一种鉴别三种药用黄精品种的方法

    公开(公告)号:CN111505171A

    公开(公告)日:2020-08-07

    申请号:CN202010512201.5

    申请日:2020-06-08

    Abstract: 本发明提供了一种鉴别三种药用黄精品种的方法,属于中药质量控制技术领域。本发明将三种药用黄精进行提取和衍生化处理后,利用气相色谱-质谱对药用黄精中的代谢物进行分析检测,并通过多元统计学方法筛选三种药用黄精的差异代谢物,所述差异代谢物作为鉴别三种药用黄精品种的特征性代谢产物,实现三种药用黄精品种的鉴别。本发明提供的方法准确度以及可靠性高,实验结果可信度高,为三种药用黄精的品质鉴定和质量控制提供了科学依据,有助于快速、准确鉴别市售药用黄精的真伪以及品质。

    一种砀山酥梨遗传转化方法

    公开(公告)号:CN105543278B

    公开(公告)日:2020-02-07

    申请号:CN201610076734.7

    申请日:2016-02-02

    Abstract: 本发明一种砀山酥梨遗传转化方法,包括以下步骤:(1)遗传转化受体的建立;(2)农杆菌的培养及侵染液的配置;(3)侵染与共培养;(4)除菌培养与筛选培养;(5)抗性愈伤组织GUS染色鉴定。本发明以砀山酥梨愈伤组织为受体,以NptII为标记基因,以GUS基因为报告基因,通过农杆菌EHA105介导的方法进行砀山酥梨的遗传转化,获得阳性愈伤组织,然后即可通过阳性愈伤组织再分化为试管苗;本发明首先建立起一种以砀山酥梨当年生新稍为外植体诱导出愈伤组织,进而进行遗传转化的方法,砀山酥梨春季新稍酚类物质含量低,而且携带病菌量少,接种褐化率和污染率都很低,而且取材方便,愈伤组织诱导率高,能够满足遗传转化的需求。

    一种梨漆酶基因PbLAC1及其载体、宿主细胞和应用

    公开(公告)号:CN109207493A

    公开(公告)日:2019-01-15

    申请号:CN201811170973.4

    申请日:2018-10-09

    Abstract: 本发明涉及植物分子生物学和基因工程技术领域,提供了一种梨漆酶基因PbLAC1,核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了一种植物超量表达载体,所述植物超量表达载体包括PbLAC1构建的pMD-18T-PbLAC1质粒。本发明还提供了一种遗传工程化的宿主细胞,所述宿主细胞包括PbLAC1基因序列。本发明还提供了上述梨漆酶基因PbLAC1在调控植物木质素合成及细胞壁发育中的应用。本发明的梨漆酶基因PbLAC1为完善植物木质素合成途径提供了新的证据,对水果品质改良以及作物其他关键农艺性状的改良也具有重要的理论及实践意义,同时,还为利用基因工程调控梨石细胞含量提供了新的途径。

    在8-9月份基于短截枝条获取外植体以提高砀山酥梨组培苗成活率的方法

    公开(公告)号:CN105766643B

    公开(公告)日:2018-08-21

    申请号:CN201610189335.1

    申请日:2016-03-28

    Abstract: 一种在8‑9月份基于短截枝条获取外植体以提高砀山酥梨组培苗成活率的方法,该方法是在8‑9月份,选择树龄20年以内的梨树,并选择生长健壮无病虫害一年生的背上枝或徒长枝,在其芽体饱满充实处进行短截,诱发梨植株在剪口下萌发新梢,待新梢生长8㎝~10㎝时,剪下该新梢作为组培外植体;外植体经消毒、诱导培养、增殖分化培养、接穗培养和嫁接等步骤获得砀山酥梨种苗。本发明方法简单,操作容易,不增加其他成本;根据组培计划,需要多少外植体,就提前处理多少枝条。在8‑9月份可以通过本发明方法获得充足的砀山酥梨再生植株,满足利用基因工程进行种质改良研究或砀山酥梨规模化种苗繁殖等;且本发明组培方法成活率达96%以上。

    一种5-羟基松柏醛和5-羟基松柏醇的同步检测方法

    公开(公告)号:CN108344814A

    公开(公告)日:2018-07-31

    申请号:CN201810063847.2

    申请日:2018-01-23

    Abstract: 本发明提供了一种5-羟基松柏醛和5-羟基松柏醇的同步检测方法,首先,采用高效液相色谱法测定待测样品中5-羟基松柏醛的吸光度和5-羟基松柏醇的吸光度,其中,检测波长为243nm;所述高效液相色谱法采用梯度洗脱,所述梯度洗脱中洗脱剂包括甲醇和水;然后根据5-羟基松柏醛的标准曲线和待测样品中5-羟基松柏醛的吸光度,得到所述待测样品中5-羟基松柏醛的浓度;根据5-羟基松柏醇的标准曲线和待测样品中5-羟基松柏醇的吸光度,得到所述待测样品中5-羟基松柏醇的浓度。本发明提供的方法能够有效地分离5-羟基松柏醛和5-羟基松柏醇,而且能够分别检测5-羟基松柏醛和5-羟基松柏醇的浓度。

