一种从阿胶中快速提取DNA的优化方法

    公开(公告)号:CN110129315A

    公开(公告)日:2019-08-16

    申请号:CN201910460240.2

    申请日:2019-05-30

    Applicant: 北华大学

    Abstract: 本发明公开了一种从阿胶中快速提取DNA的优化方法。本方法使用DNA纯化柱代替酚、氯仿等有毒的有机溶剂,并经过数次优化,确定了提取阿胶中驴源性基因组DNA的最适条件,有效去除阿胶中的蛋白质成分,最高效率的从深加工的阿胶及阿胶制品中提取出严重降解的DNA。本方法所需试剂安全无毒害,操作简单、省时,可在90min内完成阿胶基因组DNA提取,经聚合酶链式反应、2%琼脂糖凝胶电泳后在78bp处出现特异性条带,克隆测序比对后,与GenBank中已登记的驴物种相似性为100%。本方法提取的DNA纯度高、浓度大,解决了阿胶及阿胶制品DNA难以提取的问题,为分子生物学鉴定提供了关键的技术支持。

    川贝母对照药材DNA克隆液的制备方法

    公开(公告)号:CN110714006A

    公开(公告)日:2020-01-21

    申请号:CN201910465768.9

    申请日:2019-05-31

    Applicant: 北华大学

    Abstract: 本发明涉及中药现代化研究领域,是一种使用分子克隆及基因测序技术制备川贝母对照药材DNA克隆液的方法。该方法包括:川贝母对照药材基因组DNA的提取,目的基因PCR扩增和回收;目的基因与PGM-T载体连接组成重组DNA分子;重组DNA分子转化到DH5α感受态细胞中;“蓝-白斑”筛选出阳性菌落;提取重组质粒DNA,PCR扩增验证目的基因的正确性;目的基因序列测定与川贝母靶基因进行比对等步骤。本发明能够准确无误的制备出川贝母对照药材DNA克隆液。直接反映贝母独一无二的DNA序列,检测结果具有高度的稳定性、可靠性。并且使得川贝母对照品取之不尽用之不竭,节约更多的正品川贝母用于临床治病救人。

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