-
公开(公告)号：CN110923297A
公开(公告)日：2020-03-27
申请号：CN201911020889.9
申请日：2019-10-25
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12Q1/6851 , C12Q1/6816
Abstract: 本发明公开了一种检测猪基因组脱靶整合风险的方法。本发明即是通过改进技术条件得到一种能够检测猪基因组目标基因脱靶整合的方法(简称QPS法)，包括目标基因在猪基因组内源基因座定位整合检测、改进的Q-PCR法检测基因整合拷贝数、Southern blot杂交分型检测目的基因在猪基因组中整合状况，评价目的基因脱靶整合风险。该发明能够及时改进实验条件得到无目标基因脱靶整合细胞系，在优化实验条件下用体细胞克隆或显微注射法制备转基因猪，得到的转基因阳性猪不会产生目标基因脱靶整合风险。提高转基因猪育种质量，能够加快转基因猪商品化生产进程。
-
公开(公告)号：CN107603983B
公开(公告)日：2020-02-18
申请号：CN201710796222.2
申请日：2017-09-06
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/12 , C12N15/113 , C12N15/90 , C12N15/89
Abstract: 本发明公开了一种小鼠RBM10基因编辑位点及其应用，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，以pDR274载体为骨架构建插入有小鼠RBM10基因编辑靶位点T1、T2的Cas9 gRNA表达载体，可高效敲除小鼠RBM10基因的编辑位点T1、T2。这两个编辑位点可用于Cas9介导的小鼠RBM10基因打靶，制备RBM10基因修饰小鼠本发明鉴定小鼠RBM10基因的高效编辑位点，并分析其打靶效率，为构建RBM10基因内源性敲除或定点敲入外源基因的转基因小鼠提供新途径。
-
公开(公告)号：CN106754949B
公开(公告)日：2019-09-10
申请号：CN201710076191.3
申请日：2017-02-13
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明公开了猪基因组中猪肌抑素基因编辑位点864‑883及其应用，属生物工程领域。本发明从猪肌抑素基因编码区中分离出1个基因编辑靶位点，其序列为5’‑GGATTTTGAAGCTTTTGGATGGG‑3’，位于MSTN编码区3号外显子。该位点能被Cas9核酸内切酶特异性识别，从而介导双链断裂，然后和打靶载体发生同源重组，将突变基因或选择性标记基因等整合至受体细胞基因组的预定位点。统计结果表明，该位点打靶效率为86.7%。本发明提供的猪肌抑素基因编辑位点，为对该基因进行精确编辑提供了有效的靶标，为研制高瘦肉率的生猪新品种提供了新策略，也为探明肌抑素的分子机制和信号通路提供了可靠的手段和素材。
-
公开(公告)号：CN108004204A
公开(公告)日：2018-05-08
申请号：CN201810072343.7
申请日：2018-01-25
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N5/075
Abstract: 本发明提供了一种高通量筛选优质卵母细胞的方法，该方法首先通过成熟液Ⅰ和Ⅱ让卵母细胞在体外培养环境达到成熟，再通过脱卵丘溶液进行脱卵丘细胞，同时对卵母细胞的细胞膜结构的完整性进行初选，半透膜结构不完整的卵母细胞不会出现卵周隙，在此过程中可以淘汰一部分劣质卵母细胞；最后在等渗无激素溶液中复选，如果初选的卵母细胞的细胞膜不能恢复到脱卵丘溶液处理之前的状态，则这种卵母细胞也必须淘汰，从而可快速高通量筛选出优质卵母细胞，用于生产性克隆工作的开展。
-
公开(公告)号：CN106754949A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201710076191.3
申请日：2017-02-13
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明公开了猪基因组中猪肌抑素基因编辑位点864‑883及其应用，属生物工程领域。本发明从猪肌抑素基因编码区中分离出1个基因编辑靶位点，其序列为5’‑GGATTTTGAAGCTTTTGGATGGG‑3’，位于MSTN编码区3号外显子。该位点能被Cas9核酸内切酶特异性识别，从而介导双链断裂，然后和打靶载体发生同源重组，将突变基因或选择性标记基因等整合至受体细胞基因组的预定位点。统计结果表明，该位点打靶效率为86.7%。本发明提供的猪肌抑素基因编辑位点，为对该基因进行精确编辑提供了有效的靶标，为研制高瘦肉率的生猪新品种提供了新策略，也为探明肌抑素的分子机制和信号通路提供了可靠的手段和素材。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103382442B
