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公开(公告)号：CN114806910B
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202210187114.6
申请日：2022-02-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产L‑柠檬烯的热带假丝酵母工程菌及其构建方法，属于微生物技术领域。本发明以热带假丝酵母ATCC 20336为出发菌株，将来源于绿薄荷的柠檬烯合成酶和定点突变后的法尼基焦磷酸合成酶通过CRISPR‑Cas9技术整合至热带假丝酵母CU‑200的基因组上。经过表达后，重组热带假丝酵母的L‑柠檬烯产量达到了141.48mg/L。本发明的制备方法具有成本低、效率高、操作简易、前景广等特点。
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公开(公告)号：CN114686506A
公开(公告)日：2022-07-01
申请号：CN202210258118.9
申请日：2022-03-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种精准定量调控大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平的方法及应用，属于基因工程与发酵工程领域。本发明中构建的色氨酸操纵子结合温敏阻遏系统(TAT)共表达系统可实现大肠杆菌生长前期稳定正常生长，并通过控制发酵温度，调节结构基因的表达水平，以达到调控D,D‑羧肽酶实时表达量、有效促进重组蛋白胞外分泌的效果。本发明构建的共表达系统可提高重组大肠杆菌外膜的渗透性，提高了重组蛋白胞外分泌水平，对重组蛋白在大肠杆菌中的高效分泌与生产具有重要指导意义。
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公开(公告)号：CN114686414A
公开(公告)日：2022-07-01
申请号：CN202210258249.7
申请日：2022-03-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种精准定量调控大肠杆菌全细胞催化的方法及应用，属于基因工程与生物催化领域。本发明通过构建色氨酸操纵子及温敏阻遏系统，可实现大肠杆菌生长前期稳定、正常生长，稳定期促进目的蛋白的表达；该系统还通过控制发酵温度，调节结构基因的表达水平，调控D,D‑羧肽酶实时表达量，增加了胞内可溶性肽聚糖，提高了重组大肠杆菌外膜的透性，有助于催化反应的底物及产物自由穿梭于细胞内外，更加有效的促进全细胞的高效催化。
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公开(公告)号：CN113416662A
公开(公告)日：2021-09-21
申请号：CN202110621208.5
申请日：2021-06-03
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产西柏三烯一醇的酿酒酵母及应用，属于代谢工程和微生物工程领域。本发明通过将关键酶西柏三烯醇合成酶基因、香叶基香叶基焦磷酸(GGPP)合酶基因、法尼基焦磷酸合成酶(ERG20)基因整合至酿酒酵母菌株基因组上，并利用启动子Phxt1替换角鲨烯合成酶(ERG9)原来的启动子来敲低竞争途径麦角固醇途径，还将含有关键酶基因ggpp基因和cbts基因的游离质粒转入该酿酒酵母中，进一步提高了西柏三烯一醇产量。本发明还采用线粒体区室化方法，将GGPP合酶和西柏三烯醇合成酶定位到线粒体中，使西柏三烯一醇产量提高至283.98μg/L，在5L发酵罐发酵水平，西柏三烯一醇产量可达15mg/L。
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公开(公告)号：CN113388536A
公开(公告)日：2021-09-14
申请号：CN202110621179.2
申请日：2021-06-03
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了产西柏三烯一醇的酿酒酵母的构建方法及应用，属于代谢工程和微生物工程领域。本发明通过在酿酒酵母W303‑1A中异源表达西柏三烯一醇合成的2个关键酶香叶基香叶基焦磷酸合酶基因ggpps和西柏三烯醇合酶基因cbts，实现了西柏三烯一醇在酿酒酵母中的从头生产，并进一步通过与西柏三烯醇合酶基因cbts的串连过表达关键酶法尼基焦磷酸合成酶(ERG20)，获得的重组菌株的西柏三烯一醇产量显著提高。将上述途径构建至酿酒酵母BY4741中，其西柏三烯一醇的产量提高至对照菌株的3倍。在关键酶法尼基焦磷酸合成酶基因前添加启动子，进一步提高重组酿酒酵母的西柏三烯一醇产量。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103087962A
