一种基于不对称PCR和LAMP循环扩增反应进行miRNA快速检测的方法

    公开(公告)号:CN109706226A

    公开(公告)日:2019-05-03

    申请号:CN201910179354.X

    申请日:2019-03-11

    发明人: 程靓 王瑞丽 刘利

    IPC分类号: C12Q1/6844

    摘要: 本发明公开了一种基于不对称PCR和LAMP循环扩增反应进行miRNA快速检测的方法。本发明所提供的检测miRNA的方法是基于不对称PCR和LAMP循环扩增反应对目标miRNA进行检测。本发明基于不对称PCR的链延伸反应生成能够形成哑铃环结构的单链后,在LAMP扩增体系中加入生成的单链,引物对和miRNA引发快速扩增反应,从而完成对miRNA的特异且快速的检测。本发明具有如下优点:高特异性;高灵敏度;检测速度快;高通量同时检测多种miRNA。

    一种基于不对称PCR和LAMP循环扩增反应进行miRNA快速检测的方法

    公开(公告)号:CN109706226B

    公开(公告)日:2021-06-15

    申请号:CN201910179354.X

    申请日:2019-03-11

    发明人: 程靓 王瑞丽 刘利

    IPC分类号: C12Q1/6844

    摘要: 本发明公开了一种基于不对称PCR和LAMP循环扩增反应进行miRNA快速检测的方法。本发明所提供的检测miRNA的方法是基于不对称PCR和LAMP循环扩增反应对目标miRNA进行检测。本发明基于不对称PCR的链延伸反应生成能够形成哑铃环结构的单链后,在LAMP扩增体系中加入生成的单链,引物对和miRNA引发快速扩增反应,从而完成对miRNA的特异且快速的检测。本发明具有如下优点:高特异性;高灵敏度;检测速度快;高通量同时检测多种miRNA。

    一种基于G-四链体探针结构解旋的可视化识别microRNA的检测方法

    公开(公告)号:CN110229872A

    公开(公告)日:2019-09-13

    申请号:CN201910514343.2

    申请日:2019-06-14

    发明人: 程靓 兰玲 刘利

    IPC分类号: C12Q1/6816

    摘要: 本发明公开了一种基于G-四链体探针结构解旋的可视化识别microRNA的检测方法。本发明将G-四链体与血红素结合后的催化特性和G-四链体的结构变化进行结合构建的信号衰减方法能够区分单碱基错配和多碱基错配的miRNA,同时能够区分不同miRNA家族成员。在信号衰减的基础上灵敏度仍能达到4.5nmol/L。本发明所使用探针设计简单,不涉及复杂反应过程。本发明对于miRNA的检测有重要意义。

    制备5-硫/硒修饰尿嘧啶衍生物的方法

    公开(公告)号:CN109651267A

    公开(公告)日:2019-04-19

    申请号:CN201910084307.7

    申请日:2019-01-29

    发明人: 程靓 李学东 刘利

    摘要: 本发明属于有机化学领域,具体涉及一种高效制备5-硫/硒修饰尿嘧啶衍生物的方法。所述方法为:在碘源、氧化剂存在下,在溶剂中,使得式I所示硫酚类化合物或式II所示二硒醚类化合物与式III所示尿嘧啶反应,得到式IV所示5-硫修饰尿嘧啶衍生物或式V所示5-硒修饰尿嘧啶衍生物。本发明提供了一种无金属催化,无预先官能化的一步法制备硫/硒修饰尿嘧啶类化合物的通用方法,该方法绿色简洁可行,原料简单易得,底物范围广,应用前景广泛。

    N<base:Sup>6</base:Sup>‑甲基腺嘌呤的光化学脱甲基方法

    公开(公告)号:CN106967068A

    公开(公告)日:2017-07-21

    申请号:CN201710320303.5

    申请日:2017-05-09

    发明人: 程靓 谢丽君 刘利

    摘要: 本发明涉及N6‑甲基腺嘌呤的特异性光化学脱甲基化方法及其应用。该方法是利用光作为引发剂,在溶剂存在下,在光照条件下使式I所示N6‑甲基腺嘌呤或其衍生物与光敏剂和氧化剂反应,得到式II所示的脱甲基化产物,即可实现脱甲基化。利用本发明的N6‑甲基腺嘌呤的光化学脱甲基化方法及相关化合物,可实现非酶条件下的对核酸的化学调节。本发明为表观遗传学及化学生物学研究领域提供了核酸去甲基化的有效研究方法。

