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公开(公告)号：CN105861423A
公开(公告)日：2016-08-17
申请号：CN201610242170.X
申请日：2016-04-19
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N5/073
CPC classification number: C12N5/0604
Abstract: 本发明设计一种猪ICSI受精卵制备用操作皿的制作方法，包括在Φ60mm的一次性细胞培养皿上依次制作设定尺寸的操作液微滴、用于制动的PVP微滴、注射针处理微滴、和精液培养微滴，所述精液培养微滴包括呈H型结构的第一精液培养微滴、精液筛选桥和第二精液培养微滴，利用精液筛选桥的作用，选取大量高质量精子。达到在短时间内实现大量猪ICSI操作目的，减少猪ICSI操作过程选择精子的时间，减少卵母细胞在空气中暴露的时间，提高猪ICSI胚胎的存活率。
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公开(公告)号：CN104651402A
公开(公告)日：2015-05-27
申请号：CN201510118781.9
申请日：2015-03-18
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/85
Abstract: 本发明公开了一种通用型基因打靶载体，属于生物工程领域。该通用型基因打靶载体使用新霉素磷酸转移酶和EGFP为正选择标记，DsRed为负选择标记；正选择标记基因表达框的两侧各含有1个同向排列的LoxP位点；在LoxP位点附近各含有一段由稀有限制性内切酶位点组成的多克隆位点，便于基因打靶臂的克隆。该载体含有2个归巢限制性内切酶位点，分别为I-CeuI和I-SceI，可作为通用酶切位点将该载体线性化。本发明提供的通用型基因打靶载体，不仅具备单药物和双荧光筛选功能，而且其含有的LoxP位点可介导选择标记的高效删除反应，这为动物安全转基因技术提供了新材料，具有重要的应用前景。
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公开(公告)号：CN119286862A
公开(公告)日：2025-01-10
申请号：CN202411502198.3
申请日：2024-10-25
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12Q1/6888 , C12N15/85 , C12N15/64 , C12N5/10 , C12P7/56
Abstract: 本发明公开了一种猪环状RNA、猪circLDHC、过表达载体及其构建方法和应用，涉及家畜分子生物学技术领域。所述猪环状RNA由LDHC基因第3‑6外显子环化形成，猪环状RNA核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。所述猪circLDHC由猪环状RNA经逆转录所得。本发明针对circLDHC设计特异性扩增引物，经PCR扩增、测序及RNase R酶消化验证所述的circLDHC的真实存在。荧光定量PCR分析发现circLDHC在猪性成熟睾丸组织中高表达，其表达水平与睾丸的成熟相关，同时在75日龄梅山公猪睾丸中表达量极显著高于同日龄杜洛克公猪(p
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公开(公告)号：CN118360238A
公开(公告)日：2024-07-19
申请号：CN202410467486.3
申请日：2024-04-17
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N5/077 , C12N5/10 , C12N15/873
Abstract: 本发明公开了一种单克隆细胞的制备方法及应用，属于细胞生物学技术领域。本发明提供了一种单克隆细胞的制备方法，利用原代成纤维细胞进行培养，选取对数生长期的细胞进行转染，并对转染后的细胞进行抗生素筛选，直到有细胞单克隆的出现，挑选单克隆细胞。利用本发明所述制备方法制备得到的单克隆细胞，效率高且挑选的单克隆较为单一，挑选时细胞始终处于液体中，细胞的成活率高。本发明得到的所述单克隆细胞可作为动物体细胞核移植的供体细胞，用于转基因克隆动物的制备。
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公开(公告)号：CN116286891A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310186362.3
申请日：2023-03-02
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/53 , C12N15/113 , C12N15/85 , C12N5/10
Abstract: 本发明提供了一种猪SCD基因家族成员双基因突变细胞、突变细胞系及突变动物的构建方法，涉及生物医学技术领域。本发明从猪SCD1基因中分离出1个基因编辑靶位点，从猪SCD5基因中分离出2个基因编辑靶位点，均可应用于基因编辑。统计结果表明，以上位点的打靶效率分别为90％和82％。提供的猪SCD1和SCD5双基因编辑位点为对猪硬脂酰辅酶A去饱和酶基因家族成员进行精确编辑提供了有效靶标，同时提供了一个猪SCD1和SCD5双基因突变的细胞模型，为脂质代谢及猪种肉质改良提供了可靠的研究材料，也为优良肉质猪品种的研究和开发提供了新策略。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115918641A
