一种用于检测突变核酸的微滴式数字检测方法

    公开(公告)号:CN113151416A

    公开(公告)日:2021-07-23

    申请号:CN202110640942.6

    申请日:2021-06-09

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明提供一种用于检测突变核酸的微滴式数字检测方法,所述方法包括以下步骤:(1)根据目的突变核酸制备环介导等温扩增反应所需的混合物;(2)将步骤(1)获得的反应混合物作为分散相,将油相作为连续相,分别注入微流控芯片生成单分散的液滴;(3)将步骤(2)所述的微流控芯片置于恒定温度下进行扩增反应;(4)对步骤(3)所述反应后的微流控芯片中的液滴进行荧光信号检测及分析。本发明的方法不需要复杂的芯片、可控的温控设备等成本较高的设备即可完成,为基因诊断和基因治疗提供了一种工艺简单、信号稳定、具有较高的灵敏度与准确性的突变核酸数字分析手段。

    基于表面活性剂修饰连接鞘糖脂的复合纳米材料定量检测病毒及酶的生物传感方法

    公开(公告)号:CN102661927A

    公开(公告)日:2012-09-12

    申请号:CN201210116143.X

    申请日:2012-04-19

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明公开了一种定量分析霍乱毒素的生物传感方法,制备了拉曼染料修饰的磷脂双分子层膜包裹的金纳米颗粒探针,选用功能化磷脂,即头端修饰巯基的磷脂,它能共价结合在金纳米颗粒表面,使金纳米颗粒探针的稳定性得到了提高。霍乱毒素B亚单元(CTB)与多个受体GM1分子特异性结合,导致包裹有GM1分子的金纳米颗粒团聚,表面等离子体发生耦合作用,实现了高灵敏的SERS检测。同时,该方法会产生光吸收性质的变化,也可以通过比色法进行检测。操作步骤简单、快速,不需要对底物进行任何标记,成本低,灵敏度高,特异性好,有望成为有用的检测与鉴定霍乱毒素的技术手段,对于食品安全监测以及控制和预防食源性疾病具有重要的意义。

    基于双层磷脂膜修饰石墨烯的复合纳米材料定量检测磷脂酶的生物传感方法

    公开(公告)号:CN102636467A

    公开(公告)日:2012-08-15

    申请号:CN201210116209.5

    申请日:2012-04-19

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于双层磷脂膜修饰石墨烯的复合纳米材料定量检测磷脂酶的生物传感方法。本发明在石墨烯表面的磷脂分子中混合一种磷脂末端交联荧光基团fluorescein的磷脂衍生分子FL-DHPE,利用磷脂分子的两性结构,通过非共轭交联,包覆在石墨烯表面,构建出一种水溶性石墨烯复合纳米材料,并根据荧光能量转移原理,借助石墨烯的荧光淬灭性能,利用磷脂分子是磷脂酶水解底物的特征,实现了磷脂酶的定量检测,检测过程只需一步,操作简便、反应快速,成本低廉,且灵敏度高于传统方法成百上千倍,对于进一步掌控磷脂酶相关的生物体重要生命活动如细胞增殖,细胞信号传导,细胞分化以及炎症、肿瘤疾病等有着巨大的推动作用。

    基于纳米颗粒团聚的DNA去甲基化酶的生物传感方法

    公开(公告)号:CN102586463A

    公开(公告)日:2012-07-18

    申请号:CN201210073843.5

    申请日:2012-03-20

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于纳米颗粒团聚的DNA去甲基化酶的生物传感方法。制备了核酸功能化的纳米颗粒探针,特定的核酸序列中包含了限制性内切酶的切割位点并进行了甲基化处理,激活的DNA去甲基化酶使甲基化的DNA发生去甲基化作用,从而对甲基化敏感的限制性内切酶和核酸外切酶同时消化降解DNA,导致纳米颗粒团聚,产生耦合增强,实现了高灵敏度的SERS检测。同时,该方法会产生光吸收性质的变化,也可以通过比色法进行检测。操作步骤简单、快速,灵敏度高、特异性强,有望成为研究全基因组范围内的DNA去甲基化问题以及表观遗传重编排过程的新方法之一,对于生物大分子的功能研究、活性分析和抑制剂考察也提供了技术手段。

    基于通用PCR扩增进行生物编码的多组分色谱单核苷酸多态性检测方法

    公开(公告)号:CN102586462A

    公开(公告)日:2012-07-18

    申请号:CN201210073842.0

    申请日:2012-03-20

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于通用PCR扩增进行生物编码的多组分色谱单核苷酸多态性检测方法,它包括等位特异性连接酶链反应,通用PCR扩增反应,限制性内切酶消化反应以及利用液相色谱对目标基因型特异性的生物编码长度荧光标记核酸片段的多组分定量检测。本发明利用等位特异性连接酶链反应产生与目标基因型匹配的连接产物,经通用PCR扩增反应产生连接产物的荧光标记扩增产物,通过限制性内切酶消化反应将扩增产物转化为目标基因型特异性的长度编码荧光标记核酸片段,利用液相色谱实施核酸片段多组分定量检测。该方法样品用量少、操作简便、成本较低,且可进行多组分同时测定,可望为人群筛查、产前的生物学研究提供一个通用的技术平台。

    基于限制性内切酶FokI抑制分析检测小分子与结合蛋白相互作用的荧光生物传感方法

    公开(公告)号:CN101717824A

    公开(公告)日:2010-06-02

    申请号:CN200910227024.X

    申请日:2009-11-25

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明为一种基于限制性内切酶抑制分析检测小分子与结合蛋白相互作用的荧光生物传感方法,包括中间有机小分子修饰的寡核苷酸DNA链与蛋白的相互作用、限制性内切酶FokI二聚体形成条件及抑制位点选择、基于Taqman探针的实时荧光定量检测技术。它利用寡核苷酸DNA链中间修饰的小分子和其结合蛋白或抗体的特异性结合,基于小分子与蛋白或抗体相互作用对限制性内切酶FokI酶切的抑制作用,通过对被酶切的Taqman探针荧光实时定量分析来检测小分子与蛋白相互作用及小分子或其结合蛋白。该方法灵敏度高、操作简便、特异性强,可用于生物医学中信号转导与分子调控机理研究、食品与农产品安全检测、环境毒物检测、药物筛选等。

Patent Agency Ranking