公开(公告)号：CN103555572A

公开(公告)日：2014-02-05

申请号：CN201310531119.7

申请日：2013-10-31

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 应汉杰 ,  赵向雨 ,  吴菁岚 ,  庄伟 ,  柳东

IPC: C12M1/38 ,  C12P7/16

CPC classification number: C12M23/58 ,  C12M29/08 ,  C12M29/10 ,  C12M41/22 ,  C12M43/02 ,  C12P7/16

Abstract: 本发明公开了一种高效气提耦合发酵制备丁醇的装置和方法，装置包括温控循环水浴、发酵罐、树脂柱、补料罐、通气滤器、气体循环器、气体流量计、葛式冷凝器、收集器和气提罐；其中，气提罐通过管道与补料罐连通；气提罐底部内置气体分布器；葛式冷凝器内管顶部一方面通过管道依次顺序与气体流量计、气体循环器、气体分布器连通，另一方面通过管道与树脂柱连通；葛式冷凝器底部与收集器连通，收集器的另一个接口通过管道与气提罐连通收集气提罐内的气体；气提罐与发酵罐系统连通形成回路；发酵罐系统由2个以上并联的发酵罐组成，发酵罐内设置吸附材料用于固定化发酵菌株；发酵罐由温控循环水浴控制温度。

公开(公告)号：CN119372233A

公开(公告)日：2025-01-28

申请号：CN202411557658.2

申请日：2024-11-04

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 牛欢青 ,  冷静 ,  应汉杰 ,  杨晟 ,  蒋宇 ,  孙兵兵 ,  杨俊杰 ,  杨思琪 ,  李梦婷 ,  柳东 ,  陈勇

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/54 ,  C12N15/56 ,  C12N15/53 ,  C12N15/61 ,  C12N15/60 ,  C12N1/21 ,  C12P19/00 ,  C12P19/14 ,  C12P19/18 ,  C12P19/24 ,  A23L33/135 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种高效合成2′‑岩藻糖基乳糖的基因工程菌及其构建方法与应用，本发明在模块化代谢工程改造策略的基础上结合CRISPR‑转座技术，将2′‑岩藻糖基乳糖合成途径中的岩藻糖模块基因和糖基转移酶模块基因进行基因组整合，构建了用于合成2′‑岩藻糖基乳糖的多拷贝菌株库，最终获得了多个高效合成2′‑岩藻糖基乳糖的整合型表达菌株。相较于质粒型表达菌株，整合型表达菌株产量更高、稳定性更好。葡萄糖激酶编码基因glk或丙酮酸氧化酶编码基因poxB的敲除或中断能进一步提升产量，其中glk中断菌株DH1W6G6 glk::VerA的单位细胞产量为5.14g/g DCW，2′‑岩藻糖基乳糖相对于乳糖的收率达0.991mol/mol，为现阶段以大肠杆菌为底盘整合型菌株的最高值，具备良好的工业化前景。

公开(公告)号：CN119345244A

公开(公告)日：2025-01-24

申请号：CN202411481169.3

申请日：2024-10-23

Applicant: 南京工业大学 ,  南京高新工大生物技术研究院有限公司

Inventor： 应汉杰 ,  沈涛 ,  唐成伦 ,  尚言国 ,  庄伟 ,  柳东 ,  陈勇 ,  邹逢霞

IPC: A61K36/068 ,  A61P35/00 ,  A61K31/7076 ,  A61K31/715 ,  A61K45/06

Abstract: 本发明公开了蛹虫草提取物在制备抗癌因性疲乏药物中的应用，所述蛹虫草提取物为蛹虫草水提物；所述蛹虫草提取物中虫草素和虫草多糖的质量比为3:2.1‑8。本发明所提供的蛹虫草提取物及其组合物可有效用于抗癌因性疲乏，如可以降低由于癌因性疲乏所导致的白细胞和血小板下降的程度，降低癌因性疲乏所导致的游泳力竭时间缩短的程度。

公开(公告)号：CN119193643A

公开(公告)日：2024-12-27

申请号：CN202411339403.9

申请日：2024-09-25

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 柳东 ,  李梦婷 ,  张迪 ,  王振宇 ,  熊文韬 ,  朱晨杰 ,  应汉杰

