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公开(公告)号：CN117660315A
公开(公告)日：2024-03-08
申请号：CN202311532581.9
申请日：2023-11-17
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明涉及一种诱导牛成肌细胞分化的无血清培养基，该培养基是在基础培养基的基础上添加了以下组分：牛血清白蛋白浓度为0.5mg/ml‑2mg/ml，胰岛素浓度为10μg/ml‑40μg/ml，表皮生长因子浓度为5ng/ml‑20ng/ml，转铁蛋白浓度为2μg/ml‑10μg/ml，维生素C磷酸酯浓度为20μg/ml‑100μg/ml。本发明提供的无血清培养基能有效诱导牛成肌细胞的分化；该培养基不仅仅避免了添加血清，并且效果优于现有的血清培养基，用该培养基可以避免高成本、血清批次差异和动物福利等问题。
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公开(公告)号：CN114921568B
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202210597655.6
申请日：2022-05-30
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种与秦川牛体尺及肉质性状相关的SNP分子标记，位于R3HDM1基因核苷酸序列(XM 024980895.1)第14外显子的多态性T/C位点，即g.62029166T/C位点；该位点与秦川牛体斜长、腰高、胸深、背膘厚、眼肌面积、眼肌深度性状显著相关。可以用于制备检测R3HDM1基因g.62029166T/C位点基因型试剂盒的应用，可提前预测肉牛体尺及肉质性状并用于早期肉用选种，加快肉牛遗传进展，节约生产成本。同时，提供了用于SNP位点检测的试剂盒和操作方法，可实现对肉牛群体快速检测并判定个体基因型，用于犊牛早期选种留种可加快肉牛肉用选育进程。
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公开(公告)号：CN114480670B
公开(公告)日：2022-12-06
申请号：CN202210111782.0
申请日：2022-01-26
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12Q1/6809 , C12Q1/6869 , C12N15/10 , G01N33/68 , C12Q1/66
Abstract: 本发明涉及牛骨骼肌分化相关DNA甲基化酶TET1与m6A甲基化酶METTL3互作鉴定和应用，提供了鉴定TET1的m6A甲基化水平的引物序列和方法，根据m6A‑seq测序和m6A‑IP‑qPCR鉴定了TET1的m6A水平在成肌分化中的变化；通过m6A位点的同义突变改变TET1的m6A甲基化水平，证明了TET1的m6A甲基化具有影响骨骼肌分化功能；提供了检测TET1受m6A甲基化修饰调控方法，证明TET1的表达受METTL3‑m6A‑YTHDF1的调控；提供了检测DNA甲基化影响m6A甲基化修饰方法，证明了牛骨骼肌分化中DNA甲基化与RNA甲基化的互作，为肉牛的定向选育提供了一种新的分子标记。
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公开(公告)号：CN109628449B
公开(公告)日：2022-05-31
申请号：CN201811547739.9
申请日：2018-12-18
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/88
Abstract: 本发明涉及一种牛脂肪细胞的microRNA，该牛脂肪细胞的microRNA是bta‑miR‑33a，其序列为GUGCAUUGUAGUUGCAUUGCA，利用化学合成bta‑miR‑33a的mimic和NC。根据申请人的实验表明，bta‑miR‑33a的mimic抑制脂肪细胞的增殖分化过程。可以用于调控牛前体脂肪细胞增殖分化的应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109486752B
公开(公告)日：2022-05-27
申请号：CN201811547543.X
申请日：2018-12-18
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明涉及一种秦川肉牛肌内脂肪细胞的分离纯化和鉴定方法，使用II型胶原酶对秦川肉牛背最长肌进行消化，经II型胶原酶消化后的组织块用含有10％胎牛血清的DMEM/F12培养基中和，经过滤、离心得到细胞，细胞再经洗涤、离心后重悬于含有10％FBS的DMEM/F12培养基中，计数后，将细胞接种在培养皿中，在CO2培养箱中培养1.5小时，用无菌磷酸缓冲盐溶液洗涤除去非粘附细胞，然后将细胞培养在37℃、CO2浓度为5％的培养箱中，每隔2天换一次培养基，待细胞汇合度达到70％‑80％后，进行细胞免疫荧光标记阳性细胞鉴定。该方法获得的肉牛肌内脂肪细胞具有较高的前脂肪细胞阳性比率，为提高肌内脂肪沉积的同时不增加皮下及内脏脂肪沉积的研究奠定了基础。
