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公开(公告)号:CN111206103A
公开(公告)日:2020-05-29
申请号:CN201811395719.4
申请日:2018-11-21
Applicant: 北华大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686
Abstract: 本发明涉及中药检测技术领域,是一种牛鞭、驴鞭及马鞭多重PCR检测试剂盒,其特征是由鉴定反应、阳性对照反应和阴性对照反应三部分体系组成。总体积为100μL,含有缓冲液,dNTP,引物1、引物2和引物3,Taq DNA聚合酶,模板DNA提取液,双蒸馏水补齐至100μL。一种牛鞭、驴鞭及马鞭多重PCR检测鉴定方法是设计合成牛鞭、驴鞭及马鞭三对特异寡核苷酸引物、确定反应程序和结果判定等步骤。判断标准:琼脂糖凝胶出现扩增长度为254bp的是牛鞭,出现扩增长度为447bp的是驴鞭,出现扩增长度为595bp的是马鞭。牛鞭、驴鞭及马鞭多重PCR检测试剂盒及鉴定方法能够同时准确区别牛鞭、驴鞭及马鞭。
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公开(公告)号:CN110358843A
公开(公告)日:2019-10-22
申请号:CN201910686384.X
申请日:2019-07-29
Applicant: 北华大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12Q1/6806
Abstract: 本发明涉及肉类检测技术领域,是一种狗源性DNA检测试剂盒,其特征是由样本前处理液、线粒体DNA提取体系、PCR反应体系三部分体系组成。PCR反应体系总体系为20μL,其中含有Taq Plus PCR Master Mix 10μL,10mM狗肉引物2μL,待测样品DNA1μL,无菌双蒸馏水7μL。一种狗源性DNA鉴定方法是设计狗肉特异寡核苷酸引物、确定反应程序和结果判定等步骤。判断标准:PCR扩增结果出现481bp条带为正品狗肉,出现多条或不出现均为伪品狗肉,出现393bp条带为伪品狐肉,出现289bp条带为伪品貂肉,参照图1、图2。鉴定方法能够准确鉴定狗肉真伪。
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公开(公告)号:CN107739755A
公开(公告)日:2018-02-27
申请号:CN201711202918.4
申请日:2017-11-27
Applicant: 北华大学
IPC: C12Q1/686
CPC classification number: C12Q1/686 , C12Q2565/125 , C12Q2535/139
Abstract: 本发明公开了一种涉及中药材蕲蛇DNA鉴定技术,该方法具体是CTAB法提取蕲蛇DNA,构建毛细管电泳指纹图谱及鉴定方法。具有分辨率高、操作简便、快速、结果准确等特点,能够用于蕲蛇样品的鉴定。
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公开(公告)号:CN115109854A
公开(公告)日:2022-09-27
申请号:CN202110291503.9
申请日:2021-03-18
Applicant: 北华大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及中药分子鉴定领域,是一种乳鹿分子身份证快速鉴定方法及检测试剂盒。鉴定方法包括:乳鹿基因组DNA的提取、设计乳鹿mtDNA Cyt b基因的特异性引物、建立PCR反应体系和反应条件、核酸试纸条鉴定乳鹿真伪图谱和结果判定。试剂盒包括:乳鹿基因组DNA提取试剂、乳鹿PCR鉴定试剂、阳性对照DNA克隆液、空白对照液及核酸试纸条。本发明利用乳鹿独一无二的mtDNA Cytb基因序列,设计的特异性引物,利用PCR技术的特异性、灵敏性特点,利用核酸试纸条技术的简便、快速、低成本优势,所建立的鉴定方法能够特异、准确、快速地鉴定乳鹿与其易混品种;所研制的试剂盒能够使鉴定方法更标准化、更规范化。
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公开(公告)号:CN108676895A
公开(公告)日:2018-10-19
申请号:CN201810496611.8
申请日:2018-05-22
Applicant: 北华大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/683 , C12Q1/686
CPC classification number: C12Q1/6888 , C12Q1/683 , C12Q1/686 , C12Q2565/125 , C12Q2537/143
Abstract: 本发明公开了一种涉及中药材鹿胎的鉴定方法,具体是采用多重PCR(多重聚合酶链式反应)、RFLP(限制性片段长度多态性分析)结合CE(毛细管电泳技术)建立鹿胎DNA指纹图谱及鉴定方法。具有分辨率高、灵敏度高、高稳定性、操作简便、快速、成本低、易实现自动化分析等特点,能够应用于中药材鹿胎样品的真伪鉴定。
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公开(公告)号:CN107699614A
