公开(公告)号：CN102321655B

公开(公告)日：2013-08-28

申请号：CN201110259942.8

申请日：2011-09-05

Applicant: 西北农林科技大学 ,  杨凌科元克隆股份有限公司

Inventor： 张涌 ,  余源 ,  郭泽坤 ,  王勇胜 ,  田进海 ,  胡广东 ,  苏峰 ,  刘军

IPC: C12N15/63

Abstract: 本发明公开了一种基于假attP位点整合的通用型表达载体及其构建方法和应用，该表达载体包括attB序列、pUC ori和多克隆位点MCS，CMV组成型启动子与attB序列相连接，CMV组成型启动子下游插入两个同向的LoxP元件，在LoxP元件下游设有第一荧光指示蛋白开放阅读框及其终止子，在两个LoxP元件之间设有第二荧光指示蛋白开放阅读框及其终止子和抗生素表达元件。该载体可应用于筛选稳定表达荧光标记蛋白的无抗生素筛选标记的重组细胞。

公开(公告)号：CN102807993A

公开(公告)日：2012-12-05

申请号：CN201210319587.3

申请日：2012-08-31

Applicant: 西北农林科技大学 ,  杨凌科元克隆股份有限公司

Inventor： 郑艳玲 ,  张涌 ,  权富生 ,  王勇胜 ,  刘军

IPC: C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12N15/873

Abstract: 本发明公开了一种骨骼肌特异性的靶向Myostatin基因的miRNA表达载体及重组细胞，首先构建含有靶向Myostatin基因的pre-miRNA和MYL1基因启动子的骨骼肌特异性miRNA表达载体pmiR-MNM2，然后通过电转染法将外源性表达载体pmiR-MNM2导入红安格斯新生牛成纤维细胞并经G418筛选获得阳性细胞，进行PCR鉴定，证实目的基因整合到牛胎儿成纤维细胞的基因组；将转染pmiR-MNM2的牛胎儿成纤维细胞作为核供体移入牛去核卵母细胞，获得转基因克隆胚，将这些胚胎移入受体牛的子宫，为生产具有双肌性状的红安格斯克隆牛奠定了坚实的基础。

公开(公告)号：CN102206611B

公开(公告)日：2012-10-17

申请号：CN201110107432.9

申请日：2011-04-27

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 郑月茂 ,  贺小英 ,  刘军 ,  郑艳玲 ,  赵晓娥 ,  张涌

IPC: C12N5/0797

Abstract: 本发明公开了一种羊水源性神经干细胞的分离培养方法，首先分离到羊水细胞，然后再在羊水细胞中添加分离培养基，分离得到的神经干细胞生长形成神经球，将其消化分离为单细胞后进行传代培养。本发明提供的羊水源性神经干细胞的分离培养方法，开辟了分离培养神经干细胞的新途径，应用本发明方法从羊水中分离培养神经干细胞成功率高。所分离到的羊水源性神经干细胞在体外诱导后分化为星形胶质细胞和神经元细胞等功能细胞；所分离到的羊水源性神经干细胞具有可行性和有效性，具有自我更新、增殖和分化潜能。

公开(公告)号：CN102426126A

公开(公告)日：2012-04-25

申请号：CN201110251106.5

申请日：2011-08-29

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 苏建民 ,  张涌 ,  刘军

IPC: G01N1/30

Abstract: 本发明公开了一种牛囊胚内细胞团细胞和滋养层细胞的差异染色方法，包括以下步骤：1)利用免疫染色方法，以抗CDX2单克隆抗体作为一抗，将其与特异表达在牛囊胚滋养层细胞的CDX2分子进行免疫结合；2)利用免疫染色方法，以红色荧光标记的能够与抗CDX2单克隆抗体结合的抗体作为二抗，对清洗后的结合有一抗的牛囊胚进行免疫染色；3)在免疫染色完成后，对牛囊胚进行整体的细胞核荧光染色，以形成差异染色。本发明在CDX2蛋白在滋养层细胞内特异性表达，而在内细胞团细胞上不表达的基础上，这样利用基于CDX2分子的红色免疫染色和DAPI细胞核蓝色染色来进行差异染色，准确率为100％，而且图片清晰漂亮。