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公开(公告)号：CN108624606B
公开(公告)日：2021-07-13
申请号：CN201810257256.9
申请日：2018-03-27
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明涉及一种密码子优化的重组人溶菌酶基因及其应用，该密码子优化的重组人溶菌酶基因是通过比较牛乳腺优势乳蛋白高频密码子和低频密码子对人溶菌酶密码子进行全局优化(Lyzop)和翻译起始后23位密码子进行优化(Lyzop23)。优化后的密码子显著提高了人溶菌酶mRNA稳定性及在牛乳腺细胞中mRNA表达量。通过蛋白免疫印迹实验证明，密码子优化的重组人溶菌酶基因在牛乳腺细胞中表达量是野生型的2.18倍。为今后细胞生物反应器以及牛乳腺生物反应器高效生产重组人溶菌酶提供了工具基因。同时，将密码子优化的重组人溶菌酶基因与荧光素酶融合表达，通过分析荧光素酶表达量，实现密码子优化效果的快速、准确评价，为今后开展基因密码子优化提供了新的可靠评价方法。
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公开(公告)号：CN109628403A
公开(公告)日：2019-04-16
申请号：CN201811548119.7
申请日：2018-12-18
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N5/10
CPC classification number: C12N5/0658 , C12N2510/00
Abstract: 本发明涉及一种抑制成肌细胞增殖和分化的调控方法，根据SMAD5基因CDS区域核苷酸序列全长，设计可靶向沉默SMAD5基因的siRNA，然后通过在线软件挑选可靶向沉默SMAD5基因效果最好的siRNA进行合成，合成的该siRNA命名为siSMAD5片段，其序列为：Sense：CCAUGGAUACAAGCAAUAATT；Antisense：UUAUUGCUUGUAUCCAUGGTT；用siSMAD5片段转染牛成肌细胞，成肌细胞增殖、分化的标志基因MyoG的mRNA水平显著下降，且成肌细胞肌管融合过程也明显受损。该方法简单快速准确，为今后开展调控肌细胞增殖、成肌分化过程提供了新的可靠研究方法。
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公开(公告)号：CN104031965B
公开(公告)日：2017-03-15
申请号：CN201410247225.7
申请日：2014-06-05
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了山羊乳酪蛋白源抗菌肽的制备方法，采用木瓜蛋白酶将山羊乳酪蛋白酶解，酶解物经过大孔非极性树脂分离及脱盐，再经过半制备凝胶色谱仪纯化，冷冻干燥，即加工成山羊乳酪蛋白源抗菌肽粉，经申请人进行的抗菌功能试实验结果表明，制得的该山羊乳酪蛋白源抗菌肽的分子量均在3000以下，易于吸收利用，所得山羊乳酪蛋白源抗菌肽二级结构主要为无规则卷曲，为无毒性的绿色天然抗菌肽，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌等具有优良的抗菌性能，在乳与乳制品、化妆品和其他食品保鲜方面具有极其广阔应用前景。
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公开(公告)号：CN102876700B
公开(公告)日：2014-08-20
申请号：CN201210375051.3
申请日：2012-09-27
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/65 , C12N15/63 , C12N5/10 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种PiggyBac转座子介导的肌肉特异表达A-FABP通用载体的构建方法。全基因合成一段包括PiggyBac转座子转座必需的PB5’端与PB3’端的DNA序列，并且在PB5’末端和PB3’末端中间引入多克隆位点。以pSP72商业化质粒为基础完成PiggyBac骨架载体构建。再将LoxP锚定的新霉素抗性基因、绿色荧光蛋白基因（LoxP-NEO-LoxP-EGFP）以及牛α-actin启动子和牛A-FABP基因克隆到PiggyBac骨架载体多克隆位点中，最终构建完成PiggyBac-NEO-EGFP-actin-AFABP通用型表达载体。通过分离并转染牛成纤维细胞，表明通过上述方法构建的通用型表达载体可在成纤维细胞中实现高效转座，在很大程度上提高了目的基因的整合效率。可用于制备提高肉中多不饱和脂肪酸、增加瘦肉率等多种用途，具有很高的通用性。
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