    一种轴手性联芳基酸化合物的合成方法

    公开(公告)号:CN118530107A

    公开(公告)日:2024-08-23

    申请号:CN202310145126.7

    申请日:2023-02-21

    发明人: 刘利 刘琪 程靓

    摘要: 本发明公开了一种轴手性联芳基酸化合物的合成方法。本发明轴手性联芳基酸化合物的合成方法,包括如下步骤:(1)在手性磷酸催化剂的作用下,式Ⅱ所示化合物经不对称Friedel‑Crafts反应,得到式Ⅲ所示化合物;(2)在路易斯酸的存在下,式Ⅲ所示化合物经重排反应,得到式Ⅰ所示化合物;式Ⅰ、式Ⅱ和式Ⅲ中,R选自H、卤素、烷基、苯基、苯氧基、噻吩基、酯基、三氟甲基中的一种或多种。本发明以2‑苯乙烯基茚二酮为原料,通过手性磷酸催化的不对称Friedel‑Crafts反应、重排反应直接得到手性联芳基酸化合物,该方法可实现从头构建轴手性联芳基化合物,更为实用且高效,可由简单原料直接合成具有价值的化合物,且对底物的结构要求较低,应用更为广泛。#imgabs0#

    N6-甲基腺嘌呤的光化学脱甲基方法

    公开(公告)号:CN106967068B

    公开(公告)日:2019-01-11

    申请号:CN201710320303.5

    申请日:2017-05-09

    发明人: 程靓 谢丽君 刘利

    摘要: 本发明涉及N6‑甲基腺嘌呤的特异性光化学脱甲基化方法及其应用。该方法是利用光作为引发剂,在溶剂存在下,在光照条件下使式I所示N6‑甲基腺嘌呤或其衍生物与光敏剂和氧化剂反应,得到式II所示的脱甲基化产物,即可实现脱甲基化。利用本发明的N6‑甲基腺嘌呤的光化学脱甲基化方法及相关化合物,可实现非酶条件下的对核酸的化学调节。本发明为表观遗传学及化学生物学研究领域提供了核酸去甲基化的有效研究方法。

    一种基于点击化学的光响应性环形RNA合成新方法及其应用

    公开(公告)号:CN116333007A

    公开(公告)日:2023-06-27

    申请号:CN202111588775.1

    申请日:2021-12-23

    摘要: 本发明公开了一种基于点击化学的光响应性环形RNA合成新方法及其在CRISPR技术中的应用。在合成RNA链的过程中,在RNA链中的任意位点引入光响应炔基修饰单体,得到修饰RNA,通过点击化学的方式使得修饰RNA与含有双/多叠氮基的有机化合物发生分子间环化反应,得到光响应性环形RNA。现有RNA环化方法只能适用于较短RNA链(20–25nt),而本发明公开方法能够实现长链功能性RNA的高效率环化;且现有方法只能用于RNA链首尾之间的环化,而本方法可根据不同实验需求在链中/链端任意两个位点间实现环化。因此,本方法为RNA环化尤其是响应性环化提供了新的思路。

    一种基于G-四链体探针结构解旋的可视化识别microRNA的检测方法

    公开(公告)号:CN110229872B

    公开(公告)日:2020-11-10

    申请号:CN201910514343.2

    申请日:2019-06-14

    发明人: 程靓 兰玲 刘利

    IPC分类号: C12Q1/6816

    摘要: 本发明公开了一种基于G‑四链体探针结构解旋的可视化识别microRNA的检测方法。本发明将G‑四链体与血红素结合后的催化特性和G‑四链体的结构变化进行结合构建的信号衰减方法能够区分单碱基错配和多碱基错配的miRNA,同时能够区分不同miRNA家族成员。在信号衰减的基础上灵敏度仍能达到4.5nmol/L。本发明所使用探针设计简单,不涉及复杂反应过程。本发明对于miRNA的检测有重要意义。