一种筛选砀山酥梨适宜授粉梨品种的方法

    公开(公告)号:CN105400887A

    公开(公告)日:2016-03-16

    申请号:CN201510962652.8

    申请日:2015-12-16

    CPC classification number: C12Q1/6895 C12Q2600/156

    Abstract: 一种筛选砀山酥梨适宜授粉梨品种的方法,具体步骤是:(1)提取授粉梨品种叶片的DNA;(2)进行SCoT-PCR反应,计算遗传相似系数,构建授粉梨品种之间的亲缘关系聚类图;(3)根据聚类分析结果,选取亲缘关系远、中、近的授粉品种树给砀山酥梨进行授粉;(4)对每个授粉品种所结成熟果实果肉组织的石细胞团数目及面积进行显微观察、计算;并测定石细胞含量;(5)通过步骤(4)的分析结果,筛选出最优亲缘关系授粉梨品种。本发明可以快速准确的从分子层面揭示不同梨品种资源间的亲缘关系,通过分析不同亲缘关系授粉品种对砀山酥梨果实石细胞大小及含量的影响,进而筛选出适宜亲缘关系的优良授粉品种,改善砀山酥梨果实的石细胞含量,提高砀山酥梨果实品质。

    一种用高效液相色谱法分离测定松柏醇和芥子醇含量的方法

    公开(公告)号:CN104535667B

    公开(公告)日:2017-01-04

    申请号:CN201410605969.1

    申请日:2014-10-30

    Abstract: 本发明公开了一种利用高效液相色谱法分离检测松柏醇和芥子醇含量的方法。打破了常规用高相气相色谱测定松柏醇的方法,并且此方法可以同时检测松柏醇和芥子醇。另外可以实现和酸类物质在同一种条件下测定的方法,使实验数据更能说明问题。该方法采用C18柱,流动相为水和甲醇,体积流量为0.4-0.7mL/min,柱温为25-30℃,分析时间为70min,检测波长为275nm,进样量为20uL,能够有效的检测分离松柏醇和芥子醇,并且峰形较好,能够用来分离测定样品中松柏醇和芥子醇。

    一种气质联用分离检测松柏醇和芥子醇的方法

    公开(公告)号:CN106442794B

    公开(公告)日:2018-12-18

    申请号:CN201610921367.6

    申请日:2016-10-21

    Abstract: 本发明公开了一种气质联用分离检测松柏醇和芥子醇的方法,包括以下步骤:(1)将含有松柏醇和/或芥子醇的样品溶于色谱级吡啶中,得到样品溶液,然后对样品溶液进行衍生化处理,得待测样品;(2)对步骤(1)所得的待测样品使用气相色谱‑质谱联用技术进行分离检测。本发明应用气相色谱‑质谱联用的方法分离检测松柏醇和芥子醇,能够有效地分离检测松柏醇和芥子醇,并且确定了松柏醇保留时间和主要离子峰,以及芥子醇保留时间和主要离子峰,填补了NIST库中松柏醇和芥子醇衍生化后结构的空白,构建了松柏醇和芥子醇衍生化后GC‑MS检测质谱图,能够用来分离检测松柏醇和芥子醇,检测准确性高;且本发明工艺简单,容易实施,具有非常好的应用前景。

    一种用高效液相色谱法分离测定松柏醇和芥子醇含量的方法

    公开(公告)号:CN104535667A

    公开(公告)日:2015-04-22

    申请号:CN201410605969.1

    申请日:2014-10-30

    Abstract: 本发明公开了一种利用高效液相色谱法分离检测松柏醇和芥子醇含量的方法。打破了常规用高相气相色谱测定松柏醇的方法,并且此方法可以同时检测松柏醇和芥子醇。另外可以实现和酸类物质在同一种条件下测定的方法,使实验数据更能说明问题。该方法采用C18柱,流动相为水和甲醇,体积流量为0.4-0.7mL/min,柱温为25-30℃,分析时间为70min,检测波长为275nm,进样量为20uL,能够有效的检测分离松柏醇和芥子醇,并且峰形较好,能够用来分离测定样品中松柏醇和芥子醇。

    一种砀山酥梨遗传转化方法

    公开(公告)号:CN105543278B

    公开(公告)日:2020-02-07

    申请号:CN201610076734.7

    申请日:2016-02-02

    Abstract: 本发明一种砀山酥梨遗传转化方法,包括以下步骤:(1)遗传转化受体的建立;(2)农杆菌的培养及侵染液的配置;(3)侵染与共培养;(4)除菌培养与筛选培养;(5)抗性愈伤组织GUS染色鉴定。本发明以砀山酥梨愈伤组织为受体,以NptII为标记基因,以GUS基因为报告基因,通过农杆菌EHA105介导的方法进行砀山酥梨的遗传转化,获得阳性愈伤组织,然后即可通过阳性愈伤组织再分化为试管苗;本发明首先建立起一种以砀山酥梨当年生新稍为外植体诱导出愈伤组织,进而进行遗传转化的方法,砀山酥梨春季新稍酚类物质含量低,而且携带病菌量少,接种褐化率和污染率都很低,而且取材方便,愈伤组织诱导率高,能够满足遗传转化的需求。

    在8-9月份基于短截枝条获取外植体以提高砀山酥梨组培苗成活率的方法

    公开(公告)号:CN105766643B

    公开(公告)日:2018-08-21

    申请号:CN201610189335.1

    申请日:2016-03-28

    Abstract: 一种在8‑9月份基于短截枝条获取外植体以提高砀山酥梨组培苗成活率的方法,该方法是在8‑9月份,选择树龄20年以内的梨树,并选择生长健壮无病虫害一年生的背上枝或徒长枝,在其芽体饱满充实处进行短截,诱发梨植株在剪口下萌发新梢,待新梢生长8㎝~10㎝时,剪下该新梢作为组培外植体;外植体经消毒、诱导培养、增殖分化培养、接穗培养和嫁接等步骤获得砀山酥梨种苗。本发明方法简单,操作容易,不增加其他成本;根据组培计划,需要多少外植体,就提前处理多少枝条。在8‑9月份可以通过本发明方法获得充足的砀山酥梨再生植株,满足利用基因工程进行种质改良研究或砀山酥梨规模化种苗繁殖等;且本发明组培方法成活率达96%以上。

    在6-7月份基于新梢摘心获取外植体以提高砀山酥梨组培成活率的方法

    公开(公告)号:CN105815219B

    公开(公告)日:2018-07-03

    申请号:CN201610189334.7

    申请日:2016-03-28

    Abstract: 本发明公开了一种在6‑7月份基于新梢摘心获取外植体以提高砀山酥梨组培成活率的方法,首先在6‑7月份,选择田间生长健壮无病虫害的一年生强旺新梢进行摘心,促使原新稍重新再诱发生长新的新梢,待新的新梢生长至10㎝~15㎝时,剪下该新稍即得组培外植体,然后再将外植体经消毒、诱导培养、增殖分化培养、接穗培养和嫁接等步骤获得砀山酥梨再生植株。本发明方法简单,操作容易,不增加其他成本。在6‑7月份也可以通过人工强摘心措施获得充足优良的组培外植体,培育出砀山酥梨再生植株,满足砀山酥梨规模化种苗繁殖或利用基因工程进行种质改良研究等;且本发明组培方法成活率达96%。

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