公开(公告)号：CN114805500A

公开(公告)日：2022-07-29

申请号：CN202210240936.6

申请日：2022-03-10

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 郑海学 ,  王悦 ,  杨文萍 ,  王延轶 ,  冉勇 ,  冯涛 ,  李丹 ,  张敬 ,  茹毅 ,  田宏 ,  郝荣增 ,  杨洋 ,  秦晓东 ,  刘湘涛

IPC: C07K14/01 ,  C12N7/01 ,  C12N15/85 ,  C12N15/34 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及非洲猪瘟病毒I73R蛋白作为免疫抑制剂的应用及免疫抑制位点突变毒株的构建。本发明首先发现了非洲猪瘟病毒I73R蛋白能够抑制SeV诱导的IFN‑β的表达，具有较强的免疫抑制作用，可用于制备免疫抑制剂；其次，本发明发现非洲猪瘟病毒I73R蛋白的免疫抑制位点，并构建了I73R蛋白的免疫抑制位点突变的非洲猪瘟重组病毒，所述非洲猪瘟重组病毒的天然免疫的能力显著增强，毒力明显减弱，感染重组毒实验动物存活率较感染野毒实验动物明显升高，提高了生物安全性，及免疫保护效力，可作为重组疫苗株，具备良好的应用前景。

公开(公告)号：CN114773438A

公开(公告)日：2022-07-22

申请号：CN202210571389.X

申请日：2022-05-24

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 郑海学 ,  茹毅 ,  李亚军 ,  郝荣增 ,  杨洋 ,  卢炳州 ,  秦晓东 ,  刘华南 ,  张贵财 ,  李丹 ,  张越 ,  陈娇 ,  吴秀萍 ,  赵东梅 ,  任蕊芳

IPC: C07K14/18 ,  C12N15/40 ,  C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  A61K39/12 ,  A61P31/14 ,  G01N33/68 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白、制备方法及应用。本发明首先提供了一种牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白，显著促进了E0蛋白的表达，产量可达0.35mg/ml，而且不影响E0蛋白的免疫原性，可用于牛病毒性腹泻亚单位疫苗的制备；在上述牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白的基础上，本发明发现，将E0截短蛋白的160‑162位氨基酸由IAA突变为GGG，能够使E0截短蛋白的表达量进一步提升30％以上，且不影响其免疫原性。

公开(公告)号：CN112342243A

公开(公告)日：2021-02-09

申请号：CN201910720664.8

申请日：2019-08-06

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 秦晓东 ,  赵帅阳 ,  杨洋 ,  王光祥 ,  张志东

IPC: C12N15/867 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明涉及表达人源sting蛋白的猪源细胞的构建方法和应用，属于细胞构建技术领域。本发明利用CRISPR‑Cas9载体构建猪源细胞Sting敲除细胞株，在此基础上利用慢病毒表达载体表达人源sting蛋白。本发明所述构建方法使用人源化Sting蛋白替换猪源细胞内源性sting蛋白，替换后所有针对人源sting蛋白的抗体和抑制剂、激活剂都可以猪源细胞中使用，对于研究Sting蛋白在猪源病毒感染过程中的作用具有广泛的应用。

公开(公告)号：CN112342242A

公开(公告)日：2021-02-09

申请号：CN201910720572.X

申请日：2019-08-06

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 秦晓东 ,  杨洋 ,  赵帅阳 ,  张瑞 ,  张志东

IPC: C12N15/867 ,  C12N15/90 ,  C12N9/22 ,  C12N15/66 ,  C12N5/10 ,  C12Q1/02

Abstract: 本发明涉及sting敲除猪源细胞的构建方法及应用，属于细胞构建技术领域。本发明利用CRISPR‑Cas9载体及慢病毒包装技术构建猪源细胞Sting敲除细胞株。本发明所述构建方法能够成功构建猪源Sting蛋白缺失的稳定细胞株，该细胞株可作为工具细胞，用于研究Sting蛋白在细胞抗病毒感染过程中的作用抑制；探索其作为疫苗生产细胞株，保护易感动物免受口蹄疫病毒感染的可能性。

公开(公告)号：CN107034309A

公开(公告)日：2017-08-11

申请号：CN201610076566.1

申请日：2016-02-03

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 张志东 ,  杨洋 ,  秦晓东 ,  张伟 ,  李志勇

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12R1/93

CPC classification number: C12Q1/705 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q2521/507 ,  C12Q2561/113 ,  C12Q2563/107 ,  C12Q2565/625

Abstract: 本发明公开了一种快速检测猪伪狂犬病毒的实时荧光RPA试剂盒及其用途，还公开了一种快速检测猪伪狂犬病毒的试纸条RPA试剂盒及其用途。该两种试剂盒分别包括SEQ ID NO.1及SEQ ID NO.2所示的引物及各自的探针，虽然针对同一靶标序列，但引物和探针的修饰碱基和检测平台不同。实验证明本发明的两个试剂盒的敏感性均为102拷贝/反应，并均只能特异性检测猪伪狂犬病毒。分别用本发明的两个试剂盒检测猪伪狂犬病毒疑似样品，结果表明这两个试剂盒的检测结果与qPCR的符合度均为100％。因此，本发明的两个试剂盒均能快捷、高效、灵敏的检测猪伪狂犬病毒，为猪伪狂犬病毒的鉴别诊断提供了有效技术手段。