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公开(公告)号：CN101830985A
公开(公告)日：2010-09-15
申请号：CN201010118499.8
申请日：2010-03-05
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C07K19/00 , C12N15/31 , C12N15/70 , A61K39/108 , A61P31/04 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及肠出血性大肠杆菌O157:H7转位紧密粘附素受体(Tir)与内膜素受体偶联细胞骨架蛋白(Tccp)重组蛋白的制备方法及应用，属于生物技术领域。取tir和tccp基因C端序列串联克隆，获得pGEM-T-tir-tccp重组质粒，构建重组质粒pGEX-4T-1-tir-tccp，转化入感受态细胞BL21(DE3)中，获得重组菌株，经IPTG诱导后获得高效表达。本发明制备的重组蛋白Tir-Tccp具有良好的免疫原性，可诱导机体产生高滴度的保护性抗体。Tir-Tccp可作为研制亚单位疫苗的候选多价融合蛋白，为预防和治疗肠出血性大肠杆菌O157:H7感染提供了技术平台和防控手段。
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公开(公告)号：CN104498623B
公开(公告)日：2017-02-22
申请号：CN201410696032.X
申请日：2014-11-26
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明涉及猪流行性腹泻病毒强毒株和弱毒株鉴别诊断用引物及其检测试剂盒，属于生物技术领域。以总RNA为模板，利用鉴别诊断猪流行性腹泻病毒强毒株和弱毒株的检测引物进行RT-PCR扩增，反应结束后根据扩增片段的数量和分子量大小判定结果。本发明的引物特异性好，检测方法快速简单，准确性高，为猪流行性腹泻病毒强毒株和弱毒株的鉴别诊断提供了保证。
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公开(公告)号：CN105420161A
公开(公告)日：2016-03-23
申请号：CN201510964760.9
申请日：2015-12-21
Applicant: 江苏省农业科学院
CPC classification number: C12N1/20 , A61K39/0208 , A61K2039/52 , A61K2039/543
Abstract: 本发明涉及一种猪胸膜肺炎放线杆菌外膜囊泡的制备方法及其疫苗，属生物技术领域。体外以铁离子限制的培养基培养猪胸膜肺炎放线杆菌shope菌株，经离心、0.22μm过滤处理后获取无细胞培养上清，继而超速离心制备出细菌释放的外膜囊泡，经过透射电镜观察可见大部分外膜囊泡直径50nm~100nm之间，以外膜囊泡作为亚单位疫苗二次鼻内免疫小鼠，外膜囊泡免疫小鼠长期增重及肺脏眼观形态与PBS免疫组无显著差异。同时实验表明外膜囊泡是一种高效免疫刺激物，不仅能够刺激小鼠血清产生高水平的IgG，而且在小鼠肺脏中产生高水平的IgA，有效的刺激了小鼠肺脏的黏膜免疫，显现出外膜囊泡作为亚单位疫苗较好的应用前景。
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公开(公告)号：CN103275912B
公开(公告)日：2016-03-02
申请号：CN201310099542.4
申请日：2013-03-10
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明涉及肠出血性大肠杆菌O157:H7多价fliC-hcpA-tir-eae重组菌及疫苗，属于生物制药领域。分别扩增出EHEC O157:H7的H7鞭毛(fliC)基因、菌毛(hcpA)基因、转位紧密素受体(tir)基因和紧密素(eae)基因，依次串联，克隆入表达载体pCold I中，获得重组质粒pCold-fliC-hcpA-tir-eae，在BL21(DE3)获得高效表达。经过高密度发酵和一系列的纯化程序获得高纯度的融合蛋白分子疫苗。该疫苗的制备工艺简捷、易于放大、重复性好，所获得目标蛋白纯度较高，动物试验证明可刺激机体在体液免疫、细胞免疫和粘膜免疫方面产生高效的免疫应答，免疫预防保护和治疗作用。
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公开(公告)号：CN103866035B
公开(公告)日：2015-08-19
申请号：CN201410132107.1
申请日：2014-04-02
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明涉及一种用于检测大肠杆菌O157:H7核苷酸片段的引物和探针序列，属于生物和食品检测技术领域。引物包括：由序列为gccaggcaaatatgtttgtga的上游引物pZF和序列为catttggcatttgaacgatgaa的下游引物pZR组成的引物对。探针pZP序列为cctggataccgctactcaaattctgtcaaaat。该套引物和探针根据GenBank上大肠杆菌O157:H7 EDL933（登录号：AE005174）设计，具有较高的灵敏度和特异性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103235121B
