法，其特点是，包含：线粒体DNA提取体系、特异性PCR反应体系(总体积为50uL)和可视化鉴别试纸条。特异性PCR鉴定方法可对市售金钱白花蛇中药材样本进行真伪鉴别；可视化试纸条鉴定方法是利用引物标记修饰物6‑羧基荧光素和生物素，经PCR反应得到有修饰物标记的目标检测物，试纸条的结合垫进行扩增产物的捕获，判读区进行结果的鉴定。具有操作简单、检测速度快、灵敏度高、成本低等特点，适合用于市售中药材样品的快速检测。

公开(公告)号：CN110714006A

公开(公告)日：2020-01-21

申请号：CN201910465768.9

申请日：2019-05-31

Applicant: 北华大学

Inventor： 王艳双 ,  李明成 ,  孙丽媛 ,  艾金霞 ,  赵云东 ,  周亭亭 ,  苑广信 ,  李盈诺

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明涉及中药现代化研究领域，是一种使用分子克隆及基因测序技术制备川贝母对照药材DNA克隆液的方法。该方法包括：川贝母对照药材基因组DNA的提取，目的基因PCR扩增和回收；目的基因与PGM-T载体连接组成重组DNA分子；重组DNA分子转化到DH5α感受态细胞中；“蓝-白斑”筛选出阳性菌落；提取重组质粒DNA，PCR扩增验证目的基因的正确性；目的基因序列测定与川贝母靶基因进行比对等步骤。本发明能够准确无误的制备出川贝母对照药材DNA克隆液。直接反映贝母独一无二的DNA序列，检测结果具有高度的稳定性、可靠性。并且使得川贝母对照品取之不尽用之不竭，节约更多的正品川贝母用于临床治病救人。

公开(公告)号：CN108456736A

公开(公告)日：2018-08-28

申请号：CN201810446159.4

申请日：2018-05-11

Applicant: 北华大学

Inventor： 孙丽媛 ,  李明成 ,  艾金霞 ,  赵云冬 ,  王艳双 ,  王雪松 ,  高丽君

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/686

Abstract: 本发明涉及中药检测技术领域，是一种牛脊髓DNA鉴定试剂盒，其特征是由样本前处理液、线粒体DNA提取体系、PCR反应体系三部分体系组成。PCR反应体系总体系为20μL，其中含有Taq Plus PCR Master Mix 10μL，10mM牛脊髓引物1μL，待测样品DNA1μL，无菌双蒸馏水8μL。一种牛脊髓DNA鉴定方法是设计牛脊髓特异寡核苷酸引物、确定反应程序和结果判定等步骤。判断标准：PCR扩增结果出现254bp条带为正品牛脊髓，出现多条或不出现均为伪品牛脊髓，鉴定方法能够准确鉴定牛脊髓真伪。