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公开(公告)号：CN102154516A
公开(公告)日：2011-08-17
申请号：CN201110068834.2
申请日：2011-03-22
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种生物技术领域的猪传染性胃肠炎病毒S基因荧光定量PCR检测方法及其引物。PCR扩增目的片段，鉴定为阳性的PCR产物，克隆到pMD18-T载体并转化到DH5α感受态细胞，蓝白斑筛选挑取阳性克隆，并进行测序鉴定。提取阳性重组质粒，用紫外分光光度计定量，标准品系列以10倍梯度稀释为终浓度在1.0×103-1.0×1011拷贝/mL，以其作为模板进行荧光定量PCR反应，建立荧光定量PCR标准曲线。提取临床粪便样品的病毒RNA，进行荧光定量PCR，根据其结果和标准曲线计算样品中病毒的含量。所述的引物序列为序列1和序列2。本发明的优点无需另外设计荧光探针，降低成本，操作简便，检测只需在2小时内即可完成，并且适用任何一款荧光定量PCR仪，可应用于规模大、通量高的样本检测中。
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公开(公告)号：CN101705310A
公开(公告)日：2010-05-12
申请号：CN200910310225.6
申请日：2009-11-23
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种检验技术领域的猪星状病毒的荧光定量PCR检测方法，包括如下步骤：步骤一，以猪星状病毒基因的保守片段SEQ ID NO：1为靶目标，设计引物和探针，扩增基因片段；步骤二，利用步骤一所得基因片段构建重组质粒；步骤三，提取样品的RNA，逆转录得到cDNA；步骤四，按照常规荧光定量PCR检测方法检测样品中的猪星状病毒的含量。本发明的方法具有灵敏性高、稳定性高、可以定量，特异性好，假阳性低等特点。
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公开(公告)号：CN101701033A
公开(公告)日：2010-05-05
申请号：CN200910309580.1
申请日：2009-11-12
Applicant: 上海交通大学
IPC: C07K14/29 , C07K1/14 , C07K16/12 , G01N33/531
Abstract: 一种免疫技术领域的猪附红细胞体抗原、抗体、样品的制备方法，其中，抗原的制备方法，包括如下步骤：取感染附红细胞体的猪血，制备红细胞泥；PBS悬浮红细胞泥，水浴，离心，取上清；滤膜过滤上清，得滤液，之后超速离心得沉淀，PBS重悬，裂解，离心得上清，即猪附红细胞体抗原；抗体的制备方法，包括如下步骤：取猪附红细胞体抗原，制备血清；将血清与健康猪血红细胞泥混合，孵育，离心，取上清，纯化上清，得IgG抗体；样品的制备方法，包括如下步骤：取待检的猪血液，制备得红细胞泥；用预冷PBS洗涤红细胞泥，生理盐水悬浮，加Tris-Hcl裂解，超速离心，PBS悬浮沉淀，得样品。在本发明的基础上，可方便地应用双抗夹心ELISA法检测猪附红细胞体。
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公开(公告)号：CN101353699A
公开(公告)日：2009-01-28
申请号：CN200810042787.2
申请日：2008-09-11
Applicant: 上海交通大学
CPC classification number: Y02A50/451
Abstract: 本发明涉及一种空肠弯曲杆菌的聚合酶链反应检测方法，先对空肠弯曲杆进行微需氧分离培养，挑取可疑菌落溶于专用于溶解空肠弯曲杆菌的缓冲液中，煮沸离心后，取上清作为PCR的模板，然后根据空肠弯曲杆菌VS1基因序列中的保守片段设计一对特异性引物进行PCR反应，反应产物用琼脂糖凝胶电泳观察，出现516bp条带即为阳性结果。本发明方法直接从可疑菌落检测空肠弯曲杆菌，省去了增菌培养环节，设计的特异性引物也增加了PCR检测方法的灵敏度和特异性，解决了常规方法检测空肠弯曲杆菌时间长的难点，为畜、禽及其产品中空肠弯曲杆菌检测提供了可靠的快速检测方法。
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公开(公告)号：CN1302723C
公开(公告)日：2007-03-07
申请号：CN200510025242.7
申请日：2005-04-21
Applicant: 上海交通大学
IPC: A23K1/18 , A23K1/16 , A61K36/739
Abstract: 一种属于食品加工技术领域的富硒低胆固醇健康蛋的生产方法，本发明具体步骤如下：(1)选择并添加有机硒源-富硒干酵母；(2)选择并添加共轭亚油酸；(3)中草药制剂的配制和添加；(4)将富硒干酵母、共轭亚油酸和中草药制剂三种粉末进行配合，混合均匀，配制富硒低胆固醇蛋生产专用预混剂；(5)添加上述富硒低胆固醇蛋生产专用预混剂，饲喂产蛋禽后收集禽蛋。本发明以较低的生产成本生产出不仅富硒富CLA，而且胆固醇含量明显降低的禽蛋，同时添加的中草药制剂能够促进硒和CLA的吸收和沉积，更有利于蛋禽和人类的健康。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN1840206A
