公开(公告)号：CN113817765B

公开(公告)日：2024-01-16

申请号：CN202111088227.2

申请日：2021-09-16

Applicant: 山东大学

Inventor： 符军 ,  李瑞娟 ,  边志龙 ,  李珊珊 ,  杨润雨 ,  涂强 ,  张友明

IPC: C12N15/74 ,  C12N15/65 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明公开了农杆菌同源重组系统，该重组系统由一系列农杆菌同源重组系统表达质粒构成，分别命名为pBBR1‑kan‑Ptet‑ETh1h2h3h4_agroB6、其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；pBBR1‑kan‑Ptet‑ETh1h2h3P3_rhi597、其核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；pBBR1‑kan‑Ptet‑ET_rhi145、其核苷酸序列如SEQ ID No.3所示；pBBR1‑kan‑Ptet‑ETh_rhi483、其核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。本发明还公开了所述重组系统在农杆菌中介导短同源臂的同源重组进行基因组DNA遗传修饰中的应用和在农杆菌中进行基因敲除的应用。本发明所述的农杆菌同源重组系统能够极大地促进农杆菌的基因组修饰，使得农杆菌的遗传修饰变得简单快捷，在构建具有高转化效率和宿主范围的农杆菌菌株方面和植物基因工程领域具有巨大的应用前景。

公开(公告)号：CN111286481B

公开(公告)日：2022-10-28

申请号：CN202010068324.4

申请日：2020-01-21

Applicant: 山东大学 ,  青岛德馨生物科技有限公司

Inventor： 于广乐 ,  王海龙 ,  涂强 ,  张友明

IPC: C12N1/21 ,  C12Q1/66 ,  C12Q1/04 ,  C05F11/08 ,  C12R1/38

Abstract: 本发明属于微生物技术领域，涉及一种突变菌株及其构建方法和应用。一种施氏假单胞菌突变菌株，该菌株是施氏假单胞菌DSM4166‑TP(nifR)，于2019年12月20日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.19081。本发明的有益效果是：本发明构建了一株施氏假单胞菌突变菌株，该菌株与现有的野生型DSM4166菌株相比，固氮酶合成基因表达水平具有较大幅度提高，产生的固氮酶活性也大大高于野生型DSM4166菌株。本发明的施氏假单胞菌突变菌株可在工业上大规模生产，具有广阔的商业价值。

公开(公告)号：CN112716989B

公开(公告)日：2022-06-28

申请号：CN202011154841.X

申请日：2020-10-26

Applicant: 山东大学 ,  济南成城生物技术有限公司

Inventor： 宋淳 ,  张友明 ,  江蓓 ,  胡昭 ,  张超

IPC: A61K36/23 ,  A61P19/06 ,  A23L33/105

Abstract: 本发明涉及天然药物化学及食品医药技术领域，具体涉及一种芹菜籽提取物及其制备方法与应用，所述芹菜籽提取物的组成为芹菜苷和芹菜素，所述制备方法包括将芹菜籽粉碎成芹菜籽粉末，用有机溶剂提取并除去其中的挥发油类化合物，然后将芹菜籽使用乙醇–水溶液进行提取、浓缩，柱层析得到芹菜籽提取物。得到芹菜籽中的降血尿酸的精确的有效成分，操作简单，提取物作用明确，制备工艺简单，得到的芹菜籽提取物成分清晰，能够用于保健食品或预防药物或营养品，预防和治疗人体多种疾病，如降低血尿酸，缓解和治疗通风，预防痛风等。

