一种表达BVDV-E0的重组牛肠道病毒的构建方法与初步应用

    公开(公告)号:CN110452889A

    公开(公告)日:2019-11-15

    申请号:CN201910654523.0

    申请日:2019-07-19

    Abstract: 本发明公开了一种表达BVDV-E0的重组牛肠道病毒的构建方法及其初步应用,所述感染性克隆毒株是通过反向遗传操作的方法获得BEV BJ101毒株的全长cDNA克隆并获得拯救毒株rBEV后,将BVDV的E0序列插入到BEV全长cDNA中,获得可稳定表达外源基因E0的重组牛肠道病毒。所述rBEV-E0重组病毒的初步应用,将分离纯化后的重组病毒免疫6~8周龄的SPF级别的Balb/c雌鼠,在不同时间点收集其血清样本进行检测,小鼠不但可以稳定表达E0蛋白,并能对其产生有效的免疫应答。本发明的重组病毒可同时用于BEV和BVDV的防控,也为其他外源基因提供了合适的的rBEV插入位点,为后续外源基因的插入、重组病毒的制备等研究提供有效的技术平台。

    一种表达BVDV-E0的重组牛肠道病毒的构建方法与初步应用

    公开(公告)号:CN110452889B

    公开(公告)日:2021-07-27

    申请号:CN201910654523.0

    申请日:2019-07-19

    Abstract: 本发明公开了一种表达BVDV‑E0的重组牛肠道病毒的构建方法及其初步应用,所述感染性克隆毒株是通过反向遗传操作的方法获得BEV BJ101毒株的全长cDNA克隆并获得拯救毒株rBEV后,将BVDV的E0序列插入到BEV全长cDNA中,获得可稳定表达外源基因E0的重组牛肠道病毒。所述rBEV‑E0重组病毒的初步应用,将分离纯化后的重组病毒免疫6~8周龄的SPF级别的Balb/c雌鼠,在不同时间点收集其血清样本进行检测,小鼠不但可以稳定表达E0蛋白,并能对其产生有效的免疫应答。本发明的重组病毒可同时用于BEV和BVDV的防控,也为其他外源基因提供了合适的的rBEV插入位点,为后续外源基因的插入、重组病毒的制备等研究提供有效的技术平台。

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