公开(公告)号：CN105823890A

公开(公告)日：2016-08-03

申请号：CN201610217176.1

申请日：2016-04-08

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 杨永庆 ,  程光远 ,  彭磊 ,  徐倩 ,  董萌 ,  徐景升 ,  翟玉山 ,  邓宇晴 ,  郑艳茹 ,  高世武 ,  郭晋隆

IPC: G01N33/68 ,  G01N21/64 ,  C12Q1/02 ,  C12N15/82

CPC classification number: G01N33/68 ,  C12N15/8205 ,  G01N21/64 ,  G01N33/5097

Abstract: 本发明涉及一种利用高粱花叶病毒P3N?PIPO构建的植物亚细胞定位试剂盒，包括4个分别标记绿色、红色、黄色和青色荧光蛋白的胞间连丝定位载体：SrMV?P3N?PIPO?GFP、pSrMV?P3N?PIPO?RFP、pSrMV?P3N?PIPO?YFP和pSrMV?P3N?PIPO?CFP；4个无特异亚细胞定位的对照载体：pSAT6?EGFP?C1、pSAT6?ERFP?C1、pSAT6?EYFP?C1和pSAT6?ECFP?C1；限制性内切酶Xho I、Hind III、无RNase水和侵染液。使用本试剂盒可以快速明确目的基因表达产物是否具有胞间连丝定位的特性。

公开(公告)号：CN105821051A

公开(公告)日：2016-08-03

申请号：CN201610217153.0

申请日：2016-04-08

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 徐景升 ,  程光远 ,  徐倩 ,  董萌 ,  彭磊 ,  杨永庆 ,  邓宇晴 ,  高世武 ,  郭晋隆 ,  许莉萍

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/11 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00

CPC classification number: C07K14/415 ,  C12N15/8283

Abstract: 本发明涉及一种利用RNAi阻断病毒胞间移动培育抗花叶病转基因甘蔗的方法，包括RNAi载体构建、遗传转化、转基因甘蔗植株的筛选鉴定及对花叶病的抗性鉴定。本发明采用融合PCR技术，克隆了SCMV的P3N?PIPO的编码序列，以pGBKT7?SCMV?P3NPIPO为诱饵从甘蔗的酵母文库中筛选到了与P3N?PIPO互作的甘蔗基因ScPCaP。以ScPCaP作为RNAi干扰靶序列，经遗传转化后获得了对SCMV，SrMV和SCSMV均有抗性的转基因甘蔗植株，并具有抗性广谱、抗病性好、抗性持久的特点，有效缩短了甘蔗抗花叶病育种周期。采用本发明的利用RNAi阻断病毒胞间移动的方法培育抗花叶病转基因甘蔗，在转基因生物安全上，优于转入病毒序列的转基因甘蔗。

公开(公告)号：CN105039355A

公开(公告)日：2015-11-11

申请号：CN201510570201.X

申请日：2015-09-09

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 徐景升 ,  杨永庆 ,  程光远 ,  高世武 ,  郭晋隆 ,  翟玉山 ,  彭磊 ,  邓宇晴 ,  郑艳茹 ,  许莉萍

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/11 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明涉及一种利用RNAi沉默翻译起始因子基因培育抗花叶病甘蔗的方法，包括SceIF4E1基因和SceIF4E2基因的克隆、RNAi干扰载体构建、遗传转化、抗花叶病转基因甘蔗材料的培育及抗病性鉴定。以SceIF4E1和SceIF4E2作为RNAi干扰靶序列，经遗传转化后获得的转基因植株，产生了对甘蔗花叶病的三种病原即甘蔗花叶病毒、高粱花叶病毒和甘蔗条纹花叶病毒不同株系的广谱抗性，具有抗病性好、抗性持久且生物安全性高的特点，使转基因甘蔗的培育摆脱了对抗源基因的依赖，并且可以有效缩短甘蔗抗花叶病育种周期。采用本发明的方法培育抗花叶病转基因甘蔗，在转基因生物安全上，优于转入病毒序列的转基因甘蔗。

