表达牛γ干扰素的Flp-In-293细胞系及其建立方法

    公开(公告)号:CN102321589A

    公开(公告)日:2012-01-18

    申请号:CN201110306715.6

    申请日:2011-10-10

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及表达牛γ干扰素的Flp-In-293细胞系,该细胞系命名为B1,含有编码牛γ干扰素的基因。构建细胞系B1的方法是:将序列正确的preBoIFN-γ片段构建成重组质粒pcDNA5/FRT-preBoIFN-γ-FLAG,采用脂质体转染法将重组质粒pcDNA5/FRT-preBoIFN-γ-FLAG与重组酶表达载体pOG44共转染Flp-In-293细胞,使用含120μg/mLHygromycinB的DMEM培养基进行阳性克隆筛选,扩大培养后采用有限稀释法进行亚克隆,通过鉴定后获得重组细胞系。细胞系B1分泌的牛γ干扰素具有极高的比活力和稳定性。

    H5亚型禽流感病毒环介导等温扩增检测的试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN101215610A

    公开(公告)日:2008-07-09

    申请号:CN200710302588.6

    申请日:2007-12-27

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: H5亚型禽流感病毒环介导等温扩增检测的试剂盒及其应用,属于生物技术领域,特别涉及H5亚型禽流感病毒的检测技术领域。由反应液A和反应液B组成,将2μl待检RNA溶液加入装有反应液A的反应管中,放置于60~65℃恒温水浴箱中,经90min后在上述反应管中再加入1μl反应液B,用肉眼观察颜色变化,如颜色变为绿色,则样品为H5亚型禽流感病毒;如果颜色为黄色,则待检样品不是H5亚型禽流感病毒。本试剂盒可提供简便、快速的H5亚型禽流感病毒检测。

    新城疫粘膜DNA疫苗及其构建方法

    公开(公告)号:CN100352513C

    公开(公告)日:2007-12-05

    申请号:CN200410064940.3

    申请日:2004-10-10

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 新城疫粘膜DNA疫苗及其构建方法,涉及一种新城疫疫苗以及构建的方法,先通过反转录-聚合酶链式RT-PCR反应,扩增出新城疫病毒融合蛋白F基因;再将F基因与质粒pVAX1进行连接反应,构建DNA疫苗pVAX1-F;最后将质粒pVAX1-F转化进减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207中,最终获得DNA长度为4647bp的新城疫病毒DNA疫苗。本发明采用以减毒鼠伤寒沙门氏菌运送新城疫病毒DNA疫苗,构建新城疫新型粘膜疫苗SL7207(pVAX1-F)。通过口服方式(饮水或拌料)对家禽(鸡、鹅、鸽等)直接进行免疫,较传统的新城疫弱毒疫苗安全,且较传统的新城疫油乳剂灭活疫苗使用方便,可克服母源抗体干扰以及油乳剂灭活疫苗不能产生粘膜免疫应答的缺陷,并能提供对新城疫病毒强毒攻击的保护。

    新城疫新型粘膜疫苗及其构建方法

    公开(公告)号:CN1616108A

    公开(公告)日:2005-05-18

    申请号:CN200410064940.3

    申请日:2004-10-10

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 新城疫新型粘膜疫苗及其构建方法,涉及一种新城疫疫苗以及构建的方法,先通过反转录—聚合酶链式RT-PCR反应,扩增出新城疫病毒融合蛋白F基因;再将F基因与质粒pVAX1进行连接反应,构建DNA疫苗pVAX1-F;最后将质粒pVAX1-F转化进减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207中,最终获得DNA长度为4647bp的新城疫病毒DNA疫苗。本发明采用以减毒鼠伤寒沙门氏菌运送新城疫病毒DNA疫苗,构建新城疫新型粘膜疫苗SL7207(pVAX1-F)。通过口服方式(饮水或拌料)对家禽(鸡、鹅、鸽等)直接进行免疫,较传统的新城疫弱毒疫苗安全,且较传统的新城疫油乳剂灭活疫苗使用方便,可克服母源抗体干扰以及油乳剂灭活疫苗不能产生粘膜免疫应答的缺陷,并能提供对新城疫病毒强毒攻击的保护。

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