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公开(公告)号：CN102899373A
公开(公告)日：2013-01-30
申请号：CN201110210858.7
申请日：2011-07-26
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明提供一种中间补料发酵生产环磷酸腺苷的方法。本发明提供的发酵生产环磷酸腺苷的方法采用间歇匀速补料的方式分批发酵生产环磷酸腺苷，发酵菌株为保藏编号为CGMCC No.3584的节杆菌，在发酵的指数期之后，以每隔3～10h间歇匀速流加补料碳源，共流加4～10次。本发明提供的方法优点在于，在整个培养过程中，碳源浓度较低，而且发酵结束基本被耗尽，在减少反馈抑制的同时，使环磷酸腺苷产量有较大幅的提高。
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公开(公告)号：CN102861561A
公开(公告)日：2013-01-09
申请号：CN201110187052.0
申请日：2011-07-05
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明提供一种吸附丁醇的疏水性大孔聚合物吸附剂的脱附再生方法，该方法包括用水溶性低沸点极性溶剂和水依次洗脱吸附了丁醇的疏水性大孔聚合物吸附剂。包含丁醇的溶液如丁醇发酵液经疏水性大孔聚合物吸附剂吸附后，采用本发明所述的脱附再生方法，可以实现对吸附剂内部吸附的丁醇的充分溶解、脱除，此外还可以实现在进行丁醇发酵液吸附的固定床直接对吸附剂进行再生处理恢复其吸附能力，不需要将吸附剂从固定床中取出即可直接进入下一阶段的吸附过程，节约了大量的时间，提高了再生效率。本发明提供的方法工艺简单，分离时间短，脱附再生容易、快速且完全，设备投资少，污染少，能耗低，易于规模化生产。
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公开(公告)号：CN101503724B
公开(公告)日：2012-11-14
申请号：CN200910025981.4
申请日：2009-03-16
Applicant: 南京工业大学 , 南京同凯兆业生物技术有限责任公司
IPC: C12P19/30 , C12R1/865 , C12R1/125 , C12R1/13 , C12R1/645 , C12R1/78 , C12R1/84 , C12R1/72 , C12R1/85 , C12R1/265 , C12R1/185 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种利用生物磷酰化技术制备核苷酸的新方法，以嘌呤或嘧啶类的核苷酸前体物质和磷酸根离子为底物，以葡萄糖作为核糖基团供体和能量供体，利用有透性的微生物细胞，通过化学小分子效应物质调控辅因子再生体系、物质能量偶联再生体系和代谢途径关键酶酶活，实现高效制备核苷酸。本发明采用小分子化学效应物质调控代谢流量，改善了能量及辅酶的再生及利用状况，使得代谢流向目标路径发生了迁移，代谢副产物减少，产物得率提高；本发明采用的改变细胞膜透性的方法加速了反应组分向微生物细胞的渗透，使得反应时间缩短，底物利用率提高。
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公开(公告)号：CN101768617B
公开(公告)日：2012-06-27
申请号：CN201019026027.7
申请日：2010-02-04
Applicant: 南京工业大学 , 南京同凯兆业生物技术有限责任公司
Abstract: 本发明公开了一种全细胞生物合成脱氧核苷三磷酸的方法，是以脱氧核苷一磷酸dNMP和磷酸根离子为底物，以糖为能量供体，利用有透性的酵母细胞，在化学效应物质的存在下反应来制备脱氧核苷三磷酸。本发明通过运用全细胞催化和代谢工程的原理，采用化学效应物质调控代谢流量，建立了高效的能量自耦联和再生系统，最终实现脱氧核苷三磷酸的高效制备。本发明克服了传统脱氧核苷三磷酸生产工艺的不足，具有工艺简单、转化率高、成本低，以及污染小等特点。
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公开(公告)号：CN101724670B
公开(公告)日：2012-02-01
申请号：CN200910234232.2
申请日：2009-11-17
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种尿苷磷酰类化合物联产手性羟基酯的方法，该方法以乳清酸和β-酮酯类化合物为底物，以葡萄糖为能量供体，利用有透性的酵母细胞同时制备尿苷磷酰类化合物与手性羟基酯。本发明运用全细胞催化和代谢工程的原理，通过建立代谢网络模型和代谢流量分析，利用有透性的酵母细胞联产尿苷磷酰类化合物和手性羟基酯，得率增高、生产成本降低、合成时间缩短、底物利用率大幅提高。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102321564A
