一种细胞共培养的装置及牛肌细胞与脂肪细胞的共培养方法

    公开(公告)号:CN110511871B

    公开(公告)日:2025-02-07

    申请号:CN201910911343.6

    申请日:2019-09-25

    Abstract: 本发明的一种细胞共培养的装置,涉及细胞培养领域,其是由皿体和皿盖构成,皿体为上开口的中空结构,皿体开口处有皿盖,皿体内有隔离圈,隔离圈将皿体的内部分割为区域Ⅰ和区域Ⅱ,隔离圈内有爬片。利用上述装置在实现牛肌细胞与脂肪细胞直接接触共培养的同时,又可将爬片上的单类细胞(肌细胞或脂肪细胞)进行收集进行后续转录组及蛋白组的分析处理,以用来研究共培养环境下对肌细胞或脂肪细胞的作用,因此有利于进一步探究肌细胞与脂肪细胞之间的相互作用;经多次观察证实用这种方法培养的肌细胞和脂肪细胞成活效率高、活力好、细胞特征明显,并与单独培养的肌细胞和脂肪细胞形态一致,是一种很好的体外研究模型,具有一定的推广研究价值。

    一种秦川牛体尺及肉质性状相关的SNP分子标记及其应用

    公开(公告)号:CN114921568B

    公开(公告)日:2023-04-07

    申请号:CN202210597655.6

    申请日:2022-05-30

    Abstract: 本发明公开了一种与秦川牛体尺及肉质性状相关的SNP分子标记,位于R3HDM1基因核苷酸序列(XM 024980895.1)第14外显子的多态性T/C位点,即g.62029166T/C位点;该位点与秦川牛体斜长、腰高、胸深、背膘厚、眼肌面积、眼肌深度性状显著相关。可以用于制备检测R3HDM1基因g.62029166T/C位点基因型试剂盒的应用,可提前预测肉牛体尺及肉质性状并用于早期肉用选种,加快肉牛遗传进展,节约生产成本。同时,提供了用于SNP位点检测的试剂盒和操作方法,可实现对肉牛群体快速检测并判定个体基因型,用于犊牛早期选种留种可加快肉牛肉用选育进程。

    一种密码子优化的重组人溶菌酶基因及其应用

    公开(公告)号:CN108624606B

    公开(公告)日:2021-07-13

    申请号:CN201810257256.9

    申请日:2018-03-27

    Inventor: 成功 昝林森 王力

    Abstract: 本发明涉及一种密码子优化的重组人溶菌酶基因及其应用,该密码子优化的重组人溶菌酶基因是通过比较牛乳腺优势乳蛋白高频密码子和低频密码子对人溶菌酶密码子进行全局优化(Lyzop)和翻译起始后23位密码子进行优化(Lyzop23)。优化后的密码子显著提高了人溶菌酶mRNA稳定性及在牛乳腺细胞中mRNA表达量。通过蛋白免疫印迹实验证明,密码子优化的重组人溶菌酶基因在牛乳腺细胞中表达量是野生型的2.18倍。为今后细胞生物反应器以及牛乳腺生物反应器高效生产重组人溶菌酶提供了工具基因。同时,将密码子优化的重组人溶菌酶基因与荧光素酶融合表达,通过分析荧光素酶表达量,实现密码子优化效果的快速、准确评价,为今后开展基因密码子优化提供了新的可靠评价方法。

    PiggyBac转座子介导的肌肉特异表达A-FABP通用载体构建

    公开(公告)号:CN102876700B

    公开(公告)日:2014-08-20

    申请号:CN201210375051.3

    申请日:2012-09-27

    Abstract: 本发明公开了一种PiggyBac转座子介导的肌肉特异表达A-FABP通用载体的构建方法。全基因合成一段包括PiggyBac转座子转座必需的PB5’端与PB3’端的DNA序列,并且在PB5’末端和PB3’末端中间引入多克隆位点。以pSP72商业化质粒为基础完成PiggyBac骨架载体构建。再将LoxP锚定的新霉素抗性基因、绿色荧光蛋白基因(LoxP-NEO-LoxP-EGFP)以及牛α-actin启动子和牛A-FABP基因克隆到PiggyBac骨架载体多克隆位点中,最终构建完成PiggyBac-NEO-EGFP-actin-AFABP通用型表达载体。通过分离并转染牛成纤维细胞,表明通过上述方法构建的通用型表达载体可在成纤维细胞中实现高效转座,在很大程度上提高了目的基因的整合效率。可用于制备提高肉中多不饱和脂肪酸、增加瘦肉率等多种用途,具有很高的通用性。

    miR-493启动子区SNPs在秦川牛体尺、肉质性状预测中的应用

    公开(公告)号:CN119410786A

    公开(公告)日:2025-02-11

    申请号:CN202411576146.0

    申请日:2024-11-06

    Abstract: 本发明公开了miR‑493基因启动子区SNPs在秦川牛体尺、肉质性状预测中的应用。本发明发现标记位于miR‑493基因启动子区的四个SNP位点,与秦川牛体斜长、背膘厚性状显著相关。基于这一发现,可通过检测miR‑493上述SNPs位点基因型预测秦川牛体尺和肉质性状;同时,提供了用于SNP位点检测的试剂盒和操作方法,可实现对肉牛群体快速检测并判定个体基因型,用于犊牛早期选种留种,加快肉牛肉用选育进程,节约生产成本。

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