公开(公告)号：CN108753833A

公开(公告)日：2018-11-06

申请号：CN201810525963.1

申请日：2018-05-28

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 张庆华 ,  岳倩文 ,  季策 ,  徐行 ,  张秋月 ,  李伟明

IPC: C12N15/90 ,  C12N15/113 ,  A01K67/027

CPC classification number: C12N15/902 ,  A01K67/0276 ,  A01K2217/075 ,  A01K2227/40 ,  C07K14/47 ,  C12N15/113 ,  C12N2310/20

Abstract: 本发明公开了涉及一种斑马鱼notch3基因突变体的制备方法；包括如下步骤：确定notch3基因敲除的靶点位置；以pUC19‑gRNA scaffold质粒为模板，使用引物T7‑notch3‑sfd、tracr rev进行PCR扩增；对PCR产物纯化、体外转录获得gRNA；将gRNA与Cas9蛋白导入斑马鱼胚胎一细胞期中，培养获得稳定遗传的notch3基因突变体。本发明利用CRISPR/Cas9技术，通过选择独特的一段打靶区，使得斑马鱼中的notch3基因被敲除，又不“误伤”其他基因，形成Notch3敲除的斑马鱼；另外，本发明还公开了notch3基因缺失斑马鱼突变体的表型，对于研究Notch信号通路意义重大。

公开(公告)号：CN104543670B

公开(公告)日：2017-09-19

申请号：CN201410841522.4

申请日：2014-12-25

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 柯异芸 ,  周洪鑫 ,  徐行

IPC: A23L29/30

Abstract: 本发明属于食品技术领域，特别涉及一种海藻珍珠粉圆的制备方法，其步骤包括：将质量浓度为0.6‑0.8％的海藻酸钠和海萝藻多糖混合液，搅拌、静置，形成胶体溶液；在65‑75℃条件下，将胶体溶液加入到木薯淀粉中，并不断搅拌、糊化，糊化时间为0.5‑1.5小时；糊化后的木薯面团进行滚圆处理，静置1.5‑2.5小时，用60‑80℃的温度煮10‑15分钟，捞出放入冷的蜂蜜水中3‑5min，冷却。所述海藻珍珠粉圆的重金属铬含量非常低，符合国家标准，而且口感Q糯、有弹性，表面形态光滑、色泽均匀，无淀粉溶出，并具有抗血栓、抗肿瘤、降血压功效。本发明海藻珍珠粉圆的制备方法简单、成本低，质量和工艺的可控性强。

公开(公告)号：CN108707628A

公开(公告)日：2018-10-26

申请号：CN201810526041.2

申请日：2018-05-28

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 张庆华 ,  岳倩文 ,  徐行 ,  季策 ,  李伟明

IPC: C12N15/90 ,  C12N9/22 ,  A01K67/027

CPC classification number: C12N15/902 ,  A01K67/0275 ,  A01K2217/075 ,  A01K2227/40 ,  A01K2267/0306 ,  C12N9/22

Abstract: 本发明公开了涉及一种斑马鱼notch2基因突变体的制备方法；包括如下步骤：确定notch2基因敲除的靶点位置；以pUC19‑gRNA scaffold质粒为模板，使用引物T7‑notch2‑sfd、tracr rev进行PCR扩增；对PCR产物纯化、体外转录获得gRNA；将gRNA与Cas9蛋白显微注射入斑马鱼胚胎一细胞期中，筛选获得稳定遗传的notch2基因突变体。本发明利用CRISPR/Cas9技术，通过选择独特的一段打靶区，使得斑马鱼中的notch2基因被敲除，又不“误伤”其他基因，形成Notch2敲除的斑马鱼，为后续基因功能的深入研究提供了实验材料，对于研究Notch信号通路意义重大。

公开(公告)号：CN108753833B

公开(公告)日：2021-12-03

申请号：CN201810525963.1

申请日：2018-05-28

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 张庆华 ,  岳倩文 ,  季策 ,  徐行 ,  张秋月 ,  李伟明

IPC: C12N15/90 ,  C12N15/113 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明公开了涉及一种斑马鱼notch3基因突变体的制备方法；包括如下步骤：确定notch3基因敲除的靶点位置；以pUC19‑gRNA scaffold质粒为模板，使用引物T7‑notch3‑sfd、tracr rev进行PCR扩增；对PCR产物纯化、体外转录获得gRNA；将gRNA与Cas9蛋白导入斑马鱼胚胎一细胞期中，培养获得稳定遗传的notch3基因突变体。本发明利用CRISPR/Cas9技术，通过选择独特的一段打靶区，使得斑马鱼中的notch3基因被敲除，又不“误伤”其他基因，形成Notch3敲除的斑马鱼；另外，本发明还公开了notch3基因缺失斑马鱼突变体的表型，对于研究Notch信号通路意义重大。

公开(公告)号：CN108707628B

公开(公告)日：2021-11-23

申请号：CN201810526041.2

申请日：2018-05-28

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 张庆华 ,  岳倩文 ,  徐行 ,  季策 ,  李伟明

IPC: C12N15/90 ,  C12N9/22 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明公开了涉及一种斑马鱼notch2基因突变体的制备方法；包括如下步骤：确定notch2基因敲除的靶点位置；以pUC19‑gRNA scaffold质粒为模板，使用引物T7‑notch2‑sfd、tracr rev进行PCR扩增；对PCR产物纯化、体外转录获得gRNA；将gRNA与Cas9蛋白显微注射入斑马鱼胚胎一细胞期中，筛选获得稳定遗传的notch2基因突变体。本发明利用CRISPR/Cas9技术，通过选择独特的一段打靶区，使得斑马鱼中的notch2基因被敲除，又不“误伤”其他基因，形成Notch2敲除的斑马鱼，为后续基因功能的深入研究提供了实验材料，对于研究Notch信号通路意义重大。

公开(公告)号：CN104543670A

公开(公告)日：2015-04-29

申请号：CN201410841522.4

申请日：2014-12-25

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 柯异芸 ,  周洪鑫 ,  徐行

IPC: A23L1/09

Abstract: 本发明属于食品技术领域，特别涉及一种海藻珍珠粉圆的制备方法，其步骤包括：将质量浓度为0.6-0.8％的海藻酸钠和海萝藻多糖混合液，搅拌、静置，形成胶体溶液；在65-75℃条件下，将胶体溶液加入到木薯淀粉中，并不断搅拌、糊化，糊化时间为0.5-1.5小时；糊化后的木薯面团进行滚圆处理，静置1.5-2.5小时，用60-80℃的温度煮10-15分钟，捞出放入冷的蜂蜜水中3-5min，冷却。所述海藻珍珠粉圆的重金属铬含量非常低，符合国家标准，而且口感Q糯、有弹性，表面形态光滑、色泽均匀，无淀粉溶出，并具有抗血栓、抗肿瘤、降血压功效。本发明海藻珍珠粉圆的制备方法简单、成本低，质量和工艺的可控性强。