IPC: C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N15/31 ,  C12N15/55 ,  C12N9/04 ,  C12N9/78 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种增大细菌尺寸的方法、重组大肠杆菌及其应用。本发明通过调控微生物细胞形态相关蛋白，对微生物细胞形态及分裂方式进行改造，从而优化微生物细胞的特性，以提高其在生物制造等领域的应用价值。具体的，以强化了minE基因或弱化了mreB、minC、minD、dacA、ftsZ基因中的任意一个或几个蛋白基因表达的大肠杆菌为底盘菌株，通过异源表达DivIVA增大了细胞尺寸。本发明获得了可分裂、培养、遗传的大尺寸细胞，为生产一些胞内/外产物提供了更大的生产空间，并可应用于多种生物大分子生产，为增强目标产物生产效率提供了一种新的解决方案。同时，增大的细胞形态有利于细胞截留、吸附、沉淀、产物分离等过程，提高了整体生产效率。

公开(公告)号：CN119193356A

公开(公告)日：2024-12-27

申请号：CN202411341211.1

申请日：2024-09-25

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 柳东 ,  王振宇 ,  支开旗 ,  张慧方 ,  应汉杰 ,  陈勇 ,  朱晨杰

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/31 ,  C12N15/55 ,  C12N15/57 ,  C12N15/61 ,  C12N15/81 ,  C12N11/02 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及基于生物膜生产人表皮生长因子的重组酿酒酵母菌及其构建方法与应用。本发明以酿酒酵母BY4742和530‑1C作为表达人表皮生长因子(hEGF)底盘细胞，通过基因改造方式，优化启动子、信号肽等方式，将人表皮生长因(hEGF)的产量由80μg/L的水平提升至15mg/L；通过优化工程化蛋白分泌途径中的相关模块，单一或组合缺失降解酶基因(PEP4、PRB1、YAP3)，过表达蛋白分泌通路中的关键节点基因(KAR2、PDI1、HAC1、ERV29、ERO1、SRP54、SEC24、DER1)，将hEGF产量提升至141mg/L的水平；通过选择过表达酵母内源性的絮凝基因FLO11和白色念球菌的外源性基因ALS3，构建具有絮凝且黏附在非生物表面性能的生物膜菌株，并基于生物膜固定化连续发酵，实现了hEGF的连续生产，且产量稳定在300mg/L之上。

公开(公告)号：CN118903218A

公开(公告)日：2024-11-08

申请号：CN202410995930.9

申请日：2024-07-24

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 庄伟 ,  张金明 ,  张吉行 ,  应汉杰 ,  吴菁岚 ,  杨朋朋 ,  陈勇 ,  柳东 ,  沈涛 ,  朱晨杰

IPC: A61K35/744 ,  A61K35/742 ,  A61K35/74 ,  A61K47/69 ,  A61P1/00 ,  A61P29/00 ,  A23L33/135 ,  A23L2/38 ,  A23L2/66 ,  A23L2/52 ,  C12N1/20 ,  C12R1/01 ,  C12R1/125 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种基于多孔微球的益生菌制剂及其制备方法和应用，创新性的将孔洞结构微球通过直接添加的方式应用在益生菌制剂的制备中，并提出菌种的填充式培养。所述益生菌制剂的制备方法包括以下步骤：(1)将多孔微球与单宁酸‑Ca2+溶液混合得到修饰后多孔微球；(2)将益生菌接种至含有所述修饰后多孔微球的发酵培养基中进行黏附共培养，得到第一发酵液，更换新鲜发酵培养基，进行填充式培养，得到第二发酵液；(3)将所述的第二发酵液离心取沉淀，先后加入粘蛋白溶液和脱脂奶粉溶液混合，即得益生菌制剂。本发明提供的制备方法所制备的益生菌制剂，能够充实微球孔洞内益生菌黏附，大幅提高益生菌含量，保证益生菌活性。

公开(公告)号：CN118291510A

公开(公告)日：2024-07-05

申请号：CN202410536013.4

申请日：2024-04-30

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 柳东 ,  张迪 ,  廖镜淋 ,  应汉杰 ,  朱晨杰 ,  陈勇 ,  鲍雅楠 ,  张斌赟 ,  王振宇

