一种表达BVDV-E0的重组牛肠道病毒的构建方法与初步应用

    公开(公告)号:CN110452889B

    公开(公告)日:2021-07-27

    申请号:CN201910654523.0

    申请日:2019-07-19

    Abstract: 本发明公开了一种表达BVDV‑E0的重组牛肠道病毒的构建方法及其初步应用,所述感染性克隆毒株是通过反向遗传操作的方法获得BEV BJ101毒株的全长cDNA克隆并获得拯救毒株rBEV后,将BVDV的E0序列插入到BEV全长cDNA中,获得可稳定表达外源基因E0的重组牛肠道病毒。所述rBEV‑E0重组病毒的初步应用,将分离纯化后的重组病毒免疫6~8周龄的SPF级别的Balb/c雌鼠,在不同时间点收集其血清样本进行检测,小鼠不但可以稳定表达E0蛋白,并能对其产生有效的免疫应答。本发明的重组病毒可同时用于BEV和BVDV的防控,也为其他外源基因提供了合适的的rBEV插入位点,为后续外源基因的插入、重组病毒的制备等研究提供有效的技术平台。

    犬干扰素-α6α7重组蛋白及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN108486127A

    公开(公告)日:2018-09-04

    申请号:CN201810103770.7

    申请日:2018-02-01

    Abstract: 本发明提供一种犬干扰素-α6α7重组蛋白及其制备方法与应用。所述犬干扰素-α6α7重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示,可按如下方法制备:对犬干扰素-α6基因、犬干扰素-α7基因分别进行密码子优化,将优化后的基因序列进行拼接,克隆至pPICZαA中构建重组表达质粒,转化毕赤酵母,制备重组菌,然后进行发酵、诱导表达、纯化,获得犬干扰素-α6α7重组蛋白。其可作为广谱抗病毒制剂,对犬瘟热、犬细小病毒病、犬副流感病毒病、犬传染性肝炎病毒感染的预防及治疗效果显著,为实现重组犬干扰素-α6、α7串联重组蛋白工艺化生产和进一步广谱性预防和治疗犬的病毒性疫病提供有效的技术手段。

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