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公开(公告)号:CN112553258A
公开(公告)日:2021-03-26
申请号:CN202110026484.7
申请日:2021-01-08
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/867 , C12N15/12 , C12N5/10 , A01K67/027
Abstract: 一种鸡成纤维细胞转分化为原始生殖细胞介导生产转基因鸡的方法,属于生物技术领域。通过OCT4,SOX2,NANOG,LIN28A诱导鸡CEF重编程为iPS;通过BMP4/BMP8b/EGF诱导鸡iPS分化为iPGC;鸡iPGC血管注射介导转基因鸡生产。本发明的实验方法不仅在家禽上种质资源保护过程中可行,在脊椎动物的其他研究领域也可应用。这一发明将为体外诱导的PGC‑like细胞介导后代鸡的生产研究提供更多的理论基础和技术支撑,也有利于对禽类种质资源进行保护和利用,同时也有利于转基因鸡的生产研究。
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公开(公告)号:CN111826430A
公开(公告)日:2020-10-27
申请号:CN202010724836.1
申请日:2020-07-24
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6876 , G16B25/10 , G16B30/00
Abstract: 一种研究鸡PGCs中lncRNA和组蛋白甲基化酶共调控靶基因的方法,属于生物技术领域。通过生物信息学分析将RNA-seq和CHIP-seq联合筛选出受lncRNA和组蛋白甲基化酶共同调控的靶基因,为研究PGCs形成的表观遗传和遗传机制网络提供参考。
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公开(公告)号:CN111778283A
公开(公告)日:2020-10-16
申请号:CN202010723202.4
申请日:2020-07-24
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/65 , C12Q1/6897
Abstract: 一种研究组蛋白乙酰化调节鸡LncRNA表达的方法,属于生物技术领域。通过对鸡LncPGCR的启动子克隆、核心调控区域选定、检测组蛋白乙酰化对鸡LncPGCR启动子活性的影响进行了探究,为进一步研究鸡LncPGCR的表达调控机制奠定基础。本发明的方法简单易行,思路清晰,操作可行性高,在普通研究室就能完成。实验者两个月就能完成。本发明将组蛋白乙酰化调节鸡LncRNA表达的研究扩展到家禽领域,并准确定位到鸡LncPGCR上,刷新了不同物种中组蛋白乙酰化调节LncRNA表达进而发挥功能的范畴。
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公开(公告)号:CN111763722A
公开(公告)日:2020-10-13
申请号:CN202010731512.0
申请日:2020-07-27
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6869 , C12Q1/6888 , C12N15/89
Abstract: 一种基因组测序鉴定PGCs介导后代生成的方法,属于生物技术领域。本发明的通过基因组测序鉴定PGCs介导后代生成的研究方法切实可靠,严谨准确,成效显著,为CEF转分化形成的PGC-like细胞介导产生的后代鸡的鉴定工作提供了一种新颖可行且高效的实验方法。
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公开(公告)号:CN110343752A
公开(公告)日:2019-10-18
申请号:CN201910593543.1
申请日:2019-07-03
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6869 , G01N33/68 , C12N15/867
Abstract: 本发明提供一种研究PGCs分化过程中Wnt信号与组蛋白联合作用于靶基因机制的方法,涉及生物技术领域,所述方法通过体内外实验验证组蛋白是否具有调控Wnt信号通路的靶基因的作用、分析在ESCs、PGCs和SSCs三个过程组蛋白是否在靶基因的启动子区差异性富集、检测组蛋白甲基化/去甲基化是否影响靶基因对Wnt信号的响应、检测组蛋白去甲基化修饰酶对β-Catenin与靶基因启动子结合位点的结合能力的影响;根据检测结果判断在PGCs分化过程中,Wnt信号联合组蛋白作用于靶基因的作用机制。利用本发明所述方法对PGCs形成过程中Wnt信号协同组蛋白作用于靶基因进行研究,有利于渗入了解PGCs形成的网络机制。
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公开(公告)号:CN109837238A
公开(公告)日:2019-06-04
申请号:CN201910165488.6
申请日:2019-03-05
