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公开(公告)号:CN102747102B
公开(公告)日:2014-02-19
申请号:CN201210269209.9
申请日:2012-07-31
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
IPC: C12N15/85 , C12N5/10 , C12P21/02 , C12N15/873
Abstract: 本发明公开了一种HSA乳腺特异性表达载体及其构建的重组细胞,该载体包括位于启动子下游的目的基因HSA,在HSA基因的5'端连接BCP5序列,在其3'端连接有BGHpolyA序列;在启动子的上游还设有phiC31整合酶特异性识别位点。通过在HSA基因5'端插入牛β-酪蛋白基因的和3'端插入牛生长激素polyA,牛β-酪蛋白基因的5'调控区和BGHpolyA能够指导目的基因在牛的乳腺组织中特异的高效表达。以包含目的基因HSA的牛胎儿成纤维细胞作为核移植构建转基因克隆胚的核供体细胞,通过SCNT获得转基因克隆胚,将这些胚胎移入受体牛的子宫有望生产出转HSA基因的奶牛。
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公开(公告)号:CN102747102A
公开(公告)日:2012-10-24
申请号:CN201210269209.9
申请日:2012-07-31
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
IPC: C12N15/85 , C12N5/10 , C12P21/02 , C12N15/873
Abstract: 本发明公开了一种HSA乳腺特异性表达载体及其构建的重组细胞,该载体包括位于启动子下游的目的基因HSA,在HSA基因的5'端连接BCP5序列,在其3'端连接有BGHpolyA序列;在启动子的上游还设有phiC31整合酶特异性识别位点。通过在HSA基因5'端插入牛β-酪蛋白基因的和3'端插入牛生长激素polyA,牛β-酪蛋白基因的5'调控区和BGHpolyA能够指导目的基因在牛的乳腺组织中特异的高效表达。以包含目的基因HSA的牛胎儿成纤维细胞作为核移植构建转基因克隆胚的核供体细胞,通过SCNT获得转基因克隆胚,将这些胚胎移入受体牛的子宫有望生产出转HSA基因的奶牛。
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公开(公告)号:CN102628045A
公开(公告)日:2012-08-08
申请号:CN201210100786.5
申请日:2012-04-09
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
IPC: C12N15/113 , C12N15/63 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种干扰BVDV复制的shRNA表达载体及构建的重组细胞,针对BVDV的不同区域设计了不同的shRNA片段。shRNA在宿主细胞内转录后经剪切加工后形成siRNA,作用于病毒RNA的不同区域,干扰病毒的复制和表达。由于在牛肾脏细胞、睾丸细胞等存在BVDV细胞表面受体,因此BVDV对胎牛肾脏细胞、睾丸细胞最敏感,那么牛胎儿成纤维细胞做为体细胞核移植的供体细胞,进行诱导重编程之后形成的了转基因克隆牛完整的个体,其肾脏等BVDV敏感器官具有抑制该病毒表达的能力。
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公开(公告)号:CN101591672B
公开(公告)日:2011-09-07
申请号:CN200910022664.7
申请日:2009-05-22
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明涉及一种包含hBD3乳腺特异性表达载体的牛胎儿成纤维细胞,包括一种hBD3乳腺特异性表达载体,包含目的基因hBD3,分别在hBD3基因的5′端和3′端插入调控元件;所述的hBD3乳腺特异性表达载体为pEBB表达载体。一种包含目的基因hBD3的牛胎儿成纤维细胞,其宿主细胞为牛胎儿成纤维细胞,通过转染外源性表达载体pEBB,将目的基因hBD3整合到牛胎儿成纤维细胞的基因组。以包含目的基因hBD3的牛胎儿成纤维细胞作为核移植构建转基因克隆胚的核供体细胞,通过SCNT获得转基因克隆胚,将这些胚胎移入受体牛的子宫有望生产出转hBD3基因的奶牛。
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公开(公告)号:CN117778393A
公开(公告)日:2024-03-29
申请号:CN202311812279.9
申请日:2023-12-26
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/877
Abstract: 本发明公开了牛SEPT7基因的表达抑制剂提高牛克隆效率的应用。在体细胞核移植的电融合液中加入SEPT7基因的siRNA,从而形成牛SEPT7基因的表达抑制剂,可以有效的减少牛体细胞克隆中存在的早期胚胎第一次卵裂时间缩短的现象,并使早期胚胎第一次卵裂时间趋于正常,还可以有效提高牛克隆重构胚胎的发育性能,从而提高牛体细胞克隆的效率。
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公开(公告)号:CN114703293A
公开(公告)日:2022-07-05
申请号:CN202210283316.0
申请日:2022-03-22
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种牛CRY1基因的InDel标记在繁殖性状早期选择中的应用。以待测奶牛全基因组DNA为模板,通过PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳,鉴定CRY1基因NC_037332.1:g.70335656‑70335661位InDel位点的基因型。根据CRY1基因InDel位点的不同基因型与卵巢相关性状的关联分析结果,确定了CRY1基因InDel位点的基因型可作为提高奶牛繁殖力的DNA标记。本发明通过快速、精准的检测与繁殖力密切相关的InDel标记,可快速建立奶牛优势遗传资源群体,从而加快奶牛繁殖性状的标记辅助选择育种进程。
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公开(公告)号:CN111157710B
公开(公告)日:2021-12-31
申请号:CN202010047929.5
申请日:2020-01-16
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: G01N33/48
Abstract: 本发明公开了一种挑选牛体外可移植胚胎的方法,属于家畜胚胎工程技术领域。本发明公开的一种挑选牛体外可移植胚胎的方法,从胚胎化学激活完毕或受精完毕开始计为第零天,在胚胎培养至第六天和第七天时进行挑选;挑选时第六天选择致密化桑葚胚及早期囊胚,挑选时第七天选择有腔囊胚及腔扩张囊胚。本发明公开的一种挑选牛体外可移植胚胎的方法,在进行体外胚胎移植之前进行挑选,能提高体外胚胎质量,从而保障移植后的怀孕率,以减少未怀孕牛的出现率并降低生产成本。
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公开(公告)号:CN112941202A
公开(公告)日:2021-06-11
申请号:CN202110304062.1
申请日:2021-03-22
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种牛SEPT7基因插入/缺失突变的检测方法及其应用。以牛全基因组DNA为模板,通过PCR扩增牛SEPT7基因部分片段,应用琼脂糖凝胶电泳鉴定个体SEPT7基因9‑bp插入突变的基因型。根据性状关联分析结果,SEPT7基因9‑bp插入突变位点的基因型与母牛的繁殖性状显著相关。因此,SEPT7基因9‑bp插入突变位点可用于母牛繁殖性状的早期标记辅助选择,以加快建立遗传资源优良的牛群体。
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公开(公告)号:CN106086080B
公开(公告)日:2018-12-04
申请号:CN201610537461.1
申请日:2016-07-08
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/877 , C12N5/073
Abstract: 本发明公开了一种利用微小核糖核酸提高牛克隆效率的方法,在体细胞核移植的电融合液中加入bta‑miR‑125b mimic,可以有效地导入到胚胎中,在避免产生转染的二次损伤的同时,还能有效地减弱体细胞克隆胚在合子激活时期的组蛋白H3K9me3表观遗传修饰水平,显著提高牛体细胞克隆囊胚的发育率和质量。
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