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202211516735.0
申请日：2022-11-29
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种猪精液冷冻保护剂、制备方法、冷冻及解冻方法和应用，涉及猪精液冷冻保护技术领域。所述冷冻保护剂包括渗透性冷冻保护剂和非渗透性冷冻保护剂，所述渗透性冷冻保护剂包括甘油、DMSO和异丙醇；所述非渗透性冷冻保护剂包括PVP、吐温20、Triton‑100和SDS，且渗透性冷冻保护剂和非渗透性冷冻保护剂的体积比为1:1。本发明利用渗透性冷冻保护剂与非渗透性冷冻保护剂联合使用，可以充分保护精子的顶体、线粒体完整性，提高精子配种率，解冻后精液活力优于其它猪冻精。采用本发明的稀释剂用于猪冷冻精液的生产，解冻后精子活力达85％以上，顶体完整率达85％以上，质膜完整率80以上，线粒体活性达80％以上，畸形率10％以下。
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公开(公告)号：CN111778252B
公开(公告)日：2022-01-07
申请号：CN202010690620.8
申请日：2020-07-17
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/90 , C12N15/12 , C12N5/10 , C12Q1/6858
Abstract: 本发明提供了一种靶向敲除SST基因的sgRNA及其CRISPR/Cas9系统和应用，属于基因敲除技术领域。本发明提供了一种靶向敲除SST基因的sgRNA，包括SST sgRNA1和SST sgRNA2，还提供了包含所述sgRNA的CRISPR/Cas9系统。将所述CRISPR/Cas9系统转染至猪肾成纤维细胞中，筛选得到的阳性细胞，取得较高的基因删除效率，同时CRISPR/Cas9系统通过对猪SST基因进行完全性基因敲除，可以提高猪的生长速度，从而提高养猪业的经济效益，同时所述CRISPR/Cas9系统对进一步研究SST基因的功能及其与某些疾病的相互关联具有十分重要的意义。
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公开(公告)号：CN113667674A
公开(公告)日：2021-11-19
申请号：CN202111002995.1
申请日：2021-08-30
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/12 , C12N15/113 , C12N15/85 , C12N5/10 , A01K67/027 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及生物技术和基因工程的技术领域，具体涉及一种靶向切除猪CD164基因编码区DNA的成对编辑位点、使用方法及其应用，所述编辑位点包括T1和T2两个编辑位点，所述T1和T2两个编辑位点位于猪1号染色体CD164基因编码区的2外显子区域；其中T1编辑位点染色体坐标为75441814‑75441833，编码区坐标为246‑265；T2编辑位点染色体坐标为75442009‑75442028，编码区坐标为441‑460。本发明的两个能基于CRISPR技术有效编辑猪CD164基因的靶位点，可用于Cas9介导的猪CD164基因打靶，为研究CD164基因在猪抗病育种中提供实验材料。
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公开(公告)号：CN113234758A
公开(公告)日：2021-08-10
申请号：CN202110517953.5
申请日：2021-05-12
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/85 , C12N15/877 , C12N15/12 , C12N5/10 , A01K67/027
Abstract: 本发明涉及生物工程领域，特别是涉及利用PiggyBac转座酶系统构建无痕工程动物的方法。本发明利用受体基因组天然的“TTAA”四联体序列，以及修复模板上携带的PiggyBac转座酶的识别序列，将基因打靶过程中引入的选择标记基因删除，实现无残留的基因编辑，从而彻底消除生物安全隐患。由此可见，采用本发明所述PiggyBac转座酶系统能实现“无痕”打靶，解决了现有技术无法克服的瓶颈。而且本发明将CRISPR/Cas9和PiggyBac两个技术联合使用能够实现保真度100％的基因突变和无残留基因编辑，是目前生物安全技术水平最高的方法。
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公开(公告)号：CN112033903A
公开(公告)日：2020-12-04
申请号：CN202010820735.4
申请日：2020-08-14
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明公开一种基于智能手机的观测系统，所述基于智能手机的观测系统包括观测台搭建、配件安装和观测台调试，即通过现有生活中所常见的智能手机设备，经由智能手机安装于手机座的顶端，从而在摄像头自孔位处拍摄样品于显示屏时，来对样品进行观测记录，该种观测方式，无需大费周章的对分光光路、拍摄接口以及拍摄设备进行装配和调试，可通过横向螺杆间接驱动竖向螺杆进行转动，来实现载物台的上下高度调节，且在高度调节中，通过摄像头拍摄画面于显示屏处是否清晰，来明确调节位置，使用简单，而且可在后期处理中，通过无线信号对观察图片进行传输，更省去了传统拍摄设备需通过线材进行信息传输的不便。
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