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公开(公告)号:CN119162010A
公开(公告)日:2024-12-20
申请号:CN202411381307.0
申请日:2024-11-08
Applicant: 上海交通大学内蒙古研究院
IPC: C12N1/19 , C12N15/81 , C12N15/54 , C12N15/62 , C12N9/26 , C12N9/34 , C12P19/12 , C12P19/14 , C12P19/18 , C07H1/06 , C07H3/04 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种合成海藻糖的重组解脂耶氏酵母菌及及其构建方法和应用。本发明以能合成赤藓糖醇的解脂耶氏酵母菌为合成底盘,将海藻糖合成酶基因与淀粉酶基因串联构成表面展示基因表达盒并转化解脂耶氏酵母,构成重组解脂耶氏酵母菌Yarrowia lipolytica CGMCC No.31034;然后以该重组酵母菌先发酵葡萄糖生成赤藓糖醇,分离酵母细胞用作全细胞催化剂一步转化淀粉生成海藻糖。转化结束后在转化液中加入氮源和无机盐,接种酿酒酵母分解转化液中的少量杂糖葡萄糖得到高纯度海藻糖。由于该方法采用酵母全细胞转化,相对于从大肠杆菌需要破细胞纯化酶等工艺,不但减少了步骤,而且无酶制备成本。
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公开(公告)号:CN105219661B
公开(公告)日:2019-01-11
申请号:CN201510600511.1
申请日:2015-09-18
Applicant: 上海交通大学 , 淄博珍瑭生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一株合成低聚半乳糖的专用菌株及用其合成低聚半乳糖的方法。该专用菌株为解脂亚罗威酵母(Yarrowia lipolytica)CGMCC NO.11369。对该菌株进行培养,培养结束后菌液分离得到解脂亚罗威酵母CGMCC NO.11369细胞,加入乳糖溶液进行转化合成低聚半乳糖;转化结束后进行纯化精制,得到低聚半乳糖。采用本发明的方法,由于该酵母能合成β‑半乳糖苷酶且能循环使用,因此不用购买β‑半乳糖苷酶,降低了生产成本;由于该酵母同时还能合成赤藓糖醇,可以利用合成赤藓糖醇后得到的酵母细胞转化半乳糖合成低聚半乳糖,节省了培养细胞的成本。
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公开(公告)号:CN105219660A
公开(公告)日:2016-01-06
申请号:CN201510599954.3
申请日:2015-09-18
Applicant: 上海交通大学 , 淄博珍瑭生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一株合成低聚果糖的专用菌株及其用于合成低聚果糖的方法。所述专用菌株为解脂亚罗威酵母(Yarrowia lipolytica)CGMCC NO.11368。将该菌株培养于含碳源、氮源、无机盐以及水的培养基中,进行培养,培养结束后菌液分离得到解脂亚罗酵母细胞,再加入蔗糖水溶液进行转化合成低聚果糖;转化结束后进行纯化精制,得到液体或粉状低聚果糖。本发明的有益效果为:第一,由于该酵母能合成果糖基转移酶且能循环使用,因此无需购买果糖基转移酶,降低了生产成本。第二,由于该酵母同时还能合成赤藓糖醇,因此可以利用合成赤藓糖醇后得到的废酵母细胞转化蔗糖合成低聚果糖,节省了培养细胞的成本。
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公开(公告)号:CN103373901B
公开(公告)日:2015-04-01
申请号:CN201310283189.5
申请日:2013-07-05
Applicant: 上海交通大学 , 山东三元生物科技股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种从赤藓糖醇母液中提取赤藓糖醇的方法及其专用酵母菌种。该方法为:在赤藓糖醇母液中加入酵母菌种,进行发酵净化;所述酵母菌种为能分解代谢所述赤藓糖醇母液中除赤藓糖醇外的多元醇以及糖类的酵母菌种。所述专用酵母菌种为假丝酵母(Candida sp.SJTU828)CGMCC NO.7323。本发明采用生物发酵净化的方法从赤藓糖醇母液中工业化提取赤藓糖醇,提取效率高,对环境友好,有效地利用了废弃的资源。
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公开(公告)号:CN101691597A
公开(公告)日:2010-04-07
申请号:CN200910307138.5
申请日:2009-09-17
Applicant: 上海交通大学 , 淄博科锐控制系统工程有限公司
Abstract: 本发明涉及生物技术领域的制备L-塔格糖的方法。制备L-塔格糖的方法,包括如下步骤:制备培养基;培养产酸细菌,得一级种子液;得二级种子液;将二级种子液接种到发酵培养基中,得到发酵液;得到酵母一级种子液和二级酵母种子液,离心,得酵母细胞;将酵母细胞培养,得澄清的发酵液;浓缩,脱色,过滤,得溶液;将溶液过离子交换树脂,结晶,洗涤,干燥,得L-塔格糖;利用静息细胞转化D-卫矛醇制备L-塔格糖的方法,包括如下步骤:制备培养基,培养细菌;悬浮菌体细胞,得溶液;接种假丝酵母(Candida ssp.)CGMCC NO:3268,得发酵液;将发酵液经过脱色和脱盐处理,得到水溶液,浓缩,结晶,洗涤,干燥,得L-塔格糖。本发明的方法可用来制备医药级L-塔格糖。
