一种高通量测序污染检测用分子标签组及其应用

    公开(公告)号:CN111944806A

    公开(公告)日:2020-11-17

    申请号:CN202010751025.0

    申请日:2020-07-30

    Abstract: 本发明提供一种高通量测序污染检测用分子标签组,所述分子标签组中包括若干不同的分子标签;不同的分子标签长度不同;所述分子标签为核酸片段。利用本发明所述的分子标签组进行样本检测时,在样本预处理前,将适量拷贝的分子标签混入样本中,样本类型包括但不限于血液、唾液、血浆、DNA等。混入有分子标签的样本进行核酸提取、文库构建、多重PCR、杂交捕获等环节,最终通过特异性地扩增文库中包含的分子标签,并利用片段分析仪器检测扩增产物长度分布,快速简单地判断样本是否发生混淆或交叉污染并确定污染源。

    一种染色体结构变异断点的定位方法及装置

    公开(公告)号:CN113416770B

    公开(公告)日:2024-09-24

    申请号:CN202110593000.7

    申请日:2021-05-28

    Abstract: 本发明涉及基因检测技术领域,特别是涉及一种染色体结构变异断点的定位方法,所述方法包括如下步骤:1)利用光学图谱平台获得待测染色体结构变异信息,所述染色体结构变异信息包括染色体结构变异类型、断点区域、断点区域上下游染色体片段的正常来源染色体;2)根据所述染色体结构变异类型,分别以正常来源染色体的DNA为模板设计用于扩增所述断点区域的扩增引物对以及验证引物;3)利用步骤2)获得的扩增引物对PCR扩增待测染色体后进行测序,从而定位染色体结构变异断点。本发明的染色体结构变异断点的定位方法可将断点精确至bp级别,成本低、周期短、准确度高、效率高,且易于推广,是染色体结构变异断点精确定位的有效方法。

    一种染色体结构变异断点的定位方法及装置

    公开(公告)号:CN113416770A

    公开(公告)日:2021-09-21

    申请号:CN202110593000.7

    申请日:2021-05-28

    Abstract: 本发明涉及基因检测技术领域,特别是涉及一种染色体结构变异断点的定位方法,所述方法包括如下步骤:1)利用光学图谱平台获得待测染色体结构变异信息,所述染色体结构变异信息包括染色体结构变异类型、断点区域、断点区域上下游染色体片段的正常来源染色体;2)根据所述染色体结构变异类型,分别以正常来源染色体的DNA为模板设计用于扩增所述断点区域的扩增引物对以及验证引物;3)利用步骤2)获得的扩增引物对PCR扩增待测染色体后进行测序,从而定位染色体结构变异断点。本发明的染色体结构变异断点的定位方法可将断点精确至bp级别,成本低、周期短、准确度高、效率高,且易于推广,是染色体结构变异断点精确定位的有效方法。

    一种富集目标区域再酶切构建单倍型的方法

    公开(公告)号:CN114507707A

    公开(公告)日:2022-05-17

    申请号:CN202011276075.4

    申请日:2020-11-16

    Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域,特别是涉及一种富集目标区域再酶切构建单倍型的方法,所述方法包括以下步骤:1)富集目标核酸区域;2)设计仅能与目标核酸区域中的一个单倍体结合的向导序列,利用向导序列以及限制性核酸内切酶酶切步骤1)富集的目标核酸区域,分别回收酶切片段和/或未被酶切的片段;3)利用步骤2)回收的酶切片段和/或未被酶切的片段分别制备测序文库并测序,数据分析分别得到酶切片段和/或未被酶切的片段的核酸序列的SNP信息,即为目标核酸区域的单倍型信息。本发明的方法可以靶向基因组上一个较小区域且实验操作简便、成本低。

