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公开(公告)号：CN115896175A
公开(公告)日：2023-04-04
申请号：CN202211650762.7
申请日：2022-12-21
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/85 , C12N9/00 , C12N15/52 , C12N15/12 , C07K14/465
Abstract: 本发明属于禽类生殖技术领域，特别是涉及基因C2EIP在促进PGCs形成中的应用和C2EIP蛋白介导的泛素化E3连接酶复合体。本发明提供了基因C2EIP在促进鸡原始生殖细胞形成中的应用，基因C2EIP表达得到的蛋白以及C2EIP蛋白介导的泛素化E3连接酶复合体在调控鸡原始生殖细胞形成过程中的应用。本发明提供的应用能够有效的提高体外鸡原始生殖细胞的形成效率，扩大鸡原始生殖细胞的形成数量，解决原始生殖细胞数量不足的问题，为进一步实现鸡原始生殖细胞在物种资源保护领域的应用提供细胞材料。
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公开(公告)号：CN115885975A
公开(公告)日：2023-04-04
申请号：CN202211589326.3
申请日：2022-12-12
Applicant: 扬州大学
Abstract: 一种高效的鸡胚组织块冻存复苏的方法，属于生物技术领域。本发明在鸡胚中分离组织块，加入组织块冷冻保护液后进行冻存，复苏组织块后游离出鸡成纤维细胞；本发明为稀缺物种（如地方畜禽品种）的细胞建库以进行大规模组织块冻存以及种质资源保存提供依据。
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公开(公告)号：CN115747140A
公开(公告)日：2023-03-07
申请号：CN202211487333.2
申请日：2022-11-25
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/0735
Abstract: 一种诱导鸡胚胎干细胞分化生成原始生殖细胞的方法，属于生物技术领域。其特征是，鸡胚胎干细胞分离培养后，采用诱导培养基，至诱导分化后，收集细胞。本发明提供的方法和诱导培养基可以将鸡胚胎干细胞诱导分化为原始生殖细胞，质量稳定，安全性高，为研究鸡胚原始生殖细胞的发生机制提供理论基础，为组织工程、药物开发和细胞治疗提供大量的细胞来源，为基因修饰、基因打靶、基因敲除、基因转染及生产转基因动物奠定实验基础。
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公开(公告)号：CN111893091B
公开(公告)日：2022-10-28
申请号：CN202010861186.5
申请日：2020-08-25
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种诱导大鼠极小胚胎干细胞分化为心肌细胞的方法，包括以下步骤：（1）、通过流式细胞仪分选获得大鼠骨髓中CD45−Lin−CD106+细胞(极小胚胎干细胞)；（2）、5‑氮杂胞苷诱导极小胚胎干细胞分化；（3）、通过qRT‑PCR，免疫荧光检测心肌蛋白相关基因，验证5‑氮杂胞苷诱导极小胚胎干细胞分化过程。通过本发明，旨在从大鼠骨髓组织中分离培养出极小胚胎干细胞，并采用5‑氮杂胞苷诱导分化，观察其生物学特性及定向分化特征，以期为临床缓慢性心律失常的细胞移植治疗寻找一种方便、快速的途径。验证结果合理准确，实验过程严密周谨。
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公开(公告)号：CN112877332A
公开(公告)日：2021-06-01
申请号：CN202110283164.X
申请日：2021-03-16
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/66 , C12N15/65 , C12Q1/66
Abstract: 本发明提供一种由双荧光素酶报告基因检测鸡RIPK2启动子活性的方法，包括以下步骤：步骤1）、鸡RIPK2基因启动子全长的克隆；步骤2）、鸡RIPK2启动子区系列缺失片段报告质粒的构建和鉴定；步骤3）、鸡RIPK2启动子活性定性分析；步骤4）、双荧光素酶报告基因检测鸡质粒RIPK2启动子的活性；步骤5）、鸡RIPK2核心启动子区的确定；步骤6）、鸡RIPK2核心启动子区转录因子的筛选；利用软件TRANSFAC和AliBaba 2.1对鸡RIPK2启动子区转录因子结合位点进行预测分析。通过本发明，便于对鸡RIPK2基因启动子的调控方式及调控元件进行研究。具有灵敏度高、准确性强、检测迅速、费用较低等特点，避免了转染效率对结果的影响。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112725467A
公开(公告)日：2021-04-30