公开(公告)日：2015-03-18
申请号：CN201310289740.7
申请日：2013-07-11
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12M1/42
Abstract: 本发明涉及克隆哺乳动物用的半固定半移动电融合电极，适于克隆哺乳动物中重构卵融合用。本发明通过转动调节柄调节移动电极的角度和移动电极把重构的细胞在固定电极和移动电极的前端之间进行微调，使重构的细胞排列方向垂直于固定电极以及移动电极的前端。本发明大大减少了克隆胚的体外操作时间并提高了其电融合效率，从而在电融合环节上提高了细胞核移植的成功率，而且操作简便快捷，电极的制作方便简单。
-
公开(公告)号：CN119570784A
公开(公告)日：2025-03-07
申请号：CN202411665414.6
申请日：2024-11-20
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种靶向敲除猪ATP11C基因的sgRNA、sgRNA组合物、载体及应用，属于生物技术领域。该sgRNA为sgRNA1、sgRNA2、sgRNA3、sgRNA4、sgRNA5、sgRNA6中的任一种。本发明针对猪ATP11C基因靶点，设计特异性靶向敲除猪ATP11C基因的sgRNA，从而高效、精准对猪ATP11C基因进行特异性敲除，并且得到稳定敲除ATP11C基因的猪肾成纤维细胞，并且，敲除ATP11C基因后显著抑制猪肾成纤维细胞的增殖，这为通过体细胞克隆技术生产具有相关疾病模型特征的克隆猪奠定了坚实基础，进而为与ATP11C相关的疾病治疗等研究提供了有利的实验材料。
-
公开(公告)号：CN119432850A
公开(公告)日：2025-02-14
申请号：CN202411532090.9
申请日：2024-10-30
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/12 , C12N5/10 , C12Q1/6888 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种利用CRISPR/Cas9系统敲除猪E4F1基因的方法，属于基因编辑技术领域；该方法利用特异性靶向猪E4F1基因的sgRNA组合物(一对sgRNA)，构建包含上述sgRNA的CRISPR/Cas9基因敲除载体，再利用上述载体进行猪E4F1基因敲除。本发明方法能够实现猪E4F1基因的高效率敲除，进而显著提高E4F1基因敲除细胞和E4F1基因敲除猪的构建效率，为猪E4F1基因的功能研究及其应用提供了有效方法和基础。
-
公开(公告)号：CN118240823A
公开(公告)日：2024-06-25
申请号：CN202410322073.6
申请日：2024-03-20
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 , 湖南楚沩香农牧股份有限公司
IPC: C12N15/113 , C12N15/11 , C12N15/85 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种用于敲除猪CD163、MSTN基因的sgRNA组合物、载体及其应用，属于生物医学技术领域。本发明通过分别对猪CD163、MSTN基因设计基因编辑双靶位点，该靶位点均能被Cas9核酸内切酶特异性识别，从而介导双链断裂，在自我修复系统的作用下通过非同源末端连接的方式使基因发生突变，然后设计sgRNA组合物，并且以tRNA‑sgRNA‑sgRNA scaffold为最小重复单元，利用PTG/Cas9策略构建Cas9‑CD163‑MSTN多顺反子载体，从而实现了高效、精准地敲除靶基因，因此，在猪种质改良中具有较好的应用前景。
-
公开(公告)号：CN117210506A
公开(公告)日：2023-12-12
申请号：CN202311173216.3
申请日：2023-09-12
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/87 , C12N15/113 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种小干扰RNA高效转染卵母细胞的方法，具体为：将卵母细胞置于纳米电穿孔缓冲液中进行电击，其中所述纳米电穿孔缓冲液为包括siRNA、纳米多肽的卵母细胞培养液。本发明方法保留了透明带，对卵母细胞后续发育潜能无影响，通过电穿孔和纳米多肽的协同作用，实现了较高的干扰效率，操作流程简单且时间短成本低。本发明建立的卵母细胞siRNA转染方法，极大地提高了生殖生物学和动物繁殖学相关领域研究人员的工作效率，减少对仪器和人员的依赖，减低成本，具有良好的应用前景。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
61
records
(took 0.029 seconds)