IPC: C12N15/70 ,  C12P7/18 ,  C12P19/34 ,  C12N15/53 ,  C12N15/60 ,  C12N15/12 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种基于凝聚‑割离技术生产目标分子的方法、重组菌株及其应用。本发明通过调控生物凝聚态的形成，实现目标分子在细胞端的高浓度富集。经过这一步骤，获得了高度富集的目标分子，并可通过细胞分裂的方式进一步累积。这一创新方法为提高目标分子的产量和积累率开辟了新途径。相较于传统方法，本方法不仅有效地提高了细胞内目标分子在特定区域的浓度，还通过细胞分裂机制，实现了这些富集分子的进一步积累。通过精确调控生物凝聚态的生成，本发明克服了目标分子在细胞内稳定积累的难题，为增强目标分子生产效率提供了一种创新解决方案。这一方法在生物工艺、医药制造及其他相关领域具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN118240729A

公开(公告)日：2024-06-25

申请号：CN202410253061.2

申请日：2024-03-06

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 柳东 ,  鲍雅楠 ,  张迪 ,  廖镜淋 ,  张斌赟 ,  徐彬锐 ,  邵子健

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/113 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，揭示了一种提高双链RNA产量的创新方法。该方法涉及构建一个能够高效产生双链RNA的大肠杆菌底盘BL21(DE3)△rnc△minC，并通过外源添加脂肪酸来进一步提升双链RNA的生产量。在这项研究中，我们成功敲除了大肠杆菌BL21(DE3)中编码细胞分裂Min系统中隔膜抑制蛋白的minC基因以及编码内切核糖核酸酶RNase III的rnc基因，并将其与含有单个T7启动子的RNAi表达载体相匹配，以实现高效的双链RNA生产。同时，我们提出在培养基中外源添加脂肪酸的策略，以进一步提高双链RNA的产量。这一创新系统不仅显著提升了双链RNA的产量，还加速了基于RNAi的害虫防治技术的发展。这一技术不仅为生物农业领域提供了先进的工具，而且为可持续农业的发展做出了积极贡献。

公开(公告)号：CN118028283A

公开(公告)日：2024-05-14

申请号：CN202410236280.X

申请日：2024-03-01

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 庄伟 ,  张逍 ,  张吉行 ,  吴菁岚 ,  应汉杰 ,  柳东 ,  沈涛 ,  陈勇 ,  朱晨杰 ,  杨朋朋

IPC: C12N11/10 ,  C12N11/096 ,  C12N11/089 ,  C12N11/087 ,  C12N11/082 ,  C12N9/12

Abstract: 本发明属于酶的催化及应用技术领域，具体涉及一种氨基化的螯合金属离子催化剂及其制备方法与应用。所述的催化剂的制备方法为螯合镍离子的亲和介质修饰上镁离子；再进行氨基化处理；最后将激酶固定在催化剂表面，实现对激酶的重复利用。本发明获得的该催化剂，不仅能催化反应的进行，提高ATP的利用率，显著提升酶活，还能作为载体通过亲和吸附固定化酶，吸附效果更好，载率更高，并实现了酶的重复使用，因而在固定化酶的大规模工业化生产中，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN114575153B

公开(公告)日：2024-01-19

申请号：CN202210219794.5

申请日：2022-03-08

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 应汉杰 ,  沙宇 ,  庄伟 ,  陈勇 ,  朱晨杰 ,  柳东 ,  杨朋朋 ,  吴菁岚

IPC: D06M14/04 ,  C12N11/12 ,  C12N11/082 ,  C12R1/865 ,  C12R1/19 ,  C12R1/145

Abstract: 本发明公开了一种快速黏附细胞的智能纤维材料及其制备方法与应用，所述制备方法为将表面带有羟基和氨基的功能化纤维置于含可自由基聚合的单体、引发剂、配位剂、催化剂、还原剂和溶剂的聚合溶液中反应，即得智能纤维材料。本发明结合SI‑ATRP的特点，利用绿色无毒的还原剂，通过减弱催化剂的氧化速率进行SI‑ATRP，使所得载体表面聚合物的聚合程度可控程度有效提高，同时还进一步削弱了残留有机化学试剂在固定化细胞过程中对细胞造成的潜在毒性。