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公开(公告)号:CN101603064A
公开(公告)日:2009-12-16
申请号:CN200910052131.3
申请日:2009-05-27
Applicant: 上海交通大学 , 淄博科锐控制系统工程有限公司
Abstract: 一种生物技术领域的由卫矛醇制备D-塔格糖以及L-塔格糖的方法:制备培养基;将产酸细菌接种在培养基中,制备一级种子液和二级种子液;利用二级种子液培养得到含有D-塔格糖与L-塔格糖的水溶液;本发明还涉及一种采用静息细胞技术的制备方法:将产酸细菌接种于培养基中培养;培养结束后离心得到菌体细胞,用含有D-卫矛醇的水溶液悬浮菌体细胞,培养得到含有D-塔格糖与L-塔格糖的水溶液;本发明还涉及一种采用固定化细胞技术的制备方法:将产酸细菌接种于培养基中进行培养;培养结束后离心得到菌体细胞;采用固定化细胞技术制备得到含有D-塔格糖与L-塔格糖的水溶液。本发明的方法绿色安全、转化效率高,可制备医药级D-塔格糖与L-塔格糖。
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公开(公告)号:CN111500617A
公开(公告)日:2020-08-07
申请号:CN202010252783.8
申请日:2020-04-01
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种合成海藻糖的重组解脂耶氏酵母菌的构建方法。以能合成赤藓糖醇的解脂耶氏酵母菌为合成底盘,将海藻糖合成酶基因构成表面展示基因表达盒并转化能合成赤藓糖醇的解脂耶氏酵母,构成重组解脂耶氏酵母菌。然后以该重组酵母菌先发酵葡萄糖生成赤藓糖醇,分离酵母细胞用作全细胞催化剂一步转化麦芽糖生成海藻糖。转化结束后在转化液中加入氮源和无机盐,接种酿酒酵母分解转化液中的杂质得到高纯度海藻糖。由于该方法采用酵母全细胞转化,相对于破细胞纯化酶等工艺,不但减少了步骤,而且无酶制备成本。
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公开(公告)号:CN111363759A
公开(公告)日:2020-07-03
申请号:CN202010069250.6
申请日:2020-01-21
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种合成赤藓糖醇的重组解脂耶氏酵母菌的构建方法及其菌株。采用解脂耶氏酵母为合成底盘,通过代谢工程改良手段,对该酵母进行基因编辑,增强其合成赤藓糖醇的能力,阻断合成副产物的途径。所述酵母菌株为解脂耶氏酵母Yarrowia lipolytica ery949-4ΔCGMCC No.19351。以发酵初始浓度为50~350克/升的葡萄糖作为碳源,以发酵初始浓度为5~30克/升的氮源以及无机盐类为原料,高温灭菌,冷却后接入所述解脂耶氏酵母菌株,在有氧的条件下进行连续发酵或分批补料发酵;发酵结束后,从发酵液中提纯赤藓糖醇。该菌株能以葡萄糖等碳源为原料高效合成赤藓糖醇,不合成副产物(如甘露醇等),不消耗利用赤藓糖醇。
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公开(公告)号:CN109097294A
公开(公告)日:2018-12-28
申请号:CN201810932822.1
申请日:2018-08-14
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一株合成低聚异麦芽糖的解脂亚罗威酵母菌株及其合成方法;本发明利用食品安全微生物解脂亚罗威酵母Yarrowia lipolytica作为酶表达宿主,将食品级微生物的合成低聚异麦芽糖的不同基因进行优化改进,设计构成不同的基因表达盒,转化解脂亚罗威酵母Yarrowia lipolytica,获得能高效催化淀粉、糊精或者麦芽糖生产低聚异麦芽糖的工程菌株。培养该工程酵母菌株获得细胞,作为酶源,实现一步法由淀粉、糊精或者麦芽糖合成低聚异麦芽糖,最高转化率达到75%。本发明提供的食品级菌株及用其合成低聚异麦芽糖的方法简化了生产步骤、提高了生产效率,因而可以显著降低低聚异麦芽糖规模化生产的成本。
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公开(公告)号:CN105219663B
公开(公告)日:2018-10-23
申请号:CN201510599925.7
申请日:2015-09-18
Applicant: 上海交通大学 , 淄博珍瑭生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一株合成海藻糖的专用菌株及其用于合成海藻糖的方法。该菌株为解脂亚罗威酵母(Yarrowia lipolytica)CGMCC NO.11367。将菌株培养于含碳源、氮源、无机盐以及水的培养基中,进行发酵,结束后进行菌液分离,从发酵液中纯化海藻糖;分离得到的酵母细胞,还可加入到低聚麦芽糖或麦芽糖水溶液转化合成海藻糖。该方法的有益效果是:第一,该酵母能自我高效合成海藻糖所需要的酶,且能循环使用,降低了生产成本。第二,该酵母还能合成赤藓糖醇,可以利用合成赤藓糖醇后得到的废酵母细胞转化低聚麦芽糖合成海藻糖,节省了培养细胞的成本。第三,酵母细胞更容易高密度发酵与高浓度底物转化,合成更多的海藻糖。
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