一种细胞拆分装置和细胞拆分方法

    公开(公告)号:CN103923832A

    公开(公告)日:2014-07-16

    申请号:CN201410119555.8

    申请日:2014-03-27

    CPC classification number: C12M23/04 C12M23/08 C12M25/06 C12N5/00

    Abstract: 本发明公开了一种细胞拆分装置和细胞拆分方法。细胞拆分装置包括带内芯的离心管和细胞培养板;离心管内腔设有内芯,内芯设有带凸起的沿口部和封闭的尖形底部;培养板为与离心管内径相适配的圆形平板,圆形平板的正面边缘处设有撑脚,培养板正面朝下倒扣在内芯上方且撑脚抵在内芯的沿口部。细胞拆分方法包括细胞培养、细胞拆分、细胞核收集、细胞质收集。本发明通过设计适于拆分贴壁生长的细胞的细胞离心拆分装置,在常规离心速度11000~12000r/min的情况下,离心拆分细胞的效率达到90~95%。该细胞离心拆分装置的结构简单,离心拆分细胞方法方便高效且容易实现。

    小鼠裸卵体外成熟方法及小鼠裸卵体外成熟培养液

    公开(公告)号:CN103074296B

    公开(公告)日:2014-06-11

    申请号:CN201310020667.3

    申请日:2013-01-21

    Abstract: 本发明公开了小鼠裸卵体外成熟方法及小鼠裸卵体外成熟培养液。其中,小鼠裸卵体外成熟方法的步骤包括(1)小鼠裸卵的分离培养;(2)小鼠裸卵的成熟检测;(3)小鼠裸卵成熟后发育能力检测。小鼠裸卵体外成熟培养液由α-MEM+10%FBS+10ng/ml?EGF+1.5U/ml?hCG+1mM/ml?Glu+0.23mM/ml丙酮酸钠+10uM?Forskolin组成。本发明通过在小鼠卵母细胞培养体系中添加同卵母细胞体外成熟相关的化学试剂,建立了小鼠裸卵体外高效成熟发育体系,该体系不仅能够有效人工调控小鼠裸卵的体外成熟,而且成熟后的裸卵能够具有正常卵母细胞形成胚胎的发育能力,从而为小鼠作为实验动物模型在新品种培育、转基因育种和品种改良等方面的重要的材料,也为人类辅助生殖技术的纵深发展提供基础。

    动物细胞内核蛋白提取方法

    公开(公告)号:CN102277402B

    公开(公告)日:2013-07-03

    申请号:CN201110204137.5

    申请日:2011-07-20

    Abstract: 本发明公开了一种动物细胞内核蛋白提取方法。该方法通过利用细胞穿透肽、外源核蛋白和绿色荧光蛋白共同构建重组核蛋白表达载体,介导重组核蛋白在细胞核内表达,待重组核蛋白在细胞内表达稳定后,使用操作液处理细胞,收集细胞,超声波破碎,离心去沉淀后收集细胞上清液,上清液过滤除菌后添加到细胞培养液中,4h后提取的荧光标记外源重组核蛋白通过细胞质进入细胞核并定位于细胞核内。利用该方法提取的核蛋白能够发挥蛋白功能使细胞发生形态特征的改变,结果证实本发明能够简单、快速、高效地提取具有生物活性的细胞内核蛋白。

    乳腺特异表达人杀菌通透性增强蛋白载体构建方法

    公开(公告)号:CN102676581A

    公开(公告)日:2012-09-19

    申请号:CN201210100640.0

    申请日:2012-04-07

    Abstract: 本发明公开了一种乳腺特异表达人杀菌通透性增强蛋白载体构建方法,属于生物工程技术领域。体外合成包括目的基因hBPI的CDS序列,该CDS序列上游添加了XhoI酶切位点、Kozak序列、牛β-酪蛋白信号肽,下游添加了XhoI酶切位点;并将此体外合成序列定向克隆至经XhoI酶切的pBC1-loxp-neo-loxp-pBD载体;经菌液PCR和测序验证,获得了构建正确的人杀菌/通透性增强蛋白乳腺特异表达载体pBC1-loxp-Neo-loxp-hBPI。本发明经细胞C-127水平的功能验证表明该载体基因构建合理、有效,这将为成功制作动乳腺生物反应器生产hBPI蛋白奠定了坚实的基础。

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