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公开(公告)号：CN110452899B
公开(公告)日：2021-04-30
申请号：CN201910594155.5
申请日：2019-07-03
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种耐高温葡萄糖异构酶、突变体及其在制备D‑果糖中的应用。所述葡萄糖异构酶氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述突变体由序列如SEQ ID NO：3所示的氨基酸经定点突变而来。本发明提供了一种未被鉴定的全新耐高温葡萄糖异构酶及其突变体，该突变体具有超级最适反应温度120℃，比原始酶GtAI提高了60℃，属于文献报道的最高水平，解决了现有酶无法在高温生产高果糖浆的技术难题。使用本突变酶生产高果糖浆转化率最高可达75.7％，高于原始酶和其他突变酶的转化效果，同时也是文献报道的最高水平，具有较好应用前景。
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公开(公告)号：CN109609478B
公开(公告)日：2020-06-16
申请号：CN201910033474.9
申请日：2019-01-14
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开了一种新型转氨酶及其高活力突变体在制备L‑草铵膦中的应用，转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID:5所示，其突变体是将SEQ ID:5所示的氨基酸序列的第124、144、237、250、和328位中的一个或者多个进行单位点突变或多位点突变获得的。本发明实现高转化率转氨酶活力突变体基因的高效表达，酶活最高为840U/mg。本发明中所述转氨酶突变体的最适反应温度最高达到67℃，在该温度下催化800mM草铵膦前体酮利用无机胺正丁胺不对称合成L‑草铵膦中，转化率高达100％。该AcTA突变体解决了当前转氨酶制备L‑草铵膦工艺中，酶源少、酶活低、底物耐受性和氨基供体昂贵等技术难题，具有较好应用前景。
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公开(公告)号：CN109777813A
公开(公告)日：2019-05-21
申请号：CN201910075737.2
申请日：2019-01-25
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及以环氧树脂为载体，将含有转氨酶与辅酶磷酸吡哆醛(简称PLP)一起共价固定化的获得的转氨酶-PLP共固定化酶及其制备方法，以及该共固定化转氨酶在制备西他列汀药物手性中间体中的应用。本发明采用转氨酶-PLP共固定化酶为催化剂，稳定性好，使用寿命长，有机溶剂耐受性好，可多次重复利用，并且反应过程中无需昂贵的外源辅酶添加，大幅度降低生产成本。本方法工艺简单，成本低廉，产品产率与纯度高，在西他列汀手性中间体的工业化生产中具有极高应用价值。
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公开(公告)号：CN109609477A
公开(公告)日：2019-04-12
申请号：CN201910032171.5
申请日：2019-01-14
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种α-转氨酶突变体及其在不对称合成L-草铵膦中的应用。所述突变体是将SEQ ID:1所示的氨基酸序列的第52、71、81、153、168、324、341和361位中的一个或者多个进行单位点突变或多位点突变获得的。本发明实现高转化率α-转氨酶突变体基因的高效表达，酶活最高为808.1U/mg。本发明中所述α-转氨酶突变体的最适反应温度最高达到67℃，在该温度下催化600mM草铵膦前体酮不对称合成L-草铵膦中，转化率高达100％，是文献报道的最高水平。该CkTA突变体解决了现有α-TA酶活低、底物耐受性差、转化率低的技术难题，具有较好应用前景。
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公开(公告)号：CN108034649A
公开(公告)日：2018-05-15
申请号：CN201810007946.9
申请日：2018-01-04
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开了一种葡萄糖异构酶突变体及催化D‑葡萄糖异构化制备D‑果糖中的应用，本发明由Thermus oshimai GI(ToGI)的基因序列为模板,经三位点的定点突变后，ToGI突变体以质粒pET‑28b或能表达该酶的载体为表达载体，以Escherichia coli BL21(DE3)或能表达该酶的菌株为表达宿主，实现高转化率葡萄糖异构酶基因的高效表达，酶活为8.45U/mg。本发明中所述ToGI突变体具备优良热稳定性，于100℃保温7d，酶活保持不变。运用固定化技术，该催化剂在100℃条件下连续催化400g/L D‑葡萄糖生成D‑果糖的15个批次中，转化率均大于60％。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104212784A
公开(公告)日：2014-12-17
申请号：CN201410394471.5
申请日：2014-08-12
Applicant: 浙江工业大学
