公开(公告)号：CN111100817B

公开(公告)日：2021-07-16

申请号：CN202010037145.4

申请日：2020-01-14

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

Inventor： 王晓钧 ,  胡哲 ,  郭巍 ,  刘荻萩

IPC: C12N1/20 ,  A61K39/112 ,  A61P31/04 ,  A61P15/06 ,  C12R1/42

Abstract: 本发明公开了马流产沙门氏菌马源株及其在制备马流产沙门氏菌灭活疫苗中的应用，属于生物疫苗技术领域。本发明所述的马流产沙门氏菌马源株，命名为20180316.H.AES.G，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其菌种保藏编号为：CGMCC No.18341。本发明的马流产沙门氏菌马源株20180316.H.AES.G具有免疫原性好、培养特性好等优点，将本发明的马流产沙门氏菌马源株接种于沙门氏菌增菌液，培养后，用0.2％v/v甲醛灭活，制成灭活疫苗。实验证明，使用本发明制备得到的马流产沙门氏菌灭活疫苗免疫小鼠，攻毒后，能使小鼠免于死亡，免疫马体后，安全性良好。因此该疫苗具有安全、低剂量免疫等优点。本发明首次提出了一种马流产沙门氏菌灭活疫苗，可以用于预防由马流产沙门氏菌引起的流产。

公开(公告)号：CN109293748B

公开(公告)日：2021-04-23

申请号：CN201811126944.8

申请日：2018-09-26

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

Inventor： 周国辉 ,  于力 ,  杨德成 ,  王海伟 ,  孙超

IPC: C07K14/09 ,  C12N15/42 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒非结构蛋白3A抗原表位肽及其应用。本发明通过细胞融合技术筛选获得一株杂交瘤细胞系3A10，其分泌的单抗具有广谱性及高亲和力，并且与血清竞争性强。本发明进一步对单抗3A10所识别的抗原表位进行了精确鉴定，其氨基酸序列为SEQ ID No.2所示，位于口蹄疫病毒非结构蛋白3A蛋白。本发明进一步对该抗原表位肽进行突变得到一系列突变体。本发明提供的抗原表位肽及其突变体作为包被抗原建立的口蹄疫抗体ELISA检测试剂盒能够特异性区分FMDV感染血清与抗原免疫血清，采用一种该检测试剂盒即能准确检测任何动物种属的血清，跨越了种间屏障，具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、检测快捷方便等优点。

公开(公告)号：CN107099496B

公开(公告)日：2021-04-13

申请号：CN201710278425.2

申请日：2017-04-25

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

Inventor： 崔红玉 ,  王笑梅

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/74 ,  C12N15/62 ,  C07K19/00 ,  A61K39/295 ,  A61K39/112 ,  A61K39/12 ,  A61P31/04 ,  A61P31/14 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种融合表达鸡传染性法氏囊病毒VP2蛋白和沙门菌属外膜蛋白的重组乳酸菌菌株及其用途。本发明所述的重组乳酸菌菌株，含有经优化后的编码鸡传染性法氏囊病毒VP2蛋白的基因序列以及编码沙门菌属外膜蛋白OMP的基因序列。实验证明该重组乳酸菌菌株其能够高效融合表达VP2蛋白和外膜蛋白OMP，且以可溶性形式存在于细胞质中。将本发明的重组乳酸菌菌株直接作为疫苗免疫鸡，实验结果表明：该重组乳酸菌菌株能有效诱导机体产生特异性的免疫应答，主要产生特异性中和抗体，使免疫鸡获得100％的抵抗高致病力vvIBDV致死性攻击的保护，并可清除体内残留的病毒，达到清除性免疫的目的。因此，本发明的提出为鸡传染性法氏囊病的防治提供了一种新的技术手段。

