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公开(公告)号:CN108484748A
公开(公告)日:2018-09-04
申请号:CN201810102803.6
申请日:2018-02-01
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一种犬重组干扰素-α6及其制备方法与应用。该犬重组干扰素-α6的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了犬重组干扰素-α6的制备方法,利用毕赤酵母菌株表达系统表达含有本发明密码子优化了的犬重组干扰素-α6基因的重组酵母工程菌,获得分泌表达的高活性犬重组干扰素-α6,本发明方法制备得到的犬重组干扰素-α6纯度高,纯化后达到1.49mg/ml,1L重组酵母工程菌的蛋白产量达到98mg。抗病毒比活性为3.6×107IU/mg,能够有效预防和治疗犬瘟热、犬细小病毒、犬副流感病毒、犬传染性肝炎等传染性疾病,具有较高的安全性,应用前景良好。
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公开(公告)号:CN118453735B
公开(公告)日:2024-10-15
申请号:CN202410579619.6
申请日:2024-05-11
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种抗猪伪狂犬病毒的藏药配方及其制备方法,包括射干1~3份、甘青乌头1~3份、蓝花荆芥2~3份、五脉绿绒蒿3~4份、铁棒锤3~5份。本发明的藏药配方可显著抑制伪狂犬病毒在细胞上的复制,同时可以延缓攻毒小鼠发病,减轻临床症状,提高动物的存活率。为猪伪狂犬病毒病的防治提供了新的方法,为藏药的临床应用开发提供了新的思路。
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公开(公告)号:CN114085287B
公开(公告)日:2022-10-25
申请号:CN202111337160.1
申请日:2021-11-12
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种犬细小病毒纳米抗体CPV‑VHH‑F5及其应用,属于免疫学技术领域。所述纳米抗体CPV‑VHH‑F5的重链可变区序列由如SEQ ID NO:1所示氨基酸序列组成,编码所述的纳米抗体CPV‑VPP‑F5的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明通过噬菌体展示技术构建了犬细小病毒的纳米抗体免疫文库,通过筛选获得特异性抗CPV纳米抗体CPV‑VHH‑F5,通过试验验证该纳米抗体可以特异性结合CPV,有望开发出可用于CPV的临床诊断和治疗的纳米抗体新型制剂,为纳米抗体应用于兽用生物制品领域提供一定的理论储备。
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公开(公告)号:CN114085287A
公开(公告)日:2022-02-25
申请号:CN202111337160.1
申请日:2021-11-12
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种犬细小病毒纳米抗体CPV‑VHH‑F5及其应用,属于免疫学技术领域。所述纳米抗体CPV‑VHH‑F5的重链可变区序列由如SEQ ID NO:1所示氨基酸序列组成,编码所述的纳米抗体CPV‑VPP‑F5的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明通过噬菌体展示技术构建了犬细小病毒的纳米抗体免疫文库,通过筛选获得特异性抗CPV纳米抗体CPV‑VHH‑F5,通过试验验证该纳米抗体可以特异性结合CPV,有望开发出可用于CPV的临床诊断和治疗的纳米抗体新型制剂,为纳米抗体应用于兽用生物制品领域提供一定的理论储备。
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公开(公告)号:CN108840910B
公开(公告)日:2021-12-14
申请号:CN201810744908.1
申请日:2018-07-09
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明属于多肽制备技术领域,具体公开了生物活性肽kss1b及其制备方法与应用。本发明通过选择合适的表达菌株以及合适的载体,并采用自动诱导的方式,提供了一种较为理想的利用大肠杆菌来进行kss1b的重组表达方案。使用该方法能够稳定获得1mg/L的高纯度的重组kss1b(rkss1b),其氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示。rkss1b能够在1μM水平,显著抑制大鼠DRG细胞上的TTX‑S型电压敏感钠通道(VGSC)电流。
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公开(公告)号:CN110452889B
公开(公告)日:2021-07-27