公开(公告)号：CN114410560A

公开(公告)日：2022-04-29

申请号：CN202210109315.4

申请日：2022-01-28

Applicant: 山东大学

Inventor： 李瑞娟 ,  宫恺 ,  王茂芹 ,  宋超逸 ,  张友明 ,  符军 ,  李爱英

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/52 ,  C12N15/74 ,  C12P17/18 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一株高产FK228的工程菌株E264Δtdp::R‑tdp‑dep，其是利用Burkholderia thailandensis E264Δtdp为出发菌株，通过位点特异性重组的方法在其基因组上整合了组合生物合成基因簇R‑tdp‑dep获得。本发明还公开了所述工程菌株在发酵制备FK228中的应用。实验证实：本发明的工程菌株E264Δtdp::R‑tdp‑dep产FK228的量达到了350mg/L，是目前FK228生产菌株产量的近18倍。本发明的技术方案极大地提升了FK228的产量且降低了发酵成本，缩短了发酵生产周期，为FK228的规模化制备和开发组蛋白去乙酰化酶抑制剂类药物奠定了基础，具有显著的经济价值和社会效益。

公开(公告)号：CN113699089A

公开(公告)日：2021-11-26

申请号：CN202111038045.4

申请日：2021-09-06

Applicant: 山东大学

Inventor： 李瑞娟 ,  宋超逸 ,  张友明 ,  李爱英 ,  王茂芹 ,  王宗杰 ,  宫恺

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/52 ,  C12N15/74 ,  C12P17/18 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一株异源表达组蛋白去乙酰化酶抑制剂FK228的工程菌株，命名为工程菌株E264::R‑tdp‑dep，其是利用Burkholderia thailandensis E264ΔoprABCΔtdpDE5kb为出发菌株，通过转座的方法在其基因组上整合了组合生物合成基因簇R‑tdp‑dep获得。本发明还公开了所述工程菌株在制备组蛋白去乙酰化酶抑制剂FK228中的应用。实验证实：本发明的工程菌株E264::R‑tdp‑dep产FK228的量达到了94mg/L，是目前FK228工业生产菌株的近5倍，极大地提升了FK228的产量且降低了发酵成本，缩短了发酵生产周期，为规模化制备和开发组蛋白去乙酰化酶抑制剂类药物奠定了基础，具有显著的经济价值和社会效益。

公开(公告)号：CN113583900A

公开(公告)日：2021-11-02

申请号：CN202110820845.5

申请日：2021-07-20

Applicant: 山东大学

Inventor： 卞小莹 ,  刘嘉琪 ,  张友明

IPC: C12N1/20 ,  C12N15/74 ,  C12N15/31 ,  C07K14/195 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一组伯克氏菌基因组合理简约化突变株与一组基因组合理简约化伯克氏菌底盘菌株及其构建方法和其在β‑变形菌纲来源的天然产物的高效异源表达中的应用。其中所述基因组合理简约化的突变株是DT8，DT9和DT10，是连续删除转座酶、前噬菌体、基因组岛等细胞生长非必需基因，并在此基础上继续删除在该菌中本底表达的生物合成基因簇后获得。同时本发明通过在DT8，DT9和DT10基因组上定点插入phiC31attB位点构建了一组基因组合理简约化的伯克氏菌底盘菌株DT8‑attB，DT9‑attB和DT10‑attB，并实现了将所述底盘菌株应用于β‑变形菌纲中天然产物如埃博霉素的产量优化及隐秘生物合成基因簇的高效异源表达。有力扩展了革兰阴性菌异源宿主底盘菌，促进了细菌中新型天然产物的挖掘。

公开(公告)号：CN109486848B

公开(公告)日：2021-10-22

申请号：CN201811407515.8

申请日：2018-11-23

Applicant: 山东大学

Inventor： 王海龙 ,  宋超逸 ,  符军 ,  张友明

IPC: C12N15/76 ,  C12N15/66 ,  C12P19/62 ,  C12R1/47 ,  C12R1/465

Abstract: 本发明涉及一种含有多杀菌素多操纵子人工基因簇质粒的构建方法与应用。本发明利用DNA组装技术和组成型启动子驱动的过表达策略，实现了大环内酯类生物杀虫剂多杀菌素的高效异源表达。本发明将多杀菌素合成途径中的23个基因按功能分为五组，分别置于不同组成型强启动子的控制下，构建了102.6kb的人工基因簇，经反转录PCR分析，多杀菌素生物合成的23个基因共分为7个操纵子，与原始基因簇相比，人工基因簇在异源宿主白色链霉菌J1074中的多杀菌素产量提高了328倍。本发明建立的多操纵子人工基因簇策略为次级代谢产物的合成生物学研究提供了新方法。

