斑马鱼notch2基因突变体的制备方法

    公开(公告)号:CN108707628A

    公开(公告)日:2018-10-26

    申请号:CN201810526041.2

    申请日:2018-05-28

    Abstract: 本发明公开了涉及一种斑马鱼notch2基因突变体的制备方法;包括如下步骤:确定notch2基因敲除的靶点位置;以pUC19‑gRNA scaffold质粒为模板,使用引物T7‑notch2‑sfd、tracr rev进行PCR扩增;对PCR产物纯化、体外转录获得gRNA;将gRNA与Cas9蛋白显微注射入斑马鱼胚胎一细胞期中,筛选获得稳定遗传的notch2基因突变体。本发明利用CRISPR/Cas9技术,通过选择独特的一段打靶区,使得斑马鱼中的notch2基因被敲除,又不“误伤”其他基因,形成Notch2敲除的斑马鱼,为后续基因功能的深入研究提供了实验材料,对于研究Notch信号通路意义重大。

    一种短小芽孢杆菌shou002及其应用

    公开(公告)号:CN103937701A

    公开(公告)日:2014-07-23

    申请号:CN201410084002.3

    申请日:2014-03-07

    Abstract: 本发明提供了一种短小芽孢杆菌shou002及其应用,其中,本发明的短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)shou002于2013年11月3日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M2013536,该短小芽孢杆菌shou002对水产病原菌具有良好的抑制作用,并且无致病性,安全可靠,能够有效的降解养殖水体中的有机物、氨氮和亚硝酸氮等污染物,优化养殖环境,促进水环境生态良性循环,可以用作饲料添加剂和水体生态环境改良剂应用到水产养殖中。

    一种枯草芽孢杆菌shou003、抗弧菌蛋白及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN103834596A

    公开(公告)日:2014-06-04

    申请号:CN201410084416.6

    申请日:2014-03-10

    Abstract: 本发明提供了一种枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)shou003、抗弧菌蛋白及其制备方法与应用,通过在健康大黄鱼的肠道中筛选出一株枯草芽孢杆菌shou003(于2013年11月13日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCCNO:M2013571),并在该枯草芽孢杆菌shou003发酵液中提取到一种抗弧菌蛋白,该抗弧菌蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO:1所示,其中,枯草芽孢杆菌shou003以及抗弧菌蛋白对水产病原菌,尤其是病原弧菌具有良好的抑制作用,并且枯草芽孢杆菌shou003对温度、NaCl、胃液、肠液以及胆盐具有良好耐受性,能广泛应用于水产养殖过程中的病菌防治;在此基础上,本发明提供上述枯草芽孢杆菌shou003最优的发酵培养方法以及抗弧菌蛋白的制备方法。

    CRISPR/Cas9构建notch1a突变体斑马鱼的方法

    公开(公告)号:CN108823249A

    公开(公告)日:2018-11-16

    申请号:CN201810527941.9

    申请日:2018-05-28

    Abstract: 本发明公开了涉及一种CRISPR/Cas9构建notch1a突变体斑马鱼的方法;包括如下步骤:确定notch1a基因敲除的靶点位置;以pUC19-gRNA scaffold质粒为模板,使用引物T7-notch1a-sfd、tracr rev进行PCR扩增;PCR产物纯化、体外转录获得gRNA;将gRNA与Cas9mRNA导入斑马鱼胚胎中,培养获得稳定遗传的notch1a突变体。本发明利用CRISPR/Cas9技术,通过选择一段独特的打靶区,使得斑马鱼中的notch1a被敲除,又不“误伤”其他基因,形成notch1a基因敲除的斑马鱼;另外,本发明还公开了notch1a基因缺失斑马鱼突变体的表型,对于研究Notch信号通路中Notch1a受体的作用意义重大。

    一种短小芽孢杆菌shou002及其应用

    公开(公告)号:CN103937701B

    公开(公告)日:2017-01-25

    申请号:CN201410084002.3

    申请日:2014-03-07

    Abstract: 本发明提供了一种短小芽孢杆菌shou002及其应用,其中,本发明的短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)shou002于2013年11月3日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M2013536,该短小芽孢杆菌shou002对水产病原菌具有良好的抑制作用,并且无致病性,安全可靠,能够有效的降解养殖水体中的有机物、氨氮和亚硝酸氮等污染物,优化养殖环境,促进水环境生态良性循环,可以用作饲料添加剂和水体生态环境改良剂应用到水产养殖中。

    斑马鱼notch3基因突变体的制备方法

    公开(公告)号:CN108753833B

    公开(公告)日:2021-12-03

    申请号:CN201810525963.1

    申请日:2018-05-28

    Abstract: 本发明公开了涉及一种斑马鱼notch3基因突变体的制备方法;包括如下步骤:确定notch3基因敲除的靶点位置;以pUC19‑gRNA scaffold质粒为模板,使用引物T7‑notch3‑sfd、tracr rev进行PCR扩增;对PCR产物纯化、体外转录获得gRNA;将gRNA与Cas9蛋白导入斑马鱼胚胎一细胞期中,培养获得稳定遗传的notch3基因突变体。本发明利用CRISPR/Cas9技术,通过选择独特的一段打靶区,使得斑马鱼中的notch3基因被敲除,又不“误伤”其他基因,形成Notch3敲除的斑马鱼;另外,本发明还公开了notch3基因缺失斑马鱼突变体的表型,对于研究Notch信号通路意义重大。

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