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公开(公告)号：CN109207493B
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN201811170973.4
申请日：2018-10-09
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明涉及植物分子生物学和基因工程技术领域，提供了一种梨漆酶基因PbLAC1，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了一种植物超量表达载体，所述植物超量表达载体包括PbLAC1构建的pMD‑18T‑PbLAC1质粒。本发明还提供了一种遗传工程化的宿主细胞，所述宿主细胞包括PbLAC1基因序列。本发明还提供了上述梨漆酶基因PbLAC1在调控植物木质素合成及细胞壁发育中的应用。本发明的梨漆酶基因PbLAC1为完善植物木质素合成途径提供了新的证据，对水果品质改良以及作物其他关键农艺性状的改良也具有重要的理论及实践意义，同时，还为利用基因工程调控梨石细胞含量提供了新的途径。
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公开(公告)号：CN105766584B
公开(公告)日：2018-07-10
申请号：CN201610189333.2
申请日：2016-03-28
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了一种砀山酥梨外植体及提高组培苗成活率的方法，选择田间生长健壮、芽体饱满无病虫害的一年生中庸枝，通过人工培养获得5㎝‑10㎝的“新稍”，将其作为组培的外植体，然后再将该外植体经消毒及预处理、诱导培养、增殖分化培养、接穗培养和嫁接等步骤获得砀山酥梨种苗。本发明方法简单，充分利用冬季修剪去除的将丢弃的枝条。通过本发明人工方式获得大量“新稍”，提供组培所需足够的外植体，可进行砀山酥梨工厂化快速繁殖脱毒的优良种苗；且本发明组培方法成活率达96％。
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公开(公告)号：CN105766643A
公开(公告)日：2016-07-20
申请号：CN201610189335.1
申请日：2016-03-28
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 一种在8?9月份基于短截枝条获取外植体以提高砀山酥梨组培苗成活率的方法，该方法是在8?9月份，选择树龄20年以内的梨树，并选择生长健壮无病虫害一年生的背上枝或徒长枝，在其芽体饱满充实处进行短截，诱发梨植株在剪口下萌发新梢，待新梢生长8㎝～10㎝时，剪下该新梢作为组培外植体；外植体经消毒、诱导培养、增殖分化培养、接穗培养和嫁接等步骤获得砀山酥梨种苗。本发明方法简单，操作容易，不增加其他成本；根据组培计划，需要多少外植体，就提前处理多少枝条。在8?9月份可以通过本发明方法获得充足的砀山酥梨再生植株，满足利用基因工程进行种质改良研究或砀山酥梨规模化种苗繁殖等；且本发明组培方法成活率达96％以上。
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公开(公告)号：CN105543278B
公开(公告)日：2020-02-07
申请号：CN201610076734.7
申请日：2016-02-02
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明一种砀山酥梨遗传转化方法，包括以下步骤：(1)遗传转化受体的建立；(2)农杆菌的培养及侵染液的配置；(3)侵染与共培养；(4)除菌培养与筛选培养；(5)抗性愈伤组织GUS染色鉴定。本发明以砀山酥梨愈伤组织为受体，以NptII为标记基因，以GUS基因为报告基因，通过农杆菌EHA105介导的方法进行砀山酥梨的遗传转化，获得阳性愈伤组织，然后即可通过阳性愈伤组织再分化为试管苗；本发明首先建立起一种以砀山酥梨当年生新稍为外植体诱导出愈伤组织，进而进行遗传转化的方法，砀山酥梨春季新稍酚类物质含量低，而且携带病菌量少，接种褐化率和污染率都很低，而且取材方便，愈伤组织诱导率高，能够满足遗传转化的需求。
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公开(公告)号：CN109207493A
公开(公告)日：2019-01-15
申请号：CN201811170973.4
申请日：2018-10-09
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明涉及植物分子生物学和基因工程技术领域，提供了一种梨漆酶基因PbLAC1，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了一种植物超量表达载体，所述植物超量表达载体包括PbLAC1构建的pMD-18T-PbLAC1质粒。本发明还提供了一种遗传工程化的宿主细胞，所述宿主细胞包括PbLAC1基因序列。本发明还提供了上述梨漆酶基因PbLAC1在调控植物木质素合成及细胞壁发育中的应用。本发明的梨漆酶基因PbLAC1为完善植物木质素合成途径提供了新的证据，对水果品质改良以及作物其他关键农艺性状的改良也具有重要的理论及实践意义，同时，还为利用基因工程调控梨石细胞含量提供了新的途径。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105766643B
