一种脐带血NK细胞的培养方法

    公开(公告)号:CN109486759A

    公开(公告)日:2019-03-19

    申请号:CN201910043593.2

    申请日:2019-01-17

    发明人: 施琳

    IPC分类号: C12N5/0783

    摘要: 本发明涉及细胞培养领域,特别涉及一种脐带血NK细胞的培养方法,包括以下步骤:由脐带血分离得到的PBMC细胞接种于包被有CD16单抗的培养容器中培养,培养体系是在VIVO-15基础培养基的基础上添加FBS、IL-2、IL-12、IL-15;培养4-4.5天后,扩培,扩培接种于包被有CD16单抗的培养容器中培养,扩培所用的培养体系是在GT-T581基础培养基的基础上添加FBS、IL-2、IL-7、IL-12、IL-15、IL-21。本发明提供的脐带血NK细胞的培养方法,通过在不同的基础培养基上添加不同的组分进行初始培养和扩培,操作简便,成本低,能得到大量满足临床使用标准的NK细胞,使该方法更利于推广和应用。

    一种NK细胞诱导试剂盒
    63.
    发明公开

    公开(公告)号:CN109294988A

    公开(公告)日:2019-02-01

    申请号:CN201811340078.2

    申请日:2018-11-12

    申请人: 王晓柯

    发明人: 李海峰 张莹莹

    IPC分类号: C12N5/0783

    摘要: 本发明公开了一种NK诱导试剂盒,是由以下浓度的组分组成的,CD3因子:1~500ng/m L胸腺肽:1~150ng/m LIL-7:1~300ng/m L IL-15:1~300ng/m LIL-21:1~300ng/m L IL-2:200U~2000U/m L。本发明的NK诱导试剂盒,无滋养层细胞,为纯因子诱导试剂盒,安全性更高,同时本发明实例3诱导出的NK细胞高达90%以上,纯度更高,同时细胞数可以达到40亿以上,并支持脐带血,外周血、浓白,冻存PBMC等样本的培养,适应性更强。

    一种体外扩增人外周血CD3+T细胞的方法

    公开(公告)号:CN108753716A

    公开(公告)日:2018-11-06

    申请号:CN201810615865.7

    申请日:2018-06-14

    发明人: 高基民 钱文斌

    IPC分类号: C12N5/0783

    摘要: 本发明提供了一种用SA(链亲和素)‐hIL2、SA‐hIL7和SA‐hIL21双功能融合蛋白锚定修饰的磁珠体外高效扩增人外周血CD3+T细胞的方法,包括SA‐hIL2/SA‐hIL7/SA‐hIL21双功能融合蛋白的制备及其促T细胞增殖最适浓度的摸索。因hIL2、hIL7和hIL21为IL2家族细胞因子,具有共同的γ链受体,借助生物素与链亲和素的桥联作用将SA‐hIL2、SA‐hIL7和SA‐hIL21双功能融合蛋白共同锚定在已生物素化的磁珠表面,进而通过磁珠的固相表面将CD3+T细胞表面的hIL2、hIL7和hIL21受体聚集成簇,从而强烈激活T细胞、并促进其高效扩增。因此,本发明的T细胞体外扩增方法可用于T细胞的过继性免疫治疗。