    一种单倍型的构建方法
    6.
    发明公开

    公开(公告)号:CN114250279A

    公开(公告)日:2022-03-29

    申请号:CN202011004177.0

    申请日:2020-09-22

    Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域,特别是涉及一种单倍型的构建方法,所述构建方法包括以下步骤:针对目的基因设计多对PCR引物,以使扩增后相邻两条PCR产物具有重叠区域,且所有PCR产物能完全覆盖目的基因;利用设计的PCR引物扩增目的基因;以扩增得到的所有PCR产物为模板进行长读长二代测序文库构建并上机测序;数据分析:通过组装获得目的基因的单倍型信息。可以利用现有的长读长二代测序技术实现目标区域的靶向单倍型检测,极大地提高现有的长读长二代测序技术的应用范围;此外,也在靶向测序领域实现了单倍型检测的可能;以更低的成本实现靶向基因组单倍型检测,且准确率达到了100%。

    一种降低核酸扩增复制滑移率的方法

    公开(公告)号:CN111154820A

    公开(公告)日:2020-05-15

    申请号:CN202010030832.3

    申请日:2020-01-13

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,特别是涉及一种降低核酸扩增复制滑移率的方法。本发明提供一种降低核酸扩增复制滑移率的方法,包括:在SD聚合酶存在的条件下对模板核酸进行扩增,以提供扩增产物,所述模板核酸包括重复序列,所述重复序列包括多个重复单元,所述扩增产物的复制滑移率≤8%。本发明所提供的降低核酸扩增复制滑移率的方法及其相关试剂盒、以及PCR扩增体系,能够有效减少核酸扩增中出现的非特异性扩增和复制滑移,其扩增获得的产物具有优良的扩增忠实性,具有良好的产业化前景。

    一种单倍型的构建方法
    8.
    发明授权

    公开(公告)号:CN114250279B

    公开(公告)日:2024-04-30

    申请号:CN202011004177.0

    申请日:2020-09-22

    Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域,特别是涉及一种单倍型的构建方法,所述构建方法包括以下步骤:针对目的基因设计多对PCR引物,以使扩增后相邻两条PCR产物具有重叠区域,且所有PCR产物能完全覆盖目的基因;利用设计的PCR引物扩增目的基因;以扩增得到的所有PCR产物为模板进行长读长二代测序文库构建并上机测序;数据分析:通过组装获得目的基因的单倍型信息。可以利用现有的长读长二代测序技术实现目标区域的靶向单倍型检测,极大地提高现有的长读长二代测序技术的应用范围;此外,也在靶向测序领域实现了单倍型检测的可能;以更低的成本实现靶向基因组单倍型检测,且准确率达到了100%。

    一种降低核酸扩增复制滑移率的方法

    公开(公告)号:CN111154820B

    公开(公告)日:2021-12-21

    申请号:CN202010030832.3

    申请日:2020-01-13

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,特别是涉及一种降低核酸扩增复制滑移率的方法。本发明提供一种降低核酸扩增复制滑移率的方法,包括:在SD聚合酶存在的条件下对模板核酸进行扩增,以提供扩增产物,所述模板核酸包括重复序列,所述重复序列包括多个重复单元,所述扩增产物的复制滑移率≤8%。本发明所提供的降低核酸扩增复制滑移率的方法及其相关试剂盒、以及PCR扩增体系,能够有效减少核酸扩增中出现的非特异性扩增和复制滑移,其扩增获得的产物具有优良的扩增忠实性,具有良好的产业化前景。

    一种测序平台标签序列污染的检测方法

    公开(公告)号:CN111304309A

    公开(公告)日:2020-06-19

    申请号:CN202010152944.6

    申请日:2020-03-06

    Abstract: 本发明提供一种测序平台标签序列污染的检测方法,至少包括以下步骤:(1)将待测标签序列与已知序列连接,获得标签序列-已知序列,测序平台的标签序列种类固定且已知;(2)对步骤(1)获得的序列进行测序,获得测序结果,所述测序结果包括序列的碱基排列和序列的数量;(3)根据标签序列的种类的不同,对测序结果进行拆分,若一已知序列rm除了在其对应的标签序列Tm的分类结果中出现外,还在其他标签序列Tn的分类结果中出现,则所述标签序列Tm被所述其他标签序列Tn污染;其中,m,n为自然数,且m≠n。本发明通过验证标签序列的单一性,保证后续的下机数据的可信性。

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