公开(公告)日：2013-05-08
申请号：CN201310036013.X
申请日：2013-01-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种生物酸化浸米用乳酸菌的高密度培养方法，具体包括以下步骤：以麸皮为原料，麸皮添加量为60-90g/l，使用500-900u/g麸皮的中性蛋白酶、40-80u/g麸皮的淀粉酶、500-900u/g麸皮的糖化酶进行酶解，过滤取滤液得到麸皮酶解液，在其中添加0.3%-0.6%的柠檬酸铵，调节pH值5-7。70℃-80℃保温25-45min灭酶、杀菌。以6%-12%的接种量接入乳酸菌，培养温度为30℃-37℃，培养时间为12-16h，菌体浓度达到3.0-6.0*109cfu/ml。本发明采用成本低廉的原料，添加柠檬酸铵起到补充无机氮源和缓冲调节pH的双重作用；使用非高压灭菌法，减少能耗和设备投入，整个操作流程简单易于实现。
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公开(公告)号：CN1687373A
公开(公告)日：2005-10-26
申请号：CN200510038763.6
申请日：2005-04-06
Applicant: 江南大学
IPC: C12G3/08
Abstract: 一种反渗透法生产低度黄酒的方法，涉及反渗透技术在黄酒行业的应用。本发明采用将黄酒通过高压泵打入反渗透装置，控制透过液流出，在浓缩液中补加适量饮用水，经过四次反渗透操作，即得低度黄酒产品，采用反渗透法制备低度黄酒，不需要改变黄酒的其他生产工艺，简化操作，产品酒精度可达到8％～9％，与原酒相比酒精度可降低40％～50％。所制得的低度黄酒能够保留原黄酒的各种风味物质，酒体丰满，口感淡爽，低度黄酒的理化指标和稳定性都符合要求，符合了现代消费者的需求。具有潜在的经济效益和社会效益。
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公开(公告)号：CN117802056B
公开(公告)日：2025-03-25
申请号：CN202311770042.9
申请日：2023-12-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效合成β‑紫罗兰酮的热带假丝酵母工程菌及应用，属于酶工程和代谢工程领域。本发明选取来源于植物矮牵牛的类胡萝卜素裂解双加氧酶基因PhCCD1，通过易错PCR对PhCCD1进行随机突变，以热带假丝酵母β‑胡萝卜素生产菌株ANT‑06为底盘细胞，分别在其过氧化物酶体、细胞质中表达了PhCCD1酶突变体，筛选并获得三株能够高效合成β‑紫罗兰酮的热带假丝酵母工程菌株，产量达到173.6±7.0mg/L、136±3.9m/L、177.9±4.3mg/L，并从工程菌中克隆测序获得PhCCD1酶突变体。
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公开(公告)号：CN118240859A
公开(公告)日：2024-06-25
申请号：CN202410298243.1
申请日：2024-03-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产角鲨烯的热带假丝酵母工程菌及其构建方法，属于微生物技术领域。本发明以热带假丝酵母DC03为出发菌株，将来源于酿酒酵母的角鲨烯合成酶基因通过CRISPR‑Cas9技术整合至热带假丝酵母菌株DC03的基因组上。通过代谢工程改造，整合表达了异源角鲨烯合酶基因ScERG9，并在过表达基因ScERG9后，将其与法尼基焦磷酸合酶基因ERG20进行融合表达，并敲除DPP1基因、弱化BTS1基因、下调ERG1基因表达等组合策略后，经发酵体积优化，重组热带假丝酵母的角鲨烯产量达到了202.5mg/L。本发明的制备方法具有成本低、效率高、操作简易、前景广等特点。
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公开(公告)号：CN117802056A
公开(公告)日：2024-04-02
申请号：CN202311770042.9
申请日：2023-12-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效合成β‑紫罗兰酮的热带假丝酵母工程菌及应用，属于酶工程和代谢工程领域。本发明选取来源于植物矮牵牛的类胡萝卜素裂解双加氧酶基因PhCCD1，通过易错PCR对PhCCD1进行随机突变，以热带假丝酵母β‑胡萝卜素生产菌株ANT‑06为底盘细胞，分别在其过氧化物酶体、细胞质中表达了PhCCD1酶突变体，筛选并获得三株能够高效合成β‑紫罗兰酮的热带假丝酵母工程菌株，产量达到173.6±7.0mg/L、136±3.9m/L、177.9±4.3mg/L，并从工程菌中克隆测序获得PhCCD1酶突变体。
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