    在6-7月份基于新梢摘心获取外植体以提高砀山酥梨组培成活率的方法

    公开(公告)号:CN105815219B

    公开(公告)日:2018-07-03

    申请号:CN201610189334.7

    申请日:2016-03-28

    Abstract: 本发明公开了一种在6‑7月份基于新梢摘心获取外植体以提高砀山酥梨组培成活率的方法,首先在6‑7月份,选择田间生长健壮无病虫害的一年生强旺新梢进行摘心,促使原新稍重新再诱发生长新的新梢,待新的新梢生长至10㎝~15㎝时,剪下该新稍即得组培外植体,然后再将外植体经消毒、诱导培养、增殖分化培养、接穗培养和嫁接等步骤获得砀山酥梨再生植株。本发明方法简单,操作容易,不增加其他成本。在6‑7月份也可以通过人工强摘心措施获得充足优良的组培外植体,培育出砀山酥梨再生植株,满足砀山酥梨规模化种苗繁殖或利用基因工程进行种质改良研究等;且本发明组培方法成活率达96%。

    一种气质联用分离检测松柏醇和芥子醇的方法

    公开(公告)号:CN106442794A

    公开(公告)日:2017-02-22

    申请号:CN201610921367.6

    申请日:2016-10-21

    CPC classification number: G01N30/02 G01N30/06 G01N2030/067

    Abstract: 本发明公开了一种气质联用分离检测松柏醇和芥子醇的方法,包括以下步骤:(1)将含有松柏醇和/或芥子醇的样品溶于色谱级吡啶中,得到样品溶液,然后对样品溶液进行衍生化处理,得待测样品;(2)对步骤(1)所得的待测样品使用气相色谱-质谱联用技术进行分离检测。本发明应用气相色谱-质谱联用的方法分离检测松柏醇和芥子醇,能够有效地分离检测松柏醇和芥子醇,并且确定了松柏醇保留时间和主要离子峰,以及芥子醇保留时间和主要离子峰,填补了NIST库中松柏醇和芥子醇衍生化后结构的空白,构建了松柏醇和芥子醇衍生化后GC-MS检测质谱图,能够用来分离检测松柏醇和芥子醇,检测准确性高;且本发明工艺简单,容易实施,具有非常好的应用前景。

    在6-7月份基于新梢摘心获取外植体以提高砀山酥梨组培成活率的方法

    公开(公告)号:CN105815219A

    公开(公告)日:2016-08-03

    申请号:CN201610189334.7

    申请日:2016-03-28

    CPC classification number: A01H4/008

    Abstract: 本发明公开了一种在6?7月份基于新梢摘心获取外植体以提高砀山酥梨组培成活率的方法,首先在6?7月份,选择田间生长健壮无病虫害的一年生强旺新梢进行摘心,促使原新稍重新再诱发生长新的新梢,待新的新梢生长至10㎝~15㎝时,剪下该新稍即得组培外植体,然后再将外植体经消毒、诱导培养、增殖分化培养、接穗培养和嫁接等步骤获得砀山酥梨再生植株。本发明方法简单,操作容易,不增加其他成本。在6?7月份也可以通过人工强摘心措施获得充足优良的组培外植体,培育出砀山酥梨再生植株,满足砀山酥梨规模化种苗繁殖或利用基因工程进行种质改良研究等;且本发明组培方法成活率达96%。

    一种砀山酥梨遗传转化方法

    公开(公告)号:CN105543278A

    公开(公告)日:2016-05-04

    申请号:CN201610076734.7

    申请日:2016-02-02

    Abstract: 本发明一种砀山酥梨遗传转化方法,包括以下步骤:(1)遗传转化受体的建立;(2)农杆菌的培养及侵染液的配置;(3)侵染与共培养;(4)除菌培养与筛选培养;(5)抗性愈伤组织GUS染色鉴定。本发明以砀山酥梨愈伤组织为受体,以NptII为标记基因,以GUS基因为报告基因,通过农杆菌EHA105介导的方法进行砀山酥梨的遗传转化,获得阳性愈伤组织,然后即可通过阳性愈伤组织再分化为试管苗;本发明首先建立起一种以砀山酥梨当年生新稍为外植体诱导出愈伤组织,进而进行遗传转化的方法,砀山酥梨春季新稍酚类物质含量低,而且携带病菌量少,接种褐化率和污染率都很低,而且取材方便,愈伤组织诱导率高,能够满足遗传转化的需求。

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