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公开(公告)号:CN114773457B
公开(公告)日:2023-06-23
申请号:CN202210233469.4
申请日:2022-03-10
Applicant: 上海交通大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C12N15/861 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及表达猪源性抗猪流行性腹泻病毒N蛋白单链抗体的重组腺病毒及其构建和用途。本发明的重组腺病毒基因组中至少具有由如SEQ ID No.1所示氨基酸序列的猪抗体重链可变区VH和如SEQ ID No.2所示氨基酸序列的猪抗体轻链可变区VL以及由中间连接肽Linker构成的猪源单链抗体片段VH‑Linker‑VL。重组腺病毒表达的单链抗体ZW4‑36能够与猪流行性腹泻病毒N蛋白特异性结合,抑制猪流行性腹泻病毒对仔猪空肠组织的感染,显著降低仔猪粪便中的病毒粒子含量(P
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公开(公告)号:CN114773457A
公开(公告)日:2022-07-22
申请号:CN202210233469.4
申请日:2022-03-10
Applicant: 上海交通大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C12N15/861 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及表达猪源性抗猪流行性腹泻病毒N蛋白单链抗体的重组腺病毒及其构建和用途。本发明的重组腺病毒基因组中至少具有由如SEQ ID No.1所示氨基酸序列的猪抗体重链可变区VH和如SEQ ID No.2所示氨基酸序列的猪抗体轻链可变区VL以及由中间连接肽Linker构成的猪源单链抗体片段VH‑Linker‑VL。重组腺病毒表达的单链抗体ZW4‑36能够与猪流行性腹泻病毒N蛋白特异性结合,抑制猪流行性腹泻病毒对仔猪空肠组织的感染,显著降低仔猪粪便中的病毒粒子含量(P
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公开(公告)号:CN112080455B
公开(公告)日:2022-05-17
申请号:CN202010962886.3
申请日:2020-09-14
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种表达分泌抗猪传染性胃肠炎病毒单链抗体的重组乳酸乳球菌及其制备方法,该重组乳酸乳球菌,其蛋白序列中具有分泌表达抗猪传染性胃肠炎病毒单链抗体的融合序列,该融合序列具有SEQ ID No.4所示的氨基酸序列。重组乳酸乳球菌分泌的单链抗体能够与猪传染性胃肠炎病毒特异性结合,可用于阻断猪传染性胃肠炎病毒的感染,以及对仔猪感染病毒提供保护作用。
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公开(公告)号:CN114409778A
公开(公告)日:2022-04-29
申请号:CN202210094003.0
申请日:2022-01-26
Applicant: 上海交通大学
IPC: C07K16/12 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12N15/31 , C12Q1/6883 , C12N15/11 , G01N33/68 , A61K39/40 , A61P31/04 , A61P15/14 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种牛源抑制金黄色葡萄球菌溶血功能的单链抗体及其制备方法和用途,涉及基因工程领域,本发明采用RT‑PCR扩增牛源单链抗体编码基因的重链可变区VH基因和轻链可变区VL基因,利用SOE‑PCR法,将linker与VH基因和VL基因相连构建scFv基因,该scFv按照VL‑Linker‑VH的顺序进行连接,将其克隆到噬菌粒载体pCANTAB5E中构建单链抗体初级文库,辅助噬菌体M13KO7拯救初级文库,用原核表达的Hlb作为包被抗原,经过四轮的富集淘选后,采用phage ELISA方法筛选阳性克隆,获得的单链抗体能够特异性的结合金黄色葡萄球菌Hlb,表现出明显抑制金黄色葡萄球菌Hlb的溶血活性,从而减弱金黄色葡萄球菌对牛乳腺的致病性。
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公开(公告)号:CN114369159A
公开(公告)日:2022-04-19
申请号:CN202210094006.4
申请日:2022-01-26
Applicant: 上海交通大学
Inventor: 朱建国
Abstract: 本发明公开了一种牛源抗金黄色葡萄球菌的真核表达单链抗体、制备方法及其应用,真核表达单链抗体包括轻链可变区VL、重链可变区VH、连接肽Linker,并按照VL‑Linker‑VH的顺序连接构成牛源单链抗体片段VL‑Linker‑VH,所述轻链可变区VL氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,所述重链可变区VH氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明构建的单链抗体在体内持续时间长,能显著提高细胞因子IFN‑γ和IL‑4的含量,降低炎症因子TNF‑α的含量,维持乳腺结构的相对完整,减少炎性细胞的浸润,对小鼠提供一定的保护作用。