申请号:CN201910654523.0
申请日:2019-07-19
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种表达BVDV‑E0的重组牛肠道病毒的构建方法及其初步应用,所述感染性克隆毒株是通过反向遗传操作的方法获得BEV BJ101毒株的全长cDNA克隆并获得拯救毒株rBEV后,将BVDV的E0序列插入到BEV全长cDNA中,获得可稳定表达外源基因E0的重组牛肠道病毒。所述rBEV‑E0重组病毒的初步应用,将分离纯化后的重组病毒免疫6~8周龄的SPF级别的Balb/c雌鼠,在不同时间点收集其血清样本进行检测,小鼠不但可以稳定表达E0蛋白,并能对其产生有效的免疫应答。本发明的重组病毒可同时用于BEV和BVDV的防控,也为其他外源基因提供了合适的的rBEV插入位点,为后续外源基因的插入、重组病毒的制备等研究提供有效的技术平台。
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公开(公告)号:CN108840910A
公开(公告)日:2018-11-20
申请号:CN201810744908.1
申请日:2018-07-09
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明属于多肽制备技术领域,具体公开了生物活性肽kss1b及其制备方法与应用。本发明通过选择合适的表达菌株以及合适的载体,并采用自动诱导的方式,提供了一种较为理想的利用大肠杆菌来进行kss1b的重组表达方案。使用该方法能够稳定获得1mg/L的高纯度的重组kss1b(rkss1b),其氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示。rkss1b能够在1μM水平,显著抑制大鼠DRG细胞上的TTX-S型电压敏感钠通道(VGSC)电流。
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公开(公告)号:CN108486127A
公开(公告)日:2018-09-04
申请号:CN201810103770.7
申请日:2018-02-01
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明提供一种犬干扰素-α6α7重组蛋白及其制备方法与应用。所述犬干扰素-α6α7重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示,可按如下方法制备:对犬干扰素-α6基因、犬干扰素-α7基因分别进行密码子优化,将优化后的基因序列进行拼接,克隆至pPICZαA中构建重组表达质粒,转化毕赤酵母,制备重组菌,然后进行发酵、诱导表达、纯化,获得犬干扰素-α6α7重组蛋白。其可作为广谱抗病毒制剂,对犬瘟热、犬细小病毒病、犬副流感病毒病、犬传染性肝炎病毒感染的预防及治疗效果显著,为实现重组犬干扰素-α6、α7串联重组蛋白工艺化生产和进一步广谱性预防和治疗犬的病毒性疫病提供有效的技术手段。
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公开(公告)号:CN108424915A
公开(公告)日:2018-08-21
申请号:CN201810103769.4
申请日:2018-02-01
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明提供一种犬干扰素-α2重组蛋白的制备方法,对犬干扰素-α2基因进行密码子优化后,克隆至pET-21a或pET-32a中构建重组表达质粒,转化至大肠杆菌感受态细胞BL21中,制备重组菌,通过发酵、诱导表达、纯化,获得犬干扰素-α2重组蛋白,其可作为广谱抗病毒制剂,对犬瘟热、犬细小病毒病、犬副流感病毒病、犬传染性肝炎病毒感染的预防及治疗效果显著。本发明为实现重组犬干扰素-α2工艺化生产和进一步广谱性预防和治疗犬的病毒性疫病提供有效的技术手段。
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公开(公告)号:CN108359004A
公开(公告)日:2018-08-03
申请号:CN201810102572.9
申请日:2018-02-01
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一种犬重组干扰素-λ1及其制备方法与应用。该犬重组干扰素-λ1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了犬重组干扰素-λ1的制备方法,利用毕赤酵母菌株表达系统表达含有本发明密码子优化了的犬重组干扰素-λ1基因的重组酵母工程菌,获得分泌表达的高活性犬重组干扰素-λ1,本发明方法制备得到的犬重组干扰素-λ1纯度高,纯化后达到0.86mg/ml,1L重组酵母工程菌的蛋白产量为42mg。抗病毒比活性为2.85×107IU/mg,能够有效预防和治疗犬瘟热、犬细小病毒、犬副流感病毒病、犬传染性肝炎等传染性疾病,具有较高的安全性,应用前景良好。
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