公开(公告)号：CN102086475A

公开(公告)日：2011-06-08

申请号：CN201010592751.9

申请日：2010-12-13

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 华松 ,  张涌 ,  张辉 ,  王勇胜 ,  刘军 ,  权富生 ,  鲁成龙

IPC: C12Q1/68

Abstract: 一种目的基因的漂移处理检测方法，包括收集转基因细胞培养液、核移植操作液和胚胎培养液等可能含有外源基因的液体，对其进行高压处理，然后对液体进行浓缩；针对外源基因的基因序列设计引物，通过PCR技术，特异性扩增外源基因的DNA片段，根据PCR扩增结果，判断在转基因细胞筛选过程中以及胚胎生产和培养过程中所产生的液体经处理后是否还有外源基因的存在。本发明这种处理检测方法完全可以避免外源基因的漂移，保证了转基因动物生产过程中的环境安全。适用于来源于人的防御素-3基因的转基因奶牛和山羊的生产过程中的基因漂移的检测。

公开(公告)号：CN202022941U

公开(公告)日：2011-11-02

申请号：CN201020631949.9

申请日：2010-11-25

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 华松 ,  刘军 ,  王勇胜 ,  张涌 ,  权富生

IPC: C12M3/00

Abstract: 一种动物卵母细胞成熟培养皿，包括一凹底皿本体，还包括一与该凹底皿本体匹配的底座，凹底皿本体的凹底内嵌于底座，并固定于底座上。本实用新型操作简单，有底座支撑凹底皿本体，就不需要手来固定，稳定性好；特别适合用于实验室动物卵母细胞放的成熟培养。

公开(公告)号：CN214507831U

公开(公告)日：2021-10-29

申请号：CN202120370624.8

申请日：2021-02-11

Applicant: 西北农林科技大学 ,  北京光辉财智管理咨询有限公司 ,  郓城县工力有限公司

Inventor： 王东 ,  田文升 ,  林祥 ,  黄启娟 ,  刘军 ,  王晓 ,  王会

IPC: A01B49/06

Abstract: 本实用新型涉及一种联合精密播种机，属于农业机械与智能装备领域。它包括悬挂机架，悬挂机架下方由前向后依次设置有反曲剁刀、旋耕刀、深松铲、施肥机构、镇压器，镇压器的后面依次设置有排种机构、镇压轮和耱；其中，悬挂机架上设置有刀库安装架，所述的装有反曲剁刀的反曲剁刀刀库和装有旋耕刀的旋耕刀刀库分别通过各自的轴安装在刀库安装架的下端，反曲剁刀刀库或旋耕刀刀库的轴外设置有三棱切刀。本实用新型通过农机农艺融合创新设计，一次作业可依次完成灭茬切土、旋耕整地、深松破底、精准施肥、平地压实、圆盘开沟、精密布种、覆土镇压、耱耢保墒等工序流程，从而达到精细耕作、精准施肥和精密播种的效果。

公开(公告)号：CN215269387U

公开(公告)日：2021-12-24

申请号：CN202120370626.7

申请日：2021-02-11

Applicant: 西北农林科技大学 ,  北京光辉财智管理咨询有限公司 ,  郓城县工力有限公司

Inventor： 王东 ,  田文升 ,  林祥 ,  黄启娟 ,  刘军 ,  王晓 ,  王会

IPC: A01B49/06

Abstract: 本发明涉及一种精细耕作精准施肥一沟多行单粒精密点播机，属于农业机械与装备领域。它包括悬挂机架，悬挂机架下方由前向后依次设置有反曲剁刀、旋耕刀、深松铲、施肥机构、平面镇压器，平面镇压器的后方依次设置有排种机构、镇压轮和耱；悬挂机架上设置有前后两组排种机构和圆盘开沟器设置，每个排种机构的布种口位于对应的圆盘开沟器的两个圆盘之间；两组排种机构中，相邻的两个排种机构交错分布，两组排种机构与同一动力机构连接。本发明功能多、并能实现精细耕作、精准施肥、精密布种，大幅度提高种子分布均匀度，优化了种苗的空间布局，使群体结构合理、个体发育健壮。