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公开(公告)号：CN101392225B
公开(公告)日：2012-06-27
申请号：CN200810156168.6
申请日：2008-10-06
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种不对称转化制备(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的重组酵母菌，它是导入羰酰还原酶基因和葡萄糖脱氢酶基因的酿酒酵母菌。本发明还公开了上述重组酵母菌的构建方法。利用本发明重组酵母菌制备(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的方法为：以4-氯乙酰乙酸乙酯为底物，以葡萄糖为辅助底物，由本发明的重组酵母菌进行转化反应制备得到(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯。本发明的重组酵母菌可在不添加任何辅酶的条件下，高效催化4-氯乙酰乙酸乙酯为(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯，光学纯度e.e值大于98％，对底物的转化率大于95％，降低了生产成本，比起其它无需外加昂贵辅酶的菌种，对底物的转发率高，光学活性高。
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公开(公告)号：CN101372699B
公开(公告)日：2011-11-30
申请号：CN200810124754.2
申请日：2008-09-02
Applicant: 南京工业大学
CPC classification number: C12P7/42 , C12N9/0004
Abstract: 本发明公开了一种氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的羰酰还原酶在4-氯乙酰乙酸乙酯不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中的应用。即以氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的羰酰还原酶为催化剂，以4-氯乙酰乙酸乙酯为底物，以NADPH为辅因子，不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯。本发明首次将氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的羰酰还原酶应用于4-氯乙酰乙酸乙酯不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中，取得很好的效果，其对底物的得率高达95％、产物的对映体过量值为100％，且产量高，大大降低了生产成本。
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公开(公告)号：CN101392225A
公开(公告)日：2009-03-25
申请号：CN200810156168.6
申请日：2008-10-06
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种不对称转化制备(S)－4－氯－3－羟基丁酸乙酯的重组酵母菌，它是导入羰酰还原酶基因和葡萄糖脱氢酶基因的酿酒酵母菌。本发明还公开了上述重组酵母菌的构建方法。利用本发明重组酵母菌制备(S)－4－氯－3－羟基丁酸乙酯的方法为：以4－氯乙酰乙酸乙酯为底物，以葡萄糖为辅助底物，由本发明的重组酵母菌进行转化反应制备得到(S)－4－氯－3－羟基丁酸乙酯。本发明的重组酵母菌可在不添加任何辅酶的条件下，高效催化4－氯乙酰乙酸乙酯为(S)－4－氯－3－羟基丁酸乙酯，光学纯度e.e值大于98％，对底物的转化率大于95％，降低了生产成本，比起其它无需外加昂贵辅酶的菌种，对底物的转发率高，光学活性高。
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公开(公告)号：CN101962661A
公开(公告)日：2011-02-02
申请号：CN201010213724.6
申请日：2010-06-29
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12P7/62
Abstract: 本发明公开了一种氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的羰酰还原酶在4-氯乙酰乙酸乙酯不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中的应用。即以氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的羰酰还原酶为催化剂，以4-氯乙酰乙酸乙酯为底物，以NADH为辅因子，不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯。本发明首次将氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的羰酰还原酶应用于4-氯乙酰乙酸乙酯不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中，取得很好的效果，其酶活高达15U/mg，其对底物的得率高达91％，产物的对映体过量值为100％，且产量高，大大降低了生产成本。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101613672A
公开(公告)日：2009-12-30
申请号：CN200910183017.4
申请日：2009-08-04
Applicant: 南京工业大学 , 南京同凯兆业生物技术有限责任公司
Abstract: 本发明公开了一种不对称转化制备(S)－4－氯－3－羟基丁酸乙酯的重组大肠杆菌，它是导入羰酰还原酶基因和葡萄糖脱氢酶基因的大肠杆菌。本发明还公开了上述重组大肠杆菌的构建方法。利用上述重组大肠杆菌制备(S)－4－氯－3－羟基丁酸乙酯的方法：以4－氯乙酰乙酸乙酯为底物，以葡萄糖为辅助底物，以氧化型辅酶II为辅因子，由上述重组大肠杆菌进行转化反应得到(S)－4－氯－3－羟基丁酸乙酯。本发明构建的重组大肠杆菌中PsCR酶活为18U/mg，BmGDH酶活为9U/mg，避免了添加昂贵的纯酶GDH和辅酶NADPH，只需添加辅酶NADP便可以使得辅酶NADPH高效再生，大大降低了生产成本。
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公开(公告)号：CN101962661B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN201010213724.6
申请日：2010-06-29
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12P7/62
Abstract: 本发明公开了一种氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的羰酰还原酶在4-氯乙酰乙酸乙酯不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中的应用。即以氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的羰酰还原酶为催化剂，以4-氯乙酰乙酸乙酯为底物，以NADH为辅因子，不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯。本发明首次将氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的羰酰还原酶应用于4-氯乙酰乙酸乙酯不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中，取得很好的效果，其酶活高达15U/mg，其对底物的得率高达91％，产物的对映体过量值为100％，且产量高，大大降低了生产成本。
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公开(公告)号：CN101724670B
公开(公告)日：2012-02-01
申请号：CN200910234232.2
申请日：2009-11-17
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种尿苷磷酰类化合物联产手性羟基酯的方法，该方法以乳清酸和β-酮酯类化合物为底物，以葡萄糖为能量供体，利用有透性的酵母细胞同时制备尿苷磷酰类化合物与手性羟基酯。本发明运用全细胞催化和代谢工程的原理，通过建立代谢网络模型和代谢流量分析，利用有透性的酵母细胞联产尿苷磷酰类化合物和手性羟基酯，得率增高、生产成本降低、合成时间缩短、底物利用率大幅提高。
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公开(公告)号：CN101724670A
公开(公告)日：2010-06-09
申请号：CN200910234232.2
申请日：2009-11-17
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种尿苷磷酰类化合物联产手性羟基酯的方法，该方法以乳清酸和β-酮酯类化合物为底物，以葡萄糖为能量供体，利用有透性的酵母细胞同时制备尿苷磷酰类化合物与手性羟基酯。本发明运用全细胞催化和代谢工程的原理，通过建立代谢网络模型和代谢流量分析，利用有透性的酵母细胞联产尿苷磷酰类化合物和手性羟基酯，得率增高、生产成本降低、合成时间缩短、底物利用率大幅提高。
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公开(公告)号：CN101372699A
公开(公告)日：2009-02-25
申请号：CN200810124754.2
申请日：2008-09-02
Applicant: 南京工业大学
CPC classification number: C12P7/42 , C12N9/0004
Abstract: 本发明公开了一种氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的羰酰还原酶在4－氯乙酰乙酸乙酯不对称还原制备(S)－4－氯－3羟基丁酸乙酯中的应用。即以氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的羰酰还原酶为催化剂，以4－氯乙酰乙酸乙酯为底物，以NADPH为辅因子，不对称还原制备(S)－4－氯－3羟基丁酸乙酯。本发明首次将氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的羰酰还原酶应用于4－氯乙酰乙酸乙酯不对称还原制备(S)－4－氯－3羟基丁酸乙酯中，取得很好的效果，其对底物的得率高达95％、产物的对映体过量值为100％，且产量高，大大降低了生产成本。
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