CPC classification number: C12N9/78 , C12P13/002 , C12Y305/05001
Abstract: 本发明公开了一种源自于敏捷食酸菌(Acidovorax facilis)ZJB09122的重组腈水解酶、编码基因、突变体、工程菌，以及在制备1-氰基环己基乙酸中的应用；本发明提供一种水解1-氰基环己基乙腈的腈水解酶及其突变体，该酶及其突变体在催化上述反应时具有良好的区域选择性和催化活力，生产过程对环境友好；解决传统的化学法水解1-氰基环己基乙腈为1-氰基环己基乙酸的工艺中，反应条件苛刻，反应中需要大量的有机溶剂，成本较高，收率较低，环境污染较为严重的问题。
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公开(公告)号：CN110951717B
公开(公告)日：2023-08-18
申请号：CN201911384932.X
申请日：2019-12-28
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种L‑阿拉伯糖差向异构酶突变体，及其在微生物催化D‑半乳糖异构化制备D‑塔格糖中的应用。所述L‑阿拉伯糖差向异构酶突变体，由所示氨基酸经定点突变而得，所述点突变位点为下列中的一个或多个：(1)第304位、(2)第75位、(3)第274位、(4)第167位。本发明有益效果主要体现在：本发明提供了一种全新的L‑阿拉伯糖差向异构酶及其突变体，该突变体具有高最适反应温度75℃，其酶活与原始酶相比提高280％。使用本突变体生产D‑tagatose，产物得率最高可达73.3％。将重组酶进行固定化并连续催化30批次，转化率均大于73％。该突变体的转化水平展示了优良的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN110904088B
公开(公告)日：2023-03-28
申请号：CN201911384895.2
申请日：2019-12-28
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种新型耐高温D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶及突变体，及其在微生物催化D‑果糖异构化制备D‑阿洛酮糖(D‑psicose)中的应用。所属异构酶氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述异构酶突变体由SEQ ID NO.3所示氨基酸经定点突变而得，所述点突变位点为下列中的一个或多个：(1)第106位、(2)第183位、(3)第211位、(4)第276位。本发明有益效果主要体现在：本发明提供了一种全新的耐高温D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体，该突变体具有超高酶活和底物转化率，最适反应温度可达90℃。当底物浓度为700g/L，反应温度为85℃时，产物得率最高达67.14％。将重组酶进行固定化并连续催化300批次，转化率均大于67％。本发明解决了现有酶催化制备D‑psicose效率低下的难题，获得的优于文献报道的连续转化效果对提升D‑psicose工业化水平具有重要意义。
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公开(公告)号：CN111575210B
公开(公告)日：2022-04-26
申请号：CN202010454857.6
申请日：2020-05-26
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开了一种解淀粉芽孢杆菌ZJB19161及其在混凝土裂缝修复中的应用，属于微生物技术领域。所述解淀粉芽孢杆菌ZJB19161于2020年1月13日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 2020044。本发明提供的解淀粉芽孢杆菌ZJB19161从浙江工业大学朝晖校区古运河边的土样中分离获得，其代谢产物可与环境中的钙离子高效结合形成方解石，可有效修复混凝土微裂缝。此外，该菌株具有很好的热稳定性和酸碱稳定性，作为混凝土裂缝修复应用时可以适应不同酸碱度环境。该菌株具有作为生物修复制剂进行混凝土裂缝自修复的潜力和应用前景。
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公开(公告)号：CN112029684B
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN202010909849.6
申请日：2020-09-02
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开了一种适用于水下工程混凝土修复的矿化菌及其应用，属于微生物修复技术领域。本发明提供了一株具备高效的不溶性钙转化能力的矿化菌‑假蕈状芽孢杆菌ZJB20023，其保藏编号为CCTCC NO:M 2020268。在模拟淡水与海水水下工程环境中，菌株ZJB20023可有效修复混凝土微裂缝。而且在负载剂的作用下，菌株ZJB20023能够发挥更高的不溶性钙转化能力，应用到水下工程混凝土裂缝修复时可以实现快速自主修复混凝土微裂缝。因此，假蕈状芽孢杆菌ZJB20023具有作为生物修复制剂进行水下工程混凝土裂缝自修复的潜力和应用前景。
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