公开(公告)日：2015-08-05
申请号：CN201310087506.6
申请日：2013-03-18
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一种用于检测猪输血传播病毒2型（TTV2）抗体的间接ELISA试剂盒，属于生物技术领域。包括抗原重组蛋白的制备、间接ELISA的建立、判定标准及临床血清学检测的应用。所述的抗原重组蛋白是利用pcoldI原核表达载体，构建表达猪TTV2 ORF1截短蛋白的基因工程菌pcoldI-ORF1，并将表达的重组蛋白纯化作为抗原建立了间接ELISA检测方法。该方法用于检测猪血清中TTV2的抗体水平具有重复性好、特异性高的特点，可用于猪TTV2的血清学调查，为该病的防治和流行情况的掌握提供一种快速、简便的血清学检测方法。目前该方法是国内首次利用猪TTV2 ORF1重组蛋白建立检测猪群中TTV2抗体的ELISA检测方法。
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公开(公告)号：CN103865859A
公开(公告)日：2014-06-18
申请号：CN201410130127.5
申请日：2014-04-02
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C12N1/20 , A61K39/085 , A61P31/04 , C12R1/44
Abstract: 本发明提供一株松鼠葡萄球菌、疫苗及其制备方法，属生物技术领域。本发明提供松鼠葡萄球菌（Staphylococcussciuri）NJ1306，保藏号为CCTCC？NO:M2013702。试验证明松鼠葡萄球菌（Staphylococcussciuri）NJ1306对BALB/c小鼠和仔猪都有致病性。本发明还提供松鼠葡萄球菌灭活疫苗，含有灭活的NJ1306株。将灭活的松鼠葡萄球菌培养液和佐剂混合均匀，得到松鼠葡萄球菌灭活油乳剂疫苗。采用本发明松鼠葡萄球菌NJ1306制成的灭活油乳剂疫苗，可以对BALB/c小鼠提供很好的保护力，说明该菌株具有良好的免疫原性。
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公开(公告)号：CN102888471B
公开(公告)日：2014-02-12
申请号：CN201210436587.1
申请日：2012-11-06
Applicant: 江苏省农业科学院
Inventor： 温立斌 , 何孔旺 , 高晓静 , 王小敏 , 李彬 , 郭容利 , 俞正玉 , 茅爱华 , 倪艳秀 , 张雪寒 , 吕立新 , 周俊明 , 胡屹屹 , 汪伟 , 叶青 , 祝昊丹 , 于洋 , 沈江萍 , 周萍
Abstract: 本发明涉及一种利用SYBR Green I实时荧光定量PCR检测类猪圆环病毒P1的方法，属于分子生物学领域。本发明方法包括特异性引物的设计、标准质粒的构建、实时荧光定量PCR扩增方法的建立和优化、样本DNA提取及结果检测判定。本发明检测灵敏度高，稳定性高、特异性好，可以检测样本中类猪圆环病毒P1的含量，同时可以鉴别样本中猪圆环病毒2型的感染。
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公开(公告)号：CN103305626A
公开(公告)日：2013-09-18
申请号：CN201310284445.2
申请日：2013-07-08
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明涉及检测大肠杆菌致病血清型的引物及检测试剂盒，涉及食品和生物领域。是一种运用两对特异性引物检测样品中携带有志贺毒素和紧密素大肠杆菌的检测方法及试剂盒。其步骤为：根据志贺毒素2和紧密素以及它们的多个亚型基因序列设计引物，优化两对引物比例，组成PCR反应体系检测预混液；阳性对照模板；阴性对照模板；灭菌后的无菌离子水。本发明的二重PCR方法操作简便、特异，能够检测出大肠杆菌致病菌株。
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公开(公告)号：CN101830985B
公开(公告)日：2012-04-25
申请号：CN201010118499.8
申请日：2010-03-05
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C07K19/00 , C12N15/31 , C12N15/70 , A61K39/108 , A61P31/04 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及肠出血性大肠杆菌O157:H7转位紧密粘附素受体(Tir)与内膜素受体偶联细胞骨架蛋白(TccP)重组蛋白的制备方法及应用，属于生物技术领域。取tir和tccp基因C端序列串联克隆，获得pGEM-T-tir-tccp重组质粒，构建重组质粒pGEX-4T-1-tir-tccp，转化入感受态细胞BL21(DE3)中，获得重组菌株，经IPTG诱导后获得高效表达。本发明制备的重组蛋白Tir-TccP具有良好的免疫原性，可诱导机体产生高滴度的保护性抗体。Tir-TccP可作为研制亚单位疫苗的候选多价融合蛋白，为预防和治疗肠出血性大肠杆菌O157:H7感染提供了技术平台和防控手段。
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