公开(公告)日:2018-02-16
申请号:CN201711203205.X
申请日:2017-11-27
Applicant: 北华大学
IPC: C12Q1/686
CPC classification number: C12Q1/686 , C12Q2563/107 , C12Q2565/125 , C12Q2525/151
Abstract: 本发明公开了一种涉及中药材乌梢蛇DNA鉴定技术,该方法具体是SSR荧光标记乌梢蛇DNA毛细管电泳指纹图谱及鉴定方法。具有分辨率高、操作简便、快速、结果准确等特点,能够用于乌梢蛇样品的鉴定。
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公开(公告)号:CN110714006A
公开(公告)日:2020-01-21
申请号:CN201910465768.9
申请日:2019-05-31
Applicant: 北华大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明涉及中药现代化研究领域,是一种使用分子克隆及基因测序技术制备川贝母对照药材DNA克隆液的方法。该方法包括:川贝母对照药材基因组DNA的提取,目的基因PCR扩增和回收;目的基因与PGM-T载体连接组成重组DNA分子;重组DNA分子转化到DH5α感受态细胞中;“蓝-白斑”筛选出阳性菌落;提取重组质粒DNA,PCR扩增验证目的基因的正确性;目的基因序列测定与川贝母靶基因进行比对等步骤。本发明能够准确无误的制备出川贝母对照药材DNA克隆液。直接反映贝母独一无二的DNA序列,检测结果具有高度的稳定性、可靠性。并且使得川贝母对照品取之不尽用之不竭,节约更多的正品川贝母用于临床治病救人。
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公开(公告)号:CN108456736A
公开(公告)日:2018-08-28
申请号:CN201810446159.4
申请日:2018-05-11
Applicant: 北华大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686
Abstract: 本发明涉及中药检测技术领域,是一种牛脊髓DNA鉴定试剂盒,其特征是由样本前处理液、线粒体DNA提取体系、PCR反应体系三部分体系组成。PCR反应体系总体系为20μL,其中含有Taq Plus PCR Master Mix 10μL,10mM牛脊髓引物1μL,待测样品DNA1μL,无菌双蒸馏水8μL。一种牛脊髓DNA鉴定方法是设计牛脊髓特异寡核苷酸引物、确定反应程序和结果判定等步骤。判断标准:PCR扩增结果出现254bp条带为正品牛脊髓,出现多条或不出现均为伪品牛脊髓,鉴定方法能够准确鉴定牛脊髓真伪。
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公开(公告)号:CN116356035A
公开(公告)日:2023-06-30
申请号:CN202111623162.7
申请日:2021-12-28
Applicant: 北华大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6804 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及肉类食品的分子鉴定领域,是一种PCR‑免疫胶体金试纸条猪肉快速鉴定方法及检测试剂盒。鉴定方法包括:猪肉基因组DNA的提取、设计猪mtDNA Cyt b基因的特异性引物、建立PCR反应体系和反应条件、胶体金试纸条鉴定猪肉真伪图谱和结果判定。试剂盒包括:猪肉基因组DNA提取试剂、猪肉PCR鉴定试剂、阳性对照DNA克隆液、空白对照液及免疫胶体金试纸条。本发明结合PCR技术的特异性、灵敏性、快速特点,免疫胶体金试纸条技术的可视化、简便、快速、低成本优势,以及试剂盒的标准化、规范化特征,能够实地、特异、准确、快速地鉴定猪肉与其易混品种,具有一定的新颖性、创造性和实用性。
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公开(公告)号:CN110129315A
公开(公告)日:2019-08-16
申请号:CN201910460240.2
申请日:2019-05-30
Applicant: 北华大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明公开了一种从阿胶中快速提取DNA的优化方法。本方法使用DNA纯化柱代替酚、氯仿等有毒的有机溶剂,并经过数次优化,确定了提取阿胶中驴源性基因组DNA的最适条件,有效去除阿胶中的蛋白质成分,最高效率的从深加工的阿胶及阿胶制品中提取出严重降解的DNA。本方法所需试剂安全无毒害,操作简单、省时,可在90min内完成阿胶基因组DNA提取,经聚合酶链式反应、2%琼脂糖凝胶电泳后在78bp处出现特异性条带,克隆测序比对后,与GenBank中已登记的驴物种相似性为100%。本方法提取的DNA纯度高、浓度大,解决了阿胶及阿胶制品DNA难以提取的问题,为分子生物学鉴定提供了关键的技术支持。
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