公开(公告)号：CN101701033A

公开(公告)日：2010-05-05

申请号：CN200910309580.1

申请日：2009-11-12

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 华修国 ,  袁聪俐 ,  朱凝瑜 ,  杨筱薇 ,  杨志彪 ,  崔立

IPC: C07K14/29 ,  C07K1/14 ,  C07K16/12 ,  G01N33/531

Abstract: 一种免疫技术领域的猪附红细胞体抗原、抗体、样品的制备方法，其中，抗原的制备方法，包括如下步骤：取感染附红细胞体的猪血，制备红细胞泥；PBS悬浮红细胞泥，水浴，离心，取上清；滤膜过滤上清，得滤液，之后超速离心得沉淀，PBS重悬，裂解，离心得上清，即猪附红细胞体抗原；抗体的制备方法，包括如下步骤：取猪附红细胞体抗原，制备血清；将血清与健康猪血红细胞泥混合，孵育，离心，取上清，纯化上清，得IgG抗体；样品的制备方法，包括如下步骤：取待检的猪血液，制备得红细胞泥；用预冷PBS洗涤红细胞泥，生理盐水悬浮，加Tris-Hcl裂解，超速离心，PBS悬浮沉淀，得样品。在本发明的基础上，可方便地应用双抗夹心ELISA法检测猪附红细胞体。

公开(公告)号：CN101838626B

公开(公告)日：2012-05-16

申请号：CN201010169293.8

申请日：2010-05-12

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 袁聪俐 ,  华修国 ,  杨志彪 ,  崔立 ,  朱建国 ,  杨筱薇

IPC: C12N1/20 ,  C12R1/01

Abstract: 一种生物学技术领域的巴尔通氏体固液双相斜面培养基及其制备和应用方法，包括：由牛肉浸出液、淀粉、氯化钠、琼脂、脱纤维绵羊血和蒸馏水组成的斜面固体培养基以及酪蛋白胰酶水解物、大豆木瓜蛋白酶水解物、葡萄糖、氯化钠、磷酸二钾和蒸馏水组成的液体培养基。本发明制备得到的巴尔通氏体固液双相斜面培养基中达到107CFU/ml约需48小时，其生长数度提高2.5倍，成本节约500倍(血平板培养约需5天，达到107CFU需100个平皿)，弥补了目前巴尔通氏体体外培养方法细菌生长缓慢、费时费力、成本高等缺陷。

公开(公告)号：CN101701033B

公开(公告)日：2012-08-29

申请号：CN200910309580.1

申请日：2009-11-12

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 华修国 ,  袁聪俐 ,  朱凝瑜 ,  杨筱薇 ,  杨志彪 ,  崔立

IPC: C07K14/29 ,  C07K1/14 ,  C07K16/12 ,  G01N33/531

Abstract: 一种免疫技术领域的猪附红细胞体抗原、抗体、样品的制备方法，其中，抗原的制备方法，包括如下步骤：取感染附红细胞体的猪血，制备红细胞泥；PBS悬浮红细胞泥，水浴，离心，取上清；滤膜过滤上清，得滤液，之后超速离心得沉淀，PBS重悬，裂解，离心得上清，即猪附红细胞体抗原；抗体的制备方法，包括如下步骤：取猪附红细胞体抗原，制备血清；将血清与健康猪血红细胞泥混合，孵育，离心，取上清，纯化上清，得IgG抗体；样品的制备方法，包括如下步骤：取待检的猪血液，制备得红细胞泥；用预冷PBS洗涤红细胞泥，生理盐水悬浮，加Tris-Hcl裂解，超速离心，PBS悬浮沉淀，得样品。在本发明的基础上，可方便地应用双抗夹心ELISA法检测猪附红细胞体。

公开(公告)号：CN101838626A

公开(公告)日：2010-09-22

申请号：CN201010169293.8

申请日：2010-05-12

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 袁聪俐 ,  华修国 ,  杨志彪 ,  崔立 ,  朱建国 ,  杨筱薇

IPC: C12N1/20 ,  C12R1/01

Abstract: 一种生物学技术领域的巴尔通氏体固液双相斜面培养基及其制备和应用方法，包括：由牛肉浸出液、淀粉、氯化钠、琼脂、脱纤维绵羊血和蒸馏水组成的斜面固体培养基以及酪蛋白胰酶水解物、大豆木瓜蛋白酶水解物、葡萄糖、氯化钠、磷酸二钾和蒸馏水组成的液体培养基。本发明制备得到的巴尔通氏体固液双相斜面培养基中达到107CFU/ml约需48小时，其生长数度提高2.5倍，成本节约500倍(血平板培养约需5天，达到107CFU需100个平皿)，弥补了目前巴尔通氏体体外培养方法细菌生长缓慢、费时费力、成本高等缺陷。