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公开(公告)号:CN103969450A
公开(公告)日:2014-08-06
申请号:CN201410224227.4
申请日:2014-05-26
Applicant: 江苏省农业科学院
Inventor: 李彬 , 孙冰 , 何孔旺 , 杜露平 , 郭容利 , 倪艳秀 , 温立斌 , 俞正玉 , 张雪寒 , 茅爱华 , 吕立新 , 胡屹屹 , 周俊明 , 王小敏 , 祝昊丹 , 于洋
IPC: G01N33/68 , G01N33/531
CPC classification number: C07K14/005 , C12N2770/24322 , G01N33/56983 , G01N33/68 , G01N2333/183
Abstract: 本发明提供了一种检测猪流行性腹泻病毒抗体的ELISA试剂盒,属于生物技术领域。该试剂盒是以纯化的重组猪流行性腹泻病毒N蛋白作为包被抗原的ELISA板条。RT-PCR方法扩增获得猪流行性腹泻病毒N基因,定向插入pET-28a载体构建pET-28a-N重组质粒,转化BL21(DE3)感受态细胞,获得原核表达菌pET-28a-N/BL21。经IPTG诱导表达、纯化,获得重组N蛋白。本发明试剂盒用于检测猪流行性腹泻病毒的抗体,经检验,该试剂盒特异性、敏感性、重复性均良好。该试剂盒检测准确、操作简便,适合于在临床应用中进行推广,为猪流行性腹泻病的快速检测提供了可靠手段。
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公开(公告)号:CN103320452A
公开(公告)日:2013-09-25
申请号:CN201310285870.3
申请日:2013-07-08
Applicant: 江苏省农业科学院
Inventor: 李彬 , 孙冰 , 何孔旺 , 郭容利 , 杜露平 , 倪艳秀 , 温立斌 , 俞正玉 , 张雪寒 , 茅爱华 , 吕立新 , 胡屹屹 , 周俊明 , 王小敏 , 祝昊丹 , 于洋
Abstract: 本发明提供了一种猪流行性腹泻病毒变异株N基因全序列的扩增方法,包括如下具体步骤:1.提取猪流行性腹泻病毒变异株RNA;2.依据猪流行性腹泻病毒变异株的N基因全序列设计引物,并用RT-PCR的方法扩增猪流行性腹泻病毒变异株的N基因;3.PCR产物的克隆与测序分析:将PCR产物纯化并连接pMD18-T载体,转化trans5a感受态细胞,筛选阳性克隆,将阳性克隆进行测序分析。可以通过该方法扩增获取病料中猪流行性腹泻病毒变异株的N基因、并可以捕获猪流行性腹泻病毒变异株在细胞培养传代过程中N基因序列的变化。也可以作为一种检测病料中PEDV的方法,并为PEDV的N基因相关研究奠定基础。
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公开(公告)号:CN103275937A
公开(公告)日:2013-09-04
申请号:CN201310072686.0
申请日:2013-03-07
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明涉及一种PCV2密码子优化ORF1和ORF2串联基因的重组病毒,属于生物制药领域。人工合成密码子优化的PCV2ORF1和ORF2基因,命名为YHsfORF1-2。将YHsfORF1-2克隆入杆状病毒表达载体pFastBacHTA中,即获得重组质粒pFBHYHsfORF1-2。而后将重组质粒转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒vFBHYHsfORF1-2。在重组杆状病毒vFBHYHsfORF1-2中,ORF1和ORF2蛋白能够成功的高效表达,并能形成病毒样颗粒。本发明还涉及该重组病毒在疫苗方面的应用,动物试验证明由该重组病毒所制的灭活疫苗,可刺激机体产生高效的免疫应答,对PCV2有较好的免疫保护作用。
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公开(公告)号:CN102206607B
公开(公告)日:2013-05-08
申请号:CN201110087699.6
申请日:2011-04-08
Applicant: 江苏省农业科学院
Inventor: 何孔旺 , 张雪寒 , 卢维彩 , 赵攀登 , 叶青 , 温立斌 , 郭容利 , 李彬 , 王小敏 , 倪艳秀 , 吕立新 , 周俊明 , 俞正玉 , 茅爱华 , 周萍 , 沈江萍
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , A61K39/108 , A61P31/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及肠出血性大肠杆菌O157:H7三基因缺失菌株,属于生物技术领域。①抗性诱导,获得具有链霉素抗性的EHECO157:H7菌株。②缺失株构建,首先EHECO157:H7(△hly),而后依次构建EHECO157:H7(△hly△stx)和EHECO157:H7(△hly△stx△toxB)。EHECO157:H7(△hly△stx△toxB)致病性和小鼠体内定植能力较亲本菌株有明显降低而免疫原性良好。本发明构建了EHECO157:H7(△hly△stx△toxB),并明确了致病性和定植特性。本发明构建的缺失菌株EHECO157:H7(△hly△stx△toxB),可用于研制EHEC基因缺失活疫苗,免疫接种动物以减少EHECO157:H7在肠道内的定植,进而降低人类感染EHECO157:H7的机会,保障人类身心健康。
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公开(公告)号:CN103060474A
公开(公告)日:2013-04-24
申请号:CN201310012559.1
申请日:2013-01-07
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明提供了猪流行性腹泻病毒变异株检测用引物及其检测试剂盒,属于生物技术领域。所述正向引物PEDV-VF(SEQ ID NO.1)5’-TTGGTGAAAACCAGGGTGTC-3’和反向引物PEDV-VR(SEQ ID NO.2):5’-CAACACTATGTTCACTCA-3’。本发明还进一步提供了检测猪流行性腹泻病毒变异株的检测试剂盒。其检测方法以总RNA为模板,利用上述引物进行反转录PCR(RT-PCR)扩增,反应结束后根据扩增片段的位置判定结果。本发明的引物特异性好,检测方法快速简单,准确性高,为猪流行性腹泻病毒变异株的检测提供了保证。