公开(公告)号：CN103060457A

公开(公告)日：2013-04-24

申请号：CN201310015760.5

申请日：2013-01-16

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 阙友雄 ,  郭晋隆 ,  许莉萍 ,  张玉叶 ,  罗俊 ,  徐景升 ,  黄宁 ,  陈如凯

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明涉及一种检测甘蔗褐锈病菌的实时荧光定量PCR方法，包括基因组DNA的提取、实时荧光定量PCR检测体系建立、实验有效性判定，以及实时荧光定量PCR检测。本发明的一种检测甘蔗褐锈病菌的实时荧光定量PCR方法，具有灵敏度高，特异性好，所需要的DNA用量少的特点；与常规的根据病菌培养后的孢子形态特征鉴定、根据田间种植后病害表型症状鉴定，以及常规PCR检测技术相比，具有灵敏度高，特异性好，样品消耗少，还能实时直观地监测PCR扩增过程等优点。为甘蔗褐锈病菌的鉴定，提供了高灵敏度、特异性强的快速检测体系，可用于田间甘蔗褐锈病菌的早期诊断及检测，对抗褐锈病甘蔗育种和抗褐锈病甘蔗种质资源的保护具有重要的意义。

公开(公告)号：CN103014172A

公开(公告)日：2013-04-03

申请号：CN201310015708.X

申请日：2013-01-16

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 阙友雄 ,  许莉萍 ,  张玉叶 ,  郭晋隆 ,  徐景升 ,  罗俊 ,  高世武 ,  陈如凯

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明涉及一种检测甘蔗黄锈病菌的实时荧光定量PCR方法，包括基因组DNA提取、实时荧光定量PCR检测体系建立、实验有效性判定以及实时荧光定量PCR检测。本发明的一种检测甘蔗黄锈病菌的实时荧光定量PCR方法，具有灵敏度高，特异性好，所需要的DNA用量少的特点；与常规的根据病菌培养后的孢子形态特征鉴定、根据田间种植后病害表型症状鉴定以及常规PCR检测技术相比，具有灵敏度高，特异性好，样品消耗少，还能实时直观地监测PCR扩增过程等优点。为甘蔗黄锈病菌的鉴定，提供了高灵敏度、特异性强的快速检测体系，可用于田间甘蔗黄锈病菌的早期诊断及检测，对抗黄锈病甘蔗育种和抗黄锈病甘蔗种质资源的保护具有重要的意义。

公开(公告)号：CN101328501A

公开(公告)日：2008-12-24

申请号：CN200810071436.4

申请日：2008-07-23

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 高三基 ,  潘永保 ,  陈平华 ,  陈如凯 ,  许莉萍 ,  张华 ,  徐景升

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04

Abstract: 本发明涉及甘蔗RSD病菌的快速裂解和PCR检测技术。本发明通过Buffer A和Buffer B裂解甘蔗RSD病菌，用PCR检测技术快速检测出Leifsonia xyli subsp.xyli病菌。本发明的检测灵敏度比常规CTAB裂解提取DNA的方法高，且具有快速、简便、成本低、无污染的特点，具备较高的灵敏性和准确性。本发明可用于大规模甘蔗RSD病菌的PCR检测。

公开(公告)号：CN1978667A

公开(公告)日：2007-06-13

申请号：CN200510129849.X

申请日：2005-12-08

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 张木清 ,  徐景升 ,  陈如凯

IPC: C12Q1/68

Abstract: 一种检测转基因产品的基因芯片，具有平面型支撑载体的平面，其上被履有带正电荷材料的膜，在该膜的表层设有点阵，点阵上排布外源插入基因引物及其扩增的PCR产物。本发明的基因芯片探针采用转基因元件的保守序列，覆盖的基因长度较长，可以检测目前的商业转基因产品，并能同时进行多基因、多种商品化的转基因检测，是未知转基因产品"普筛"的好技术；也是开展转基因品种检测和品系鉴定的工具之一，可以达到高效、灵敏、准确、高通量平行检测的效果。