公开(公告)号：CN112538464A

公开(公告)日：2021-03-23

申请号：CN202011419903.5

申请日：2020-12-07

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

Inventor： 王笑梅 ,  潘青 ,  高玉龙 ,  崔红玉 ,  祁小乐 ,  刘长军 ,  李凯 ,  高宏雷 ,  张艳萍 ,  高立 ,  刘爱晶

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  C12N15/64 ,  C12N15/34 ,  A61K39/235 ,  A61P31/20 ,  A61P1/16 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种血清4型禽腺病毒反向遗传疫苗株rHN20及其构建方法和应用。本发明构建了我国FAdV‑4新近分离株HLJFAd15基因组全长的感染性克隆粘粒Fos‑rFAdV4，在此基础上将Hexon基因替换为国外弱毒株ON1的Hexon基因获得感染性克隆粘粒Fos‑rHN20。利用Fos‑rHN20成功拯救出疫苗株rHN20。致病性实验显示rHN20对SPF鸡不再有致病性(突变之前具有100％的死亡率)。免疫保护实验证明，接种rHN20的SPF鸡可以完全抵抗FAdV‑4强毒株的攻毒感染，证明rHN20具有非常好的免疫原性，可以作为疫苗候选毒株，同时致弱毒株大大降低了强毒株生物安全的隐患。

公开(公告)号：CN112500458A

公开(公告)日：2021-03-16

申请号：CN202011473614.3

申请日：2020-12-15

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

Inventor： 祁小乐 ,  王笑梅 ,  高玉龙 ,  高立 ,  李凯 ,  崔红玉 ,  刘长军 ,  潘青 ,  张艳萍 ,  刘爱晶

IPC: C07K14/08 ,  A61K39/12 ,  A61P31/14 ,  C12N15/70 ,  C12N15/40

Abstract: 本发明公开了一种鸡传染性法氏囊病病毒新型变异株亚单位疫苗、其制备方法及应用。针对IBDV新型变异株的流行，本发明对IBDV新型变异株代表毒株SHG19主要保护性蛋白VP2的基因表达盒进行了设计，引入了利于其正确构象形成的元件，构建了重组原核表达质粒，制备了重组大肠杆菌基因工程菌，经过表达条件和纯化条件的摸索，高效制备了IBDV新型变异株病毒样颗粒，将该病毒样颗粒与佐剂乳化制备成疫苗，试验结果显示，该疫苗不仅对同源的新型变异株产生了100％的免疫保护，而且对异源的vvIBDV的致死性攻击也产生了良好的免疫保护。本发明的提出为IBDV新型变异株以及超强毒株的防治提供了有效的技术手段。

公开(公告)号：CN106754982B

公开(公告)日：2021-03-09

申请号：CN201611154016.3

申请日：2016-12-14

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

Inventor： 华荣虹 ,  步志高

IPC: C12N15/40 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12N7/01 ,  C07K14/435 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明公开了一种表达绿色荧光蛋白的限制性复制西尼罗病毒系统及其应用。本发明所述的表达绿色荧光蛋白的限制性复制西尼罗病毒系统包括西尼罗病毒限制性复制子质粒以及稳定表达西尼罗病毒C‑prM‑E蛋白的重组细胞系。使用本发明的系统获得的限制性复制西尼罗病毒(△WNV)，该病毒在BWNV‑CME细胞系中具有与WNV全病毒相似的特性，且可以表达GFP，具有可视化效果，更重要的是，该病毒只能在本系统内进行复制，感染其他细胞时则不能产生仔代病毒，因此具有极高的安全性，可用于WNV中和抗体检测以及抗病毒药物筛选。本发明的提出提高了WNV相关操作的安全性与简便性，不依赖于BSL‑3高等级生物安全条件，为WNV疫苗评价、抗病毒药物筛选及病毒致病机制研究提供了良好的技术手段。