公开(公告)日：2006-10-04
申请号：CN200610023456.5
申请日：2006-01-19
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种微生物技术领域的人源菌群仔猪模型的构建及仔猪肠道中菌群分子检测方法。构建步骤：(1)制备健康人粪便菌悬液；(2)对怀孕待产母猪剖腹取胎产仔；(3)仔猪饲养于全天候高效过滤正压通风的隔离室中；(4)接种。检测步骤：(1)提取粪便微生物基因组DNA；(2)ERIC－PCR指纹图谱分析及群落DNA杂交分析；(3)HFA仔猪肠道菌群中双岐杆菌定植分析；(4)HFA仔猪肠道菌群中拟杆菌定植分析。本发明在仔猪模型胃肠道中成功定植了供体人的双岐杆菌和拟杆菌，指纹图谱的比较也显示仔猪模型肠道菌群的指纹图谱与供体人同源性高，可用于研究肠道菌群与其宿主生理及免疫特性的相互关系，也可用于评价功能性食品或药物对肠道菌群的调节和代谢作用。
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公开(公告)号：CN1800369A
公开(公告)日：2006-07-12
申请号：CN200510111519.8
申请日：2005-12-15
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N5/06
Abstract: 本发明涉及一种犬类精液稀释液，属于动物繁殖技术领域。由N－乙酰基－D－葡萄糖胺0.01～0.10克、果糖和/或葡萄糖0.55～3.85克、柠檬酸0.85～2.50克、三羟甲基胺基甲烷1.10～3.90克、乙二胺四乙酸0.05～1.00克、杀菌剂 1000 UI/毫升，加蒸馏水至100毫升配制而成，稀释液pH值为6.15～6.95，渗透压为310～350mOsmo/L。本发明的稀释液能够有效延长低温或常温条件下犬类精子的存活时间，有利于维持犬类精子的质膜完整性及顶体完整性，提高犬类人工授精的受孕率。
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公开(公告)号：CN103525948A
公开(公告)日：2014-01-22
申请号：CN201310465050.2
申请日：2013-10-08
Applicant: 上海交通大学
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/686 , C12Q2531/113 , C12Q2545/114 , C12Q2561/113
Abstract: 本发明公开了一种猪萨佩罗病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法。本发明的方法是：针对萨佩罗病毒的保守基因片段设计两条引物，准备RNA样品，设置反应条件，进行荧光定量RT-PCR。通过标准曲线的制作、特异性验证，结果显示该方法的最低检出限为10拷贝数的数量级；同时该方法具有高的特异性，可以与猪捷申病毒、猪肠道病毒9、猪口蹄疫病毒、脑心肌炎病毒、猪传染性肠胃炎、猪流行性腹泻和猪繁殖与呼吸道综合症病毒分离开来。对63份猪粪便样品进行检测，检测出7分样品，阳性率为11.11%。该方法具有简单、准确、高效、快速、无污染等特点，非常适合用于猪萨佩罗病毒的检测和定量。
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公开(公告)号：CN101899532B
公开(公告)日：2012-08-22
申请号：CN200910311681.2
申请日：2009-12-17
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种卫生检验技术领域的犬细小病毒的LAMP检测试剂盒及其检测方法；该试剂盒包含如下6条引物，所述引物的碱基序列分别如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3、SEQID NO：4、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6所示；利用所述试剂盒进行检测的方法包括如下步骤：步骤一，按照常规方法提取待测样品的核酸；步骤二，利用所述LAMP检测试剂盒检测样品核酸，判断样品中是否含有犬细小病毒。本发明的试剂盒使用简单，结果直观，特异性及敏感性高。
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公开(公告)号：CN101838626B
公开(公告)日：2012-05-16
申请号：CN201010169293.8
申请日：2010-05-12
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种生物学技术领域的巴尔通氏体固液双相斜面培养基及其制备和应用方法，包括：由牛肉浸出液、淀粉、氯化钠、琼脂、脱纤维绵羊血和蒸馏水组成的斜面固体培养基以及酪蛋白胰酶水解物、大豆木瓜蛋白酶水解物、葡萄糖、氯化钠、磷酸二钾和蒸馏水组成的液体培养基。本发明制备得到的巴尔通氏体固液双相斜面培养基中达到107CFU/ml约需48小时，其生长数度提高2.5倍，成本节约500倍(血平板培养约需5天，达到107CFU需100个平皿)，弥补了目前巴尔通氏体体外培养方法细菌生长缓慢、费时费力、成本高等缺陷。
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