公开(公告)号：CN107447015B

公开(公告)日：2020-11-20

申请号：CN201710787170.2

申请日：2017-09-04

Applicant: 中国计量科学研究院

Inventor： 董莲华 ,  王晶 ,  傅博强 ,  唐治玉

IPC: C12Q1/6806 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q1/10 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种Illumina平台高通量测序文库定量标准物质的制备方法，将大肠杆菌基因组DNA经过超声波片断化，通过末端修复和接头连接，磁珠选择回收后可获得文库定量标准物质，再通过建立的染料数字PCR方法进行量值的确定。本发明提供了标准物质的制备方法，采用片段化的大肠杆菌基因组DNA作为文库定量标准物质，可以更好的模拟实际检测中样本的文库构建。本标准物质的定值方法准确度高，不依赖于DNA标准品，测量结果可溯源至个数，从而保证测量结果的可靠和可溯源。本标准物质可作为测量标准用于illumina平台高通量测序文库DNA的准确定量。

公开(公告)号：CN105372195B

公开(公告)日：2018-02-13

申请号：CN201510765935.3

申请日：2015-11-11

Applicant: 中国计量科学研究院

Inventor： 高运华 ,  盛灵慧 ,  隋志伟 ,  武利庆 ,  董莲华 ,  崔伟群

IPC: G01N21/33

Abstract: 本发明提供了一种微量紫外分光光度计质量检测方法和检测试剂盒。本发明首次采用系列鲑鱼精DNA标准物质对微量紫外分光光度计进行质量检验。其优点是灵敏度高，可检测低至10.7ng的DNA；线性范围广：可检测0ng/μL～2163ng/μL的DNA，跨越4个数量级；涵盖了市场上现有微量紫外分光光度计的测量范围；鲑鱼精DNA标准物质用紫外分光光度计国家标准装置验证证实准确度高。本发明解决了微量紫外分光光度计因仅有检测窗口、不能放入比色杯、波长不可调等限制，无法按照现有的分光光度计检定国家标准进行校准的问题。

公开(公告)号：CN107365868A

公开(公告)日：2017-11-21

申请号：CN201710787571.8

申请日：2017-09-04

Applicant: 中国计量科学研究院

Inventor： 董莲华 ,  王晶 ,  王尚君 ,  傅博强 ,  唐治玉

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/6851 ,  C12Q2545/113 ,  C12Q2531/113

Abstract: 本发明公开了一种BRAF基因和EGFR突变检测定量标准品及其制备方法和定值方法，该方法分别构建含有BRAF基因V600E、EGFR基因T790M、L858R和缺失突变E746_A750del突变位点的质粒，以质粒为模板进行PCR扩增，获得PCR产物经过Sanger测序验证后，与经过超声波片断化的野生型人基因组DNA通过天平称量按照一定比例进行混合，可获得BRAF基因V600E突变和EGFR基因T790M、L858R和缺失突变E746_A750del突变的定量标准品。本发明提供了定量标准品的制备方法，采用片段化的野生型人基因组DNA作为背景DNA，可以更好的模拟实际检测游离DNA样本的背景。本定量标准品的定值方法精密度好，准确度高，不依赖于DNA标准品，测量结果可溯源至国际基本单位(质量)，从而保证测量结果的可靠和可溯源。

公开(公告)号：CN105255997A

公开(公告)日：2016-01-20

申请号：CN201510201658.3

申请日：2012-04-10

Applicant: 中国计量科学研究院

Inventor： 王晶 ,  隋志伟 ,  李亮 ,  余笑波 ,  臧超 ,  董莲华

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/6806 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q2537/165 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2545/101

Abstract: 本发明涉及一种转基因生物定量检测中修正偏差的方法。本发明建立了一种校正偏差的方法，通过测算转基因与受体非转基因生物的核酸提取效率的比值，用此比值作为校正系数，可得到转基因成分的真实准确含量。

公开(公告)号：CN103063783B

公开(公告)日：2014-05-07

申请号：CN201210541174.X

申请日：2012-12-13

Applicant: 中国计量科学研究院

Inventor： 董莲华 ,  孟盈 ,  王晶 ,  傅博强 ,  高运华 ,  张玲

IPC: G01N30/06 ,  G01N30/02

Abstract: 本发明首次建立了一种质粒DNA定量检测用标准品的制备方法，将质粒DNA经超声波处理成为长度为200bp以下的片段后，进行酶解，然后以核苷酸标准品和同位素标记的核苷酸作为内标，用高效液相色谱-质谱分离单核苷酸并准确定量。本发明提供了超声波处理质粒DNA的优选条件和高效液相色谱法分离四种核苷酸的条件。本方法精密度好，准确度高：采用核苷酸标准品，不依赖于DNA标准品，因此测量结果可溯源至核苷酸有证标准物质，从而保证测量结果的可靠和可溯源。由于用本方法可对质粒DNA进行绝对定量，可用于质粒DNA定量检测用标准品的制备。