嵌合的人乳头瘤病毒35型L1蛋白

    公开(公告)号:CN114127127B

    公开(公告)日:2024-04-09

    申请号:CN202080052245.2

    申请日:2020-07-17

    Abstract: 本发明提供了嵌合的人乳头瘤病毒35型L1蛋白和编码其的多核苷酸,还提供了HPV 35型病毒样颗粒和其制备方法。该嵌合的人乳头瘤病毒35型L1蛋白包含衍生于HPV 35型L1蛋白的N端片段,该N端片段保持HPV 35型L1蛋白的免疫原性;和衍生于第二型别乳头瘤病毒L1蛋白的C端片段,该第二型别乳头状瘤病毒L1蛋白具有相较于其他型别的L1蛋白表达量和可溶性较好的特性;其中该嵌合的HPV 35型L1蛋白具有HPV 35型L1蛋白的免疫原性。该嵌合的人乳头瘤病毒35型L1蛋白具有较高的表达量和可溶性,可用于疫苗的大规模生产。

    一种羊传染性脓疱病毒减毒株的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN114657154B

    公开(公告)日:2024-01-12

    申请号:CN202011528341.8

    申请日:2020-12-22

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明提供了一种羊传染性脓疱病毒减毒株的制备方法,通过将目标基因突变的方式制备,所述目标基因为羊传染性脓疱病毒ORF120基因。所述缺失ORF120基因的羊传染性脓疱病毒是采用基因工程手段,利用同源重组的方法从ORFV‑SY17分离株全基因组中敲除ORF120基因,以此达到毒力减弱的目的,并以绿色荧光蛋白EGFP作为标记蛋白代替缺失的基因,命名为ORFV‑SY17Δ120减毒株。在此基础上,拯救出其互补株ORFV‑SY17‑Rv120,并以红色荧光蛋白RFP作为筛选标识。经过本源动物羔羊动物接种实验表明,本发明所述的ORF120单基因缺失羊传染性脓疱病毒减毒株具有良好的使用安全性,为羊传染性脓疱病毒减毒活疫苗的开发以及ORF120基因功能的探究提供技术支持。

    一种猫泛白细胞减少症病毒假病毒的构建方法

    公开(公告)号:CN116926021A

    公开(公告)日:2023-10-24

    申请号:CN202310837922.7

    申请日:2023-07-10

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明公开了一种猫泛白细胞减少症病毒假病毒的构建方法,先提取猫泛白细胞减少症病毒ATCCVR‑648株病毒DNA,进行PCR扩增获得VP2基因,将其连接到pDONR221载体,得到中间载体pDown‑{FPV‑VP2},将其与携带启动子的pUp‑EF1A载体、骨架载体pLV.Des2d.C/EGFP:T2A:Puro重组,得到重组表达质粒,将其进行慢病毒包装,即得。与现有技术相比,本发明构建的猫泛白细胞减少症病毒假病毒无复制活性、生物安全性高、稳定性好,在猫泛白细胞减少症病毒核酸检测时可用作阳性对照标准品和内控标准品,可应用于猫泛白细胞减少症病毒的研究、抗病毒制剂的筛选和疫苗的研发。

    一种呼肠孤病毒3型的纯化方法及应用

    公开(公告)号:CN116855461A

    公开(公告)日:2023-10-10

    申请号:CN202310467199.8

    申请日:2023-04-25

    Abstract: 本发明涉及一种呼肠孤病毒3型的纯化方法及应用,该方法包括如下步骤:S1、将含Reo‑3病毒的上清液通过0.1μmPES滤膜过滤;S2、过滤后的上清液用中空纤维柱切向流浓缩,浓缩液加入全能核酸酶消化;消化后的浓缩液用层析平衡缓冲液进行洗滤置换;中空纤维柱为300‑500KD,切向流的工艺参数为跨膜压为2‑4psi,浓缩倍数为5‑10倍,核酸酶活性60‑80U/ml,洗滤换液体积为浓缩液总体积的2‑10倍;S3、将CaptoQimpres强阴离子填料装入层析柱,控制置换后的病毒上清液进入层析填料的线性流速为30‑70cm/min,然后经线性洗脱得到高纯度的Reo‑3病毒液。

    一种猫杯状病毒假病毒的制备方法

    公开(公告)号:CN116790666A

    公开(公告)日:2023-09-22

    申请号:CN202310749595.X

    申请日:2023-06-25

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明公开了一种猫杯状病毒假病毒的制备方法,先通过PCR扩增获得gp2基因,然后采用BP反应构建得到含有gp2基因序列的入门克隆载体pDown‑{FCV‑gp2},接着采用LR反应将携带启动子的pUp‑EF1A载体、pDown‑{FCV‑gp2}以及pLV.Des2d.C/EGFP:T2A:Puro重组,得到重组表达载体pLV[Exp]‑EGFP:T2A:Puro‑EF1A>{FCV‑gp2},将其和慢病毒包装质粒共转染HEK293T细胞,即得。该方法制备得到的猫杯状病毒假病毒无复制活性,生物安全性高,能够为猫杯状病毒的研究、抗病毒制剂和疫苗评价提供强有力的筛选工具,具备广泛的应用价值。

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