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种鸡胚胎成纤维细胞单克隆细胞系建立的方法,属于生物技术领域。在注射管中塞入干净干燥的棉球,将针管式滤器的大头连接注射器的针口,将橡皮管一头连接针管式滤器的小头,另一头连接处理过后的玻璃管,用于直接挑取细胞。本发明中口吸管采用的材料均容易购买,且价格低廉。组装完成后,成品操作简单,使用者可以挑取特定单个细胞进行单克隆培养,所采用的重组口吸管适用于所有类型的细胞。
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公开(公告)号:CN105838667A
公开(公告)日:2016-08-10
申请号:CN201610252413.8
申请日:2016-04-21
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/0735 , C12N5/073 , C12Q1/68 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种新的TGF?β信号通路在如皋黄鸡雄性生殖细胞分化过程中功能验证方法:首先基于RNA?seq数据源进行关键信号通路富集并筛选;利用TGFβ受体抑制剂:LY2109762,BMP4受体抑制剂:LDN193189在体内和体外两个水平对TGF?β信号通路进行抑制以验证该通路在鸡雄性生殖细胞分化过程中的具体功能;设计LY2109762+BMP4,LDN193189+BMP4以及Double+BMP4实验组进行实验,实验过程中每个1d,取样一次。检测Smad2,Smad5的表达变化以及生殖标记基因的表达变化,利用间接免疫荧光和FACS检测各分组中细胞诱导后interginα6+interginβ1+细胞数量;采用鸡胚注射方式将抑制剂注射鸡胚,设计实验组:Y2109762,LDN193189以及Double组,孵化过程中于4d和18d取样,检测Smad2,Smad5的表达变化以及生殖标记基因的表达变化,利用组织免疫化学和FACS检测各分组中18d后睾丸中interginα6+interginβ1+细胞数量。
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公开(公告)号:CN117683705A
公开(公告)日:2024-03-12
申请号:CN202311756853.3
申请日:2023-12-20
Applicant: 扬州大学 , 江苏省家禽科学研究所
IPC: C12N5/0735
Abstract: 本发明公开一种鸡多能干细胞体外培养方法,属于畜牧学和生物技术领域;通过添加FGF2、IWR‑1和XAV‑93,并以STO细胞为饲养层,建立FIX培养体系,从鸡新鲜种蛋EGK.X期分离胚盘明区细胞,在FIX培养体系中,采用5%CO2、饱和湿度的37℃培养箱进行培养,每天更换培养液,每2‑3天传代一次,进行鸡多能干细胞PSCs体外培养;本发明提供的方法可以在短期内使鸡PSCs快速增殖,且维持其多能性和分化潜能;为研究鸡PSCs生物学特性提供了材料,为家禽的良种扩繁、基因修饰、家禽分子设计育种和种质资源冷冻保存等提供了新的方法、奠定了实验基础。
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公开(公告)号:CN116942357A
公开(公告)日:2023-10-27
申请号:CN202310951697.X
申请日:2023-07-31
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及基于内镜引导下的公鸡睾丸注射模型的建立方法和应用,包括以下步骤:将公鸡全身麻醉,术部选择最后肋骨的肋弓后缘与脊柱交界的凹陷处,术部消毒后,划开术部皮肤,直至腹腔,将内镜镜头操作鞘沿打开的切口深入腹腔,前斜式内镜插入操作鞘内并卡紧;打开膨宫加压器,使腹腔膨起,通过内镜显示器观察公鸡腹腔内结构,将内镜向脊柱侧缓慢移动,直至视野中出现睾丸组织;注射器在操作鞘上方与之平行方向进针,缓慢深入腹腔内;在内镜观察下,将注射器缓慢扎入公鸡睾丸内,边退针边推注。本发明方法采取新的手术通路,切口更小,对实验动物损伤小,成功率高,操作时间短,术后感染概率低,可提高动物术后的存活率。
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公开(公告)号:CN116656735A
公开(公告)日:2023-08-29
申请号:CN202310721034.9
申请日:2023-06-19
Applicant: 扬州大学 , 江苏省家禽科学研究所
IPC: C12N15/85 , C12N15/113 , C12N15/55 , C12N15/53
Abstract: 本发明提供了一种鸡CYP19A1基因可诱导敲除系统及其构建方法和应用,属于基因编辑技术领域。本发明的鸡CYP19A1基因可诱导敲除系统,包括TRE‑CAS9‑rtTA‑Puro载体和sgRNA‑sy004载体。本发明将由TRE‑CAS9‑rtTA‑Puro载体和sgRNA‑sy004载体组成的鸡CYP19A1基因可诱导敲除系统转染入待敲除细胞中,能够在Dox的作用下,诱导CAS9表达,以此控制鸡CYP19A1基因敲除程度,避免基因过度敲除,无法控制激素水平,影响鸡体存活。
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