申请号：CN202110232856.1
申请日：2021-03-03
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及一种与抗禽致病性大肠杆菌相关的NLR信号通路及其应用，提供一种与抗禽致病性大肠杆菌相关的遗传标记，所述遗传标记为NLR信号通路。同时提供检测本发明第一方面所述的遗传标记的试剂在制备用于鉴定待测鸡抗禽致病性大肠杆菌的试剂盒的应用。以及提供一种用于鉴定抗禽致病性大肠杆菌的试剂盒，提供一种筛选抗禽致病性大肠杆菌的商品肉鸡的方法。通过本发明。利用与禽致病性大肠杆菌相关的标记基因进行标记辅助选择，能够有效提供家禽免疫能力。提供了NLR信号通路基因的序列及鉴定方法，通过通路基因的引物，可利用Sanger测序法建立高效准确快速的分子标记辅助育种技术，使免疫力提高，可在早期进行选育，降低育种成本，提高生产效益。
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公开(公告)号：CN111763691A
公开(公告)日：2020-10-13
申请号：CN202010684844.8
申请日：2020-07-16
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/867
Abstract: 本发明涉及一种新的慢病毒载体导入鸡胚的方法，包括以下步骤：（1）对孵化48-58h的早期胚蛋（13-17 HH）取出后在无菌条件下使用镊子轻轻敲击蛋壳钝端开口，找到胚胎位置后，使用眼科镊轻轻剥去胚胎上层覆盖的外壳膜，露出胚胎；（2）将导入的慢病毒载体使用细胞培养基或细胞缓冲液稀释到固定滴度，对准暴露出的胚胎轻轻滴加，使慢病毒溶液覆盖胚胎；（3）滴加结束后加入200ul青链霉素至注射部位，然后使用医用胶带封口，完成慢病毒载体导入鸡胚。封口严实后继续放入孵化箱，根据下一步要求在不同阶段取出检测。通过本发明，可用于鸡胚外源基因导入、外源基因敲低或敲除和转基因鸡等生产研究。
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公开(公告)号：CN110283894A
公开(公告)日：2019-09-27
申请号：CN201910563547.5
申请日：2019-06-26
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6869 , A01K67/027
Abstract: 本发明涉及一种通过羽色结合分子遗传标记鉴别PGC移植后代鸡的鉴定方法，属于生物技术领域。为了解决PGC移植后代的鉴别问题，本发明采用后代鸡羽色和微卫星标记分析的方法成功对后代鸡的遗传来源进行鉴别。本发明适用于禽类的种质资源的保护和物种复原，本发明可行性强，鉴定准确，成本低。能够有效鉴别后代鸡的遗传组成，为基因编辑模型鸡生产提供技术支持。
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公开(公告)号：CN110205299A
公开(公告)日：2019-09-06
申请号：CN201910514421.9
申请日：2019-06-14
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/10
Abstract: 本发明涉及一种新型鸡CEF重编程为PGC的诱导体系的建立方法，属于生物技术领域。在分离的原代CEF中，慢病毒外源导入OCT4,SOX2,NANOG,LIN28重编程因子，连续培养21天后，利用SSEA-1抗体进行iPSC细胞株鉴定，鉴定为阳性的细胞株进行更换为BMP4/BMP8b/EGF诱导体系，诱导成为iPGC。本发明解决了濒危品种鸡PGC获取的数量低的问题，实现了濒危鸡品种的种质资源保护和物种复原工作。
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公开(公告)号：CN107723313A
公开(公告)日：2018-02-23
申请号：CN201711031012.0
申请日：2017-10-30
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/89
CPC classification number: C12N15/89
Abstract: 本发明公开了一种外源物质导入鸡胚的方法，属于生物技术领域，具体包括如下步骤：（1）对孵育48-58h的13-17 HH早期胚蛋在无菌条件下开口，找到胚胎位置，剥去胚蛋外壳膜，露出胚胎血管；（2）将需要导入的外源物质注入到玻璃注射针中，通过显微注射仪注射到鸡胚血管中；（3）注射后加入青链霉素至注射部位，然后使用医用胶带封口。本发明旨在鸡胚早期（13-17 HH）通过血管注射导入外源物质，为鸡胚注射的广泛应用奠定基础。本方法适用于鸡胚外源基因或细胞导入，转基因鸡和嵌合体制备，操作简便快速，外源物质导入效率高。
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