公开(公告)号：CN107513563B

公开(公告)日：2021-02-12

申请号：CN201710756858.4

申请日：2017-08-29

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

Inventor： 于申业 ,  刘思国 ,  曹俊

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/42

Abstract: 本发明公开了一种用于检测鸡白痢沙门氏菌的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR试剂盒及其应用。本发明针对鸡白痢沙门氏菌的特异性片段，设计了一种用于特异性扩增鸡白痢沙门氏菌的引物，并建立了一种能够直接从粪便和鸡肉样品中检测鸡白痢沙门氏菌的荧光定量PCR检测方法，该方法特异性好、灵敏度高、检测时间短，可以快速准确的检测出鸡白痢沙门氏菌，与22种其他常见致病性沙门氏菌血清型和8种常见非沙门氏菌致病菌的扩增结果均为阴性，并且可以很好的区分大肠埃希氏菌。本发明的提出为鸡白痢沙门氏菌的检测提供了一种快速、有效的技术手段，且该方法操作简单、对设备的要求低，检测时间短，能够满足大部分家禽养殖厂对鸡白痢沙门氏菌快速检测的需求。

公开(公告)号：CN112194722A

公开(公告)日：2021-01-08

申请号：CN202010944775.X

申请日：2020-09-10

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

Inventor： 王秀荣 ,  陈化兰 ,  曾显营 ,  田国彬 ,  邓国华

IPC: C07K16/10 ,  C12N5/20 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明涉及一种重组单克隆抗体，该重组单克隆单抗可以用于H5亚型禽流感病毒的诊断，应用于竞争ELISA等方法对抗体水平的检测，以及对特异性抗体标定抗原或者竞争与抗原反应的抗体的检测。所述重组单克隆抗体包含重链可变区和轻链可变区，重链可变区的氨基酸序列为SEQ IDNO：1所示，轻链可变区的氨基酸序列为SEQ IDNO:2所示。

公开(公告)号：CN107090438B

公开(公告)日：2021-01-01

申请号：CN201710343627.0

申请日：2017-05-16

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

Inventor： 崔红玉 ,  刘长军 ,  张艳萍 ,  王云峰 ,  王笑梅

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/08 ,  G01N33/569 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了一种抗血清I型MDV gI蛋白的单克隆抗体、分泌该抗体的杂交瘤细胞株及其应用。本发明对分泌抗血清I型MDV gI蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株进行3轮亚克隆筛选，获得了一株命名为A2E10B8的杂交瘤细胞株，该细胞产生的单克隆抗体仅能与血清I型MDV gI蛋白发生特异性结合反应，而与其它MDV血清型(血清2型、3型)不发生反应。继而经体外间接免疫荧光试验表明，A2E10B8单克隆抗体仅能与血清I型MDV病毒蚀斑结合，产生特异性绿色荧光，而与其它血清型MDV病毒蚀斑不能结合，不产生绿色荧光，证明该A2E10B8单克隆抗体是MDV血清I型特异性单克隆抗体。本发明的提出为血清I型MDV的基因工程诊断试剂的研制和MDV二价或多价疫苗检验提供了有力工具。

公开(公告)号：CN112125960A

公开(公告)日：2020-12-25

申请号：CN202010878710.X

申请日：2020-08-27

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

Inventor： 涂亚斌 ,  蔡雪辉

IPC: C07K14/01 ,  C07K1/36 ,  C07K1/34 ,  C07K1/20 ,  C07K1/14 ,  C07K1/30 ,  C07K1/18 ,  C12N15/70 ,  C12N15/34 ,  C12P21/02 ,  A61K39/295 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明公开了一种适用于大规模工厂化生产操作的去除内毒素的通用方法。本发明将液相分离去除内毒素法和疏水层析去除内毒素法进行了结合和改进，保留了液相分离法高效去除内毒素的优点和疏水层析法适合大规模工厂化操作的优点，去掉了液相分离法中繁琐的离心和萃取以及疏水层析法中的高盐步骤。本发明可用于重组蛋白中内毒素的去除，也可用于制药业的药液中内毒素的去除，经过本发明的方法处理后，最终蛋白溶液中内毒素的含量为不超过10EU/mL或10EU/mg(目的蛋白)，通过本方法，能够以较低的成本将兽用疫苗中内毒素的含量控制到和人用疫苗相近的标准。本发明的一种去除内毒素的方法，具有高效、高回收率、低成本、易于大规模工厂化生产操作的特点。