公开(公告)号：CN111875678B

公开(公告)日：2021-10-08

申请号：CN202010647705.8

申请日：2020-07-07

Applicant: 华南农业大学 ,  山东大学

Inventor： 马静云 ,  符军 ,  郑瑶瑶 ,  袁恒星 ,  王海龙 ,  张友明

IPC: C07K14/08 ,  C12N15/63 ,  C12N15/66 ,  C12N7/01 ,  A61K39/295 ,  A61K39/12 ,  A61P31/14 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明属于基因重组和疫苗技术领域，本发明先用带三种不同启动子HPPRRSV或类NADC30毒株的GP3‑GP5‑M基因替换TK基因，而后用IL‑18‑IFN‑γ替换gG基因得到，成功构建并拯救了6种以IL‑18和IFN‑γ作为免疫佐剂，表达PRRSV的GP3‑GP5‑M基因的重组伪狂犬病毒，该重组伪狂犬病毒能够在PK‑15细胞上连续传代至少15代均能出现稳定病变，并稳定表达外源基因，说明6种重组病毒均具有良好的遗传稳定性及体外复制能力，该发明提供了构建对抗PRV和PRRSV共感染的二价候选疫苗的方法，为治疗和预防猪繁殖与呼吸综合征病毒与猪伪狂犬病毒疾病感染提供候选疫苗株。

公开(公告)号：CN113186145A

公开(公告)日：2021-07-30

申请号：CN202110547204.7

申请日：2021-05-19

Applicant: 山东大学

Inventor： 姜天宇 ,  张友明 ,  李敏勇 ,  王海龙 ,  孙涛 ,  李庚

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N9/02 ,  A61K48/00 ,  A61K49/00 ,  A61P35/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明提供具有可视化功能的肿瘤靶向细菌及其可视化方法和应用，属于基因工程和肿瘤检测技术领域。本发明构建了一系列大肠杆菌Nissle 1917改造菌株，该菌株具有生物发光功能模块，具有优异的生物发光活性，可以用于小动物活体层面的细菌靶向肿瘤过程示踪成像。本发明的可视化功能的大肠杆菌Nissle 1917可作为成像示踪工具用于肿瘤靶向细菌自身示踪和肿瘤的检测，具有广阔的应用价值。本发明的具有生物发光能力的大肠杆菌Nissle 1917可以成为具有可视化功能的肿瘤靶向载体，应用于肿瘤靶向疗法的相关临床前研究中，因此具有良好的实际应用之价值。

公开(公告)号：CN112522219A

公开(公告)日：2021-03-19

申请号：CN202011423361.9

申请日：2020-12-08

Applicant: 山东大学

Inventor： 卞小莹 ,  武大雷 ,  钟林 ,  刁晓彤 ,  张娜 ,  张友明

IPC: C12N9/00 ,  C12P21/00 ,  C12R1/465

Abstract: 本发明公开了一种控制脂肽脂链长度改变的关键氨基酸位点及其突变体和应用，是对根霉酰胺及根霉肽中的起始缩合结构域(Cs)的关键位点进行点突变或组合突变，可以获得多种新型的具有不同脂肪酸链长度的脂肽衍生物。对于根霉酰胺而言，Q36，Y138，R148位点起决定性作用，Q136，M143起辅助作用，突变体R148A，R148G，Q36G+R148G，Y138A+R148G，Q136A+Y138A+R148G，Y138A+M143A+R148G，Q136A+Y138A+M143A+R148G均倾向于获得长链酰基脂肽产物，突变体R148V，R148L及R148M则倾向于产生短链酰基脂肽衍生物。本发明能有效指导具有药用前景甚至已经成药的脂肽的改造，具有广泛的应用价值。