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公开(公告)号:CN102928605A
公开(公告)日:2013-02-13
申请号:CN201210436636.1
申请日:2012-11-06
Applicant: 江苏省农业科学院
Inventor: 何孔旺 , 文世富 , 温立斌 , 王小敏 , 李彬 , 郭容利 , 俞正玉 , 茅爱华 , 倪艳秀 , 张雪寒 , 吕立新 , 周俊明 , 胡屹屹 , 汪伟 , 叶青 , 祝昊丹 , 于洋 , 沈江萍 , 周萍
IPC: G01N33/68 , G01N33/531
Abstract: 本发明涉及一种用于检测类猪圆环病毒P1抗体的间接ELISA试剂盒。属于生物技术领域。包括抗原重组蛋白的制备、间接ELISA建立、判定标准及临床血清学检测的应用。所述的抗原重组蛋白是利用pET-28a(+)原核表达载体,构建的表达类猪圆环病毒P1Cap衣壳蛋白C端部分氨基酸序列的3个重复的基因工程菌BLpET-28a-3pCap,并将表达的重组蛋白纯化后的Cap蛋白。该方法用于检测猪血清中类猪圆环病毒P1的抗体水平具有重复性好、特异性高的特点,可用于类猪圆环病毒P1血清学调查,为该病的防治和流行情况的掌握提供一种快速、简便的检测方法。目前该方法是国际上首次利用P1衣壳蛋白建立检测猪群中P1抗体的ELISA。
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公开(公告)号:CN112420128B
公开(公告)日:2024-04-30
申请号:CN202011335481.3
申请日:2020-11-25
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: G16B20/30 , G16B25/10 , G16B30/10 , C12Q1/6888 , C12Q1/6809
Abstract: 本发明提供一种提高母猪繁殖力的胚胎附植期子宫内膜关键基因鉴定方法,利用胚胎附植前期和中期的4头苏紫猪母猪,屠宰后采集其子宫内膜附植点组织,进行高通量测序数字基因表达谱分析,包括:测序数据过滤和碱基分布、序列比对分析、基因表达量、差异基因表达、GO功能富集分析及Pathway分析。本发明对猪胚胎附植前期和中期的子宫内膜附植点进行表达谱测序,可以进一步提示胚胎附植调控规律和猪高产仔机理。另外,猪的胚胎附植阶段比人长很多,且没有侵入子宫内膜上皮细胞,所以这使得猪成为一个很好的模式动物,可以用来做为人的疾病模型动物,用于研究人胚胎附植期的相关疾病治疗方法。表达谱测序(mRNA expression profile sequencing)技术为这些研究提供了新的机会。
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公开(公告)号:CN112063561B
公开(公告)日:2022-11-18
申请号:CN202011000342.5
申请日:2020-09-22
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明提供猪链球菌3型疫苗株及其应用,涉及兽用疫苗领域。猪链球菌3型疫苗株,分类命名为猪链球菌3型JSHZ,保藏编号为CCTCC NO:M 2019687。本发明还提供含有所述猪链球菌3型疫苗株的疫苗及该菌株在制备治疗或预防猪链球菌3型感染药物中的应用。本发明猪链球菌3型疫苗株,对小鼠和猪均显示较强的致病性,具有良好的生长性能和免疫原性,是优良的猪链球菌3型疫苗株。采用该疫苗免疫仔猪后能有效抵抗强毒攻击,显示出优良的免疫原性。
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公开(公告)号:CN113287570B
公开(公告)日:2022-07-19
申请号:CN202110605391.X
申请日:2021-06-01
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明提供一种BF2代苏紫猪生长发育性状检测方法,步骤为:S1、检测系统包括种猪舍、测定站、电子耳牌和计算机;S2、利用测定站记录苏紫猪在测定日龄内的采食量数据、增重数据、生产性能数据;S3、将采集到的采食数据、增重数据、生产性能数据传送至计算机内通过FIRE分析软件进行初步分析并备份;S4、数据储存、筛选、分类汇总后通过Excel和Access软件进行统计分析;不同猪组间测定数值的差异性显著水平通过SAS 8.2统计软件包进行GLM分析,结果以最小二乘均值±标准误差表示;S5、数据分析;S6、得到BF2代苏紫猪的生长发育性状。本发明根据BF2代苏紫猪特点,从日增重、饲料报酬、采食量、采食次数、采食时间、采食时体重等方面进行了此世代苏紫猪的生长性状分析。
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公开(公告)号:CN113311123A
公开(公告)日:2021-08-27
申请号:CN202110605392.4
申请日:2021-06-01
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: G01N33/12
Abstract: 本发明提供一种BF2代苏紫猪屠宰胴体性状检测方法,包括如下步骤:实验物品准备、实验猪准备、运输至屠宰场、流水线屠宰、现场测定性状,包括:耳号、宰前活重、分割前各部位重量、体尺测定、数第3根至最后一要肋骨处背最长肌测定、分割测定、肋骨数;回实验室后测定性状,包括:24h后PH值、24h后样品重量、肌内脂肪测定、其他测定和瘦肉率计算。本发明根据BF2代苏紫猪特点,从PH值、系水力、眼肌面积、肉色L/a/b、皮重、骨重、肌肉重、脂肪重进行了此世代苏紫猪肉的屠宰性状分析。本发明通过研究,确定了BF2代紫猪的屠宰胴体性状值,从胴体方面为猪血统鉴定研究提供帮助。
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