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公开(公告)号:CN112080455A
公开(公告)日:2020-12-15
申请号:CN202010962886.3
申请日:2020-09-14
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种表达分泌抗猪传染性胃肠炎病毒单链抗体的重组乳酸乳球菌及其制备方法,该重组乳酸乳球菌,其蛋白序列中具有分泌表达抗猪传染性胃肠炎病毒单链抗体的融合序列,该融合序列具有SEQ ID No.4所示的氨基酸序列。重组乳酸乳球菌分泌的单链抗体能够与猪传染性胃肠炎病毒特异性结合,可用于阻断猪传染性胃肠炎病毒的感染,以及对仔猪感染病毒提供保护作用。
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公开(公告)号:CN106243219B
公开(公告)日:2019-12-03
申请号:CN201610631245.3
申请日:2016-08-04
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种猪源性抗猪流行性腹泻病毒的单链抗体及其制备方法。本发明的猪源性抗猪流行性腹泻病毒的单链抗体由抗体的重链可变区VH和轻链可变区VL通过短的连接肽Linker连接而成。轻链可变区VL的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,重链可变区VH的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明获得的抗猪流行性腹泻病毒的单链抗体分子量约为28kDa,能够特异性的识别猪流行性腹泻病毒,可进一步用于阻断猪流行性腹泻病毒感染和入侵。
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公开(公告)号:CN104610449B
公开(公告)日:2017-12-15
申请号:CN201510020551.9
申请日:2015-01-15
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种鸡源性抗鸡新城疫病毒P蛋白的跨膜型胞内抗体、制备方法及其应用。本发明通过将扩增的鸡源抗NDV的P蛋白单链抗体scFv ZL1编码基因与跨膜肽CTP基因融合,得到scFvZL1‑CTP编码基因,将其克隆到原核表达载体pET28a(+)中,构建鸡源性抗NDV的P蛋白的跨模型细胞内抗体表达质粒(pET28a‑scFvZL1‑CTP);其原核表达产物就是跨模型胞内抗体(Trans‑ZL1‑CTP)。将跨模型胞内抗体转染BHK21细胞,其能够在宿主细胞内胞浆内均匀分布,对细胞没有毒性作用;TCID50法检测证明,跨模型胞内抗体对细胞有一定的保护效果,可以用于鸡新城疫的治疗。
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公开(公告)号:CN104610449A
公开(公告)日:2015-05-13
申请号:CN201510020551.9
申请日:2015-01-15
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种鸡源性抗鸡新城疫病毒P蛋白的跨膜型胞内抗体、制备方法及其应用。本发明通过将扩增的鸡源抗NDV的P蛋白单链抗体scFv ZL1编码基因与跨膜肽CTP基因融合,得到scFvZL1-CTP编码基因,将其克隆到原核表达载体pET28a(+)中,构建鸡源性抗NDV的P蛋白的跨模型细胞内抗体表达质粒(pET28a-scFvZL1-CTP);其原核表达产物就是跨模型胞内抗体(Trans-ZL1-CTP)。将跨模型胞内抗体转染BHK21细胞,其能够在宿主细胞内胞浆内均匀分布,对细胞没有毒性作用;TCID50法检测证明,跨模型胞内抗体对细胞有一定的保护效果,可以用于鸡新城疫的治疗。
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公开(公告)号:CN104263845A
公开(公告)日:2015-01-07
申请号:CN201410576967.4
申请日:2014-10-24
Applicant: 上海交通大学
CPC classification number: C12Q1/686 , C12Q2537/143
Abstract: 本发明公开了一种同时检测猪肺炎支原体、猪多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌的三重PCR方法。本发明首先筛选出具有该病原体基因型特点的保守性基因片段,作为PCR检测的三个基因靶点,分别合成扩增这些靶点基因的引物;然后将3个基因片段的3对引物放在一个PCR反应体系,建立直接从样品中一次检测三种病原体的三重PCR检测方法。本发明一方面既可以准确检测病原体,还可以对混合感染状况进行分析,从而掌握其疫情流行发展趋势,起到一箭双雕的效果。另一方面其较常规PCR方法缩短了24小时的检测时间,达到了快速检测实际样品的目的,并降低了成本。
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