公开(公告)日：2018-08-21
申请号：CN201610189335.1
申请日：2016-03-28
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 一种在8‑9月份基于短截枝条获取外植体以提高砀山酥梨组培苗成活率的方法，该方法是在8‑9月份，选择树龄20年以内的梨树，并选择生长健壮无病虫害一年生的背上枝或徒长枝，在其芽体饱满充实处进行短截，诱发梨植株在剪口下萌发新梢，待新梢生长8㎝～10㎝时，剪下该新梢作为组培外植体；外植体经消毒、诱导培养、增殖分化培养、接穗培养和嫁接等步骤获得砀山酥梨种苗。本发明方法简单，操作容易，不增加其他成本；根据组培计划，需要多少外植体，就提前处理多少枝条。在8‑9月份可以通过本发明方法获得充足的砀山酥梨再生植株，满足利用基因工程进行种质改良研究或砀山酥梨规模化种苗繁殖等；且本发明组培方法成活率达96％以上。
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公开(公告)号：CN105815219B
公开(公告)日：2018-07-03
申请号：CN201610189334.7
申请日：2016-03-28
Applicant: 安徽农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种在6‑7月份基于新梢摘心获取外植体以提高砀山酥梨组培成活率的方法，首先在6‑7月份，选择田间生长健壮无病虫害的一年生强旺新梢进行摘心，促使原新稍重新再诱发生长新的新梢，待新的新梢生长至10㎝～15㎝时，剪下该新稍即得组培外植体，然后再将外植体经消毒、诱导培养、增殖分化培养、接穗培养和嫁接等步骤获得砀山酥梨再生植株。本发明方法简单，操作容易，不增加其他成本。在6‑7月份也可以通过人工强摘心措施获得充足优良的组培外植体，培育出砀山酥梨再生植株，满足砀山酥梨规模化种苗繁殖或利用基因工程进行种质改良研究等；且本发明组培方法成活率达96％。
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公开(公告)号：CN105815219A
公开(公告)日：2016-08-03
申请号：CN201610189334.7
申请日：2016-03-28
Applicant: 安徽农业大学
IPC: A01H4/00
CPC classification number: A01H4/008
Abstract: 本发明公开了一种在6?7月份基于新梢摘心获取外植体以提高砀山酥梨组培成活率的方法，首先在6?7月份，选择田间生长健壮无病虫害的一年生强旺新梢进行摘心，促使原新稍重新再诱发生长新的新梢，待新的新梢生长至10㎝～15㎝时，剪下该新稍即得组培外植体，然后再将外植体经消毒、诱导培养、增殖分化培养、接穗培养和嫁接等步骤获得砀山酥梨再生植株。本发明方法简单，操作容易，不增加其他成本。在6?7月份也可以通过人工强摘心措施获得充足优良的组培外植体，培育出砀山酥梨再生植株，满足砀山酥梨规模化种苗繁殖或利用基因工程进行种质改良研究等；且本发明组培方法成活率达96％。
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公开(公告)号：CN105766584A
公开(公告)日：2016-07-20
申请号：CN201610189333.2
申请日：2016-03-28
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了一种在10月?翌年2月通过人工培养获取外植体及提高砀山酥梨组培苗成活率的方法，选择田间生长健壮、芽体饱满无病虫害的一年生中庸枝，通过人工培养获得5㎝?10㎝的“新稍”，将其作为组培的外植体，然后再将该外植体经消毒及预处理、诱导培养、增殖分化培养、接穗培养和嫁接等步骤获得砀山酥梨种苗。本发明方法简单，充分利用冬季修剪去除的将丢弃的枝条。通过本发明人工方式获得大量“新稍”，提供组培所需足够的外植体，可进行砀山酥梨工厂化快速繁殖脱毒的优良种苗；且本发明组培方法成活率达96％。
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公开(公告)号：CN105543278A
公开(公告)日：2016-05-04
申请号：CN201610076734.7
申请日：2016-02-02
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明一种砀山酥梨遗传转化方法，包括以下步骤：(1)遗传转化受体的建立；(2)农杆菌的培养及侵染液的配置；(3)侵染与共培养；(4)除菌培养与筛选培养；(5)抗性愈伤组织GUS染色鉴定。本发明以砀山酥梨愈伤组织为受体，以NptII为标记基因，以GUS基因为报告基因，通过农杆菌EHA105介导的方法进行砀山酥梨的遗传转化，获得阳性愈伤组织，然后即可通过阳性愈伤组织再分化为试管苗；本发明首先建立起一种以砀山酥梨当年生新稍为外植体诱导出愈伤组织，进而进行遗传转化的方法，砀山酥梨春季新稍酚类物质含量低，而且携带病菌量少，接种褐化率和污染率都很低，而且取材方便，愈伤组织诱导率高，能够满足遗传转化的需求。
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