公开(公告)日：2012-01-18
申请号：CN201110260211.5
申请日：2011-09-05
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种高效表达三磷酸胞苷合成酶的基因工程菌，其分类命名为大肠埃希氏菌(Escherichia coli)，该菌株已于2011年7月8日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.5048。本发明还公开了上述基因工程菌的构建方法及其应用。本发明首次将谷氨酸棒杆菌ATCC13032中三磷酸胞苷合成酶基因pyrG在大肠杆菌Rosetta中高效表达。重组的基因工程菌株能够高效表达三磷酸胞苷合成酶基因pyrG，分泌表达三磷酸胞苷合成酶，IPTG诱导表达重组大肠杆菌，酶活为10U/mg；乳糖自诱导表达重组大肠杆菌，酶活为7U/mg。
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公开(公告)号：CN102304490A
公开(公告)日：2012-01-04
申请号：CN201110260265.1
申请日：2011-09-05
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种高效表达乳清酸磷酸核糖转移酶和乳清苷酸脱羧酶的重组菌，其分类命名为大肠埃希氏菌(Escherichia coli)，该菌株已于2011年7月8日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.5047。本发明还公开了上述重组菌的构建方法和应用。本发明首次将谷氨酸棒杆菌中的乳清酸磷酸核糖转移酶基因OPRTase pyrE和乳清苷酸脱羧酶基因ODCase pyrF在大肠杆菌中高效共表达。IPTG诱导表达重组大肠杆菌，将破碎后收集的粗酶液经Ni柱纯化后，进行酶反应，OPRTase和ODCase的酶活分别为9U/mg和12U/mg蛋白。
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公开(公告)号：CN102268385A
公开(公告)日：2011-12-07
申请号：CN201010191515.6
申请日：2010-06-04
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明提供一种用于发酵生产环磷酸腺苷的节杆菌及其应用，该节杆菌的保藏编号为CGMCC No.3584。保藏编号为CGMCC No.3584的本发明的节杆菌A302菌株比出发菌株的环磷酸腺苷产量提高了3倍，该菌株经过10代以上传代，生产环磷酸腺苷的性能保持稳定。
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公开(公告)号：CN101538300B
公开(公告)日：2011-11-30
申请号：CN200810019855.3
申请日：2008-03-19
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种胞二磷胆碱的盐析-溶析结晶方法，在pH值为5.0～8.0和浓度为10g/L～400g/L的胞二磷胆碱水溶液中，加入质量为胞二磷胆碱1％～20％的无机钠盐和体积为起始胞二磷胆碱水溶液1.0～4.0倍的溶析剂，在10℃～40℃内，搅拌转速控制在20～230rpm，结晶完全后抽滤，乙醇洗涤，真空干燥即得纯度高于99％的胞二磷胆碱钠盐晶体。本发明的方法，最终产品质量明显改善，结晶收率稳定提高，并且可以通过改变结晶温度或流场状态控制晶体颗粒大小，操作简单重复性好，适合胞二磷胆碱的工业化生产。
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公开(公告)号：CN102175800A
公开(公告)日：2011-09-07
申请号：CN201110002675.6
申请日：2011-01-07
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种测定乳制品中1，3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯含量的方法，该方法包括如下步骤：(1)按照常规方法提取乳制品中的脂肪；(2)将步骤(1)提取的脂肪溶于溶于二氯甲烷中，再通过高效液相色谱法测定1，3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯的含量。本发明方法解决了无法直接对甘油三酯定量的难点，具有准确程度高、受环